摘要：kexuejishudefazhan，shidesepujishuyededaojinyibudefazhan，buduanyouxindelianyongdejishudedaoyingyong。shengwuyixuedefazhan
，yebuduanyaoqiugaolingminhegaoxuanzexingdefangfaduiyanjiudeduixiangjinxingdingxinghedingliangdeyanjiu。

　　

　　關鍵詞：色譜柱維護與保養高壓液相色譜應用

　　

　　引言

　　

　　色譜作為一種分離技術與方法
，自本世紀初起已經有100多年的曆史了，現在已經成為分析化學學科中的一個重要的分支。在人類進入新時代之際
，人們麵臨著在信息科學、生命科學
、材料科學、環境科學等領域的快速發展的挑戰
，在這些領域人才的需求成為國家高度發展的至關重要的因素。而色譜技術是生命科學
、材料科學、環境科學必不可少的手段和工具。根據最近的統計在全世界各類分析儀器中氣象色譜儀和液相色譜儀的營銷總額占25%-30%。

　　

　　kexuejishudefazhan，shidesepujishuyededaojinyibudefazhan，buduanyouxindelianyongdejishudedaoyingyong。shengwuyixuedefazhan，yebuduanyaoqiugaolingminhegaoxuanzexingdefangfaduiyanjiudeduixiangjinxingdingxinghedingliangdeyanjiu。

　　

　　1、色譜柱的相關性質

　　

　　1.1色譜柱的定義：裝填有固定相用以分離混合組分的柱管。多為金屬或玻璃製作。有直管形
、盤管形、U形管等形狀。

　　

　　1.2分類：色(se)譜(pu)柱(zhu)可(ke)分(fen)為(wei)填(tian)充(chong)柱(zhu)和(he)開(kai)管(guan)柱(zhu)兩(liang)大(da)類(lei)。液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)通(tong)常(chang)均(jun)采(cai)用(yong)填(tian)充(chong)柱(zhu)。色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)分(fen)離(li)效(xiao)果(guo)取(qu)決(jue)於(yu)所(suo)選(xuan)擇(ze)的(de)固(gu)定(ding)相(xiang)
，以(yi)及(ji)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)製(zhi)備(bei)和(he)操(cao)作(zuo)條(tiao)件(jian)。簡(jian)單(dan)而(er)言(yan)：常見的分配住填料：碳十八柱(ODS/C18)、碳八柱(Octy了/C8)、碳六柱(Hexyl/C6)、碳四柱(Butyl/C4)、碳一注(Methyl/C1)
、陰離子交換柱(SAX)、陽離子交換柱(SCX)、苯基柱(Phenyl)、氨基柱(Amino/NH2)、氰基柱(Cyano/CN/Nitrile)。常見的吸附柱填料：矽膠柱

　　

　　色譜柱的選擇會直接影響混合物中組分的分離。舉例來講：對於填充柱而言，可選擇的固定相較多，柱容量較大，但是受柱長的限製
，分離能力有限，主要應用於簡單化合物的分離。

　　

　　2、色譜柱的維護與保養

　　

　　2.1色se譜pu柱zhu的de維wei護hu。我wo們men在zai使shi用yong新xin的de色se譜pu柱zhu應ying該gai在zai我wo們men自zi己ji的de液ye相xiang色se譜pu儀yi上shang進jin行xing性xing能neng測ce試shi，即ji使shi用yong色se譜pu柱zhu附fu帶dai的de檢jian驗yan報bao告gao上shang測ce試shi條tiao件jian和he樣yang品pin來lai測ce定ding該gai色se譜pu柱zhu的de柱zhu效xiao。並bing且qie
，在zai以yi後hou的de使shi用yong中zhong

，應ying時shi常chang對dui色se譜pu柱zhu進jin行xing測ce試shi。而er且qie在zai使shi用yong的de過guo程cheng中zhong常chang常chang有you堵du塞sai的de現xian象xiang
，造zao成cheng這zhe種zhong現xian象xiang的de主zhu要yao原yuan因yin是shi①溶劑中的不溶物②樣品中的不溶物③泵進樣器等中的不溶物④柱內不溶物的形成等。如果當色譜柱堵塞以後我們可以對色譜柱進行修複，首先，使用含鹽緩衝液後(如離子對試劑)應用溶解性強的溶劑(如水)進行衝洗。其次，先斷開檢測器

，然後用對來自樣品中的物質有強溶解性的溶劑進行衝洗
，對於反相色譜柱
，可使用甲醇
、乙睛、四氫呋喃、氯仿
、庚烷等
，在此條件下，應避免溶劑的pH低於2或高於8。最zui後hou如ru果guo經jing過guo上shang述shu還hai是shi沒mei有you修xiu複fu
，色se譜pu柱zhu壓ya力li還hai是shi沒mei有you下xia降jiang，則ze要yao斷duan開kai檢jian測ce器qi，將jiang色se譜pu柱zhu反fan方fang向xiang放fang置zhi，然ran後hou檢jian查zha柱zhu壓ya，若ruo壓ya力li穩wen定ding下xia降jiang，則ze保bao持chi色se譜pu柱zhu反fan方fang向xiang連lian接jie，用yong低di於yu0.5ml/min流(liu)速(su)衝(chong)洗(xi)一(yi)小(xiao)時(shi)。如(ru)果(guo)壓(ya)力(li)不(bu)下(xia)降(jiang)，則(ze)要(yao)看(kan)內(nei)置(zhi)過(guo)濾(lv)器(qi)是(shi)否(fou)被(bei)堵(du)塞(sai)
，如(ru)果(guo)被(bei)堵(du)塞(sai)應(ying)衝(chong)洗(xi)或(huo)更(geng)換(huan)，若(ruo)進(jin)口(kou)端(duan)的(de)填(tian)料(liao)發(fa)生(sheng)堵(du)塞(sai)
，柱(zhu)子(zi)將(jiang)不(bu)可(ke)能(neng)被(bei)徹(che)底(di)恢(hui)複(fu)
，隻(zhi)能(neng)通(tong)過(guo)去(qu)掉(diao)進(jin)口(kou)端(duan)的(de)部(bu)分(fen)填(tian)料(liao)，重(zhong)新(xin)填(tian)充(chong)進(jin)行(xing)有(you)限(xian)的(de)柱(zhu)效(xiao)恢(hui)複(fu)。而(er)且(qie)修(xiu)複(fu)的(de)厚(hou)度(du)是(shi)2-5mm。

　　

　　2.2色譜柱的保養。色譜柱在使用前
，最好進行柱的性能測試，並將結果保存起來，作為今後評價柱性能變化的參考。但要注意：柱性能可能由於所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同
；另外，在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行(出廠測試所使用的條件是最佳條件)，隻有這樣，測得的結果才有可比性。我們在對色譜柱使用前進行測試以後
，我們要根據不同的情況對色譜柱進行保養：①反相色譜柱每天實驗後的保養：使用緩衝液或含鹽的流動相
，實驗完成後應用10%的甲醇/水衝洗30分鍾

，洗掉色譜柱中的鹽

，再用甲醇衝洗30分鍾。注意：不能用純水衝洗柱子，應該在水中加入10%的甲醇，防止將填料衝塌陷。②長期保存色譜柱：如(ru)色(se)譜(pu)柱(zhu)要(yao)長(chang)時(shi)間(jian)保(bao)存(cun)，必(bi)須(xu)存(cun)於(yu)合(he)適(shi)的(de)溶(rong)劑(ji)下(xia)。對(dui)於(yu)反(fan)相(xiang)柱(zhu)可(ke)以(yi)儲(chu)存(cun)於(yu)純(chun)甲(jia)醇(chun)或(huo)乙(yi)腈(jing)中(zhong)
，正(zheng)相(xiang)柱(zhu)可(ke)以(yi)儲(chu)存(cun)於(yu)嚴(yan)格(ge)脫(tuo)水(shui)後(hou)的(de)純(chun)正(zheng)己(ji)烷(wan)中(zhong)，離(li)子(zi)交(jiao)換(huan)柱(zhu)可(ke)以(yi)儲(chu)存(cun)於(yu)水(shui)(含防腐劑疊氮化鈉或柳硫汞)中，並將購買新色譜柱時附送的堵頭堵上。儲存的溫度最好是室溫。

 

概括起來就是：①柱子在任何情況下不能碰撞、彎曲或強烈震動
；②當柱子和色譜儀聯結時
，閥件或管路一定要清洗幹淨；③要注意流動相的脫氣；④避免使用高粘度的溶劑作為流動相；⑤進樣樣品要提純；⑥嚴格控製進樣量；⑦每天分析工作結束後，要清洗進樣閥中殘留的樣品；⑧每天分析測定結束後，都要用適當的溶劑來清洗柱
；⑨若分析柱長期不使用，應用適當有機溶劑保存並封閉。

　　

　　3、色譜柱的維護與保養在高壓液相色譜中的應用

　　

　　高效液相色譜(HPLC)是20世紀60年代後期發展起來的分離分析技術，是現代分離測定的重要手段。問世以來，因其具有分離效能高
、分析速度快、檢測靈敏度好、能分析高沸點但不能氣化的熱不穩定生理活性物質的特點而被廣泛應用於生物化學、yaowujilinchuangfenxi。gaoxiaoyexiangsepuzhushixiaohaopin，huisuishiyongshijianhuojinyangdecishuzengjia，chuxiansepufenggaojiangdi，fengkuanjiadahuochuxianjianfeng
，zhuxiaoxiajiang。xuyaodingqijinxingchediqingxihezaisheng，butongdesepuzhuqingxifangfagebuxiangtongbiru：

　　

　　3.1反相柱分別用甲醇:水=90:10，純甲醇(HPLC級)，異丙醇(HPLC級)
，二氯甲烷(HPLC級)等溶劑作為流動相，依次衝洗，每種流動相流經色譜柱不少於20倍的色譜柱體積.然後再以相反的次序衝洗。

　　

　　3.2正相柱分別用正己烷(HPLC級)
，異丙醇(HPLC級)，二氯甲烷(HPLC級)，甲醇(HPLC級)等溶劑做流動相
，順次衝洗，每種流動相流經色譜柱不少於20倍的柱體積(異丙醇粘度大
，可降低流速
，避免壓力過高).注意使用溶劑的次序不要顛倒

，用甲醇衝洗完後
，再以相反的次序衝洗至正己烷，所有的流動相必須嚴格脫水。

　　

　　3.3離(li)子(zi)交(jiao)換(huan)柱(zhu)長(chang)時(shi)間(jian)在(zai)緩(huan)衝(chong)溶(rong)液(ye)中(zhong)使(shi)用(yong)和(he)進(jin)樣(yang)
，將(jiang)導(dao)致(zhi)色(se)譜(pu)柱(zhu)離(li)子(zi)交(jiao)換(huan)能(neng)力(li)下(xia)降(jiang)，用(yong)稀(xi)酸(suan)緩(huan)衝(chong)溶(rong)液(ye)衝(chong)洗(xi)可(ke)以(yi)使(shi)陽(yang)離(li)子(zi)柱(zhu)再(zai)生(sheng)，反(fan)之(zhi)
，用(yong)稀(xi)堿(jian)緩(huan)衝(chong)溶(rong)液(ye)衝(chong)洗(xi)可(ke)以(yi)使(shi)陰(yin)離(li)子(zi)柱(zhu)再(zai)生(sheng)。

　　

　　另外，還可以選擇能溶解柱內汙染物的溶劑為流動相做正方向和反方向衝洗。但再生後的色譜柱柱效是不可能恢複到新柱的水平的.如果柱子裝反了，可以調回來，但可能會造成柱內擔體塌陷.在不得已的情況下盡量不要反裝色譜柱。

　　

　　加(jia)強(qiang)色(se)譜(pu)柱(zhu)的(de)維(wei)護(hu)與(yu)保(bao)養(yang)對(dui)於(yu)色(se)譜(pu)柱(zhu)高(gao)壓(ya)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)中(zhong)應(ying)用(yong)有(you)著(zhe)重(zhong)要(yao)的(de)意(yi)義(yi)，製(zhi)定(ding)色(se)譜(pu)柱(zhu)管(guan)理(li)的(de)標(biao)準(zhun)操(cao)作(zuo)規(gui)程(cheng)並(bing)嚴(yan)格(ge)執(zhi)行(xing)。每(mei)一(yi)根(gen)新(xin)購(gou)進(jin)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)必(bi)須(xu)造(zao)冊(ce)登(deng)記(ji)，內(nei)容(rong)包(bao)括(kuo)：生產公司、品名、型號、規格、購進時間、啟用時間
、單價、柱內保護溶液等。色譜柱分類存放，矽膠柱、化學鍵合矽膠柱、氰基或氨基柱

、離子交換樹脂柱

、凝ning膠jiao柱zhu各ge用yong一yi個ge色se譜pu柱zhu盒he，盒he上shang貼tie上shang標biao簽qian
，注zhu明ming類lei別bie。隨sui柱zhu說shuo明ming書shu裝zhuang入ru密mi實shi袋dai附fu在zai登deng記ji本ben上shang。每mei啟qi用yong一yi根gen色se譜pu柱zhu
，在zai色se譜pu柱zhu上shang貼tie上shang標biao簽qian，注zhu明ming啟qi用yong日ri期qi。每mei根gen柱zhu子zi每mei兩liang個ge月yue保bao養yang一yi次ci
，特te別bie是shi對dui於yu一yi些xie使shi用yong頻pin率lv少shao的de柱zhu子zi
，因yin為wei放fang置zhi時shi間jian長chang，容rong易yi幹gan柱zhu，每mei一yi次ci做zuo好hao保bao養yang記ji錄lu。對dui於yu確que已yi失shi效xiao的de柱zhu子zi
，做zuo好hao停ting用yong記ji錄lu
，不bu能neng隨sui意yi丟diu棄qi，專zhuan門men存cun放fang，如ru果guo現xian用yong的de柱zhu子zi的de填tian料liao需xu要yao填tian補bu
，可ke以yi用yong存cun放fang的de柱zhu子zi的de填tian料liao。在zai從cong事shi生sheng產chan的de單dan位wei的de質zhi檢jian部bu門men，對dui於yu使shi用yong時shi間jian較jiao長chang柱zhu效xiao降jiang低di的de柱zhu子zi，可ke把ba它ta用yong於yu檢jian測ce產chan品pin的de中zhong間jian體ti。

　　

　　加jia強qiang色se譜pu柱zhu的de維wei護hu與yu保bao養yang對dui於yu高gao壓ya液ye相xiang色se譜pu的de發fa展zhan有you著zhe重zhong要yao的de意yi義yi，高gao壓ya液ye相xiang色se譜pu係xi統tong其qi中zhong就jiu包bao括kuo色se譜pu柱zhu，因yin此ci，加jia強qiang色se譜pu柱zhu的de維wei護hu與yu保bao養yang有you利li於yu高gao壓ya液ye相xiang色se譜pu的de發fa展zhan

，推tui動dong我wo國guo的de醫yi療liao事shi業ye的de發fa展zhan。