shiyongjunzhizhong,xizhiyongrengongfangfapeiyangshiyongjunchunjunsi,taxiangdangyunongzuowudezhongmiao,meiyoujunzhong,wufajinxingrengongzaipei,ruguojunzhongbuliang,yebunengqudeyouzhigaochan。yinci,quanmianzhangwozhizhongjishu,bahaozhizhongjishuguan,shizhenggeshiyongjunshengchandeshouyaohuanjie。
用孢子分離、組織分離、菌絲分離得到的純菌絲轉移到試管斜麵的菌種,稱為母種,也叫一級種。從試管母種擴大到廣口瓶、罐(guan)頭(tou)瓶(ping),稱(cheng)為(wei)原(yuan)種(zhong),也(ye)叫(jiao)二(er)級(ji)種(zhong)。原(yuan)種(zhong)擴(kuo)大(da)培(pei)養(yang)稱(cheng)為(wei)栽(zai)培(pei)種(zhong),也(ye)叫(jiao)三(san)級(ji)種(zhong)。平(ping)菇(gu)製(zhi)種(zhong)技(ji)術(shu),一(yi)般(ban)普(pu)遍(bian)采(cai)用(yong)的(de)固(gu)體(ti)菌(jun)種(zhong)製(zhi)種(zhong)模(mo)式(shi),分(fen)以(yi)上(shang)三(san)級(ji),各(ge)級(ji)菌(jun)種(zhong)的(de)製(zhi)備(bei),目(mu)的(de)是(shi)擴(kuo)大(da)菌(jun)絲(si)體(ti),最(zui)後(hou)用(yong)於(yu)栽(zai)培(pei)。
1.母種製備
(1)培養基配方
①土豆200克,葡萄糖(或白糖、紅糖)20克,磷酸二氫鉀3克,硫酸鎂1.5克,食母生或維生素B12~3次(壓碎加入),凍粉25克左右,水1000毫升。
②土豆200克,葡萄糖20克,麥粒水100毫升,磷酸二氫鉀2克,硫酸鎂1克,食母生或維生素B(2~3片),凍粉25克左右,水1000毫升。
(2)製備方法 土豆洗淨去皮,切成小片,加入麩皮及水,煮開後維持半小時,用單層紗布過濾,補充水至1000毫升,加入其他藥物及凍粉,煮至凍粉全部融化,用漏鬥分裝到試管,每支試管裝至長度的1/5,塞上棉塞,用牛皮紙包紮。?18毫米×18毫米規格的試管可裝110支左右。
(3)滅菌、接種、培養
①滅菌 1.1千克/平方厘米滅30分鍾,等培養基不燙手時(約45℃左右)擺成斜麵,斜麵長度為試管長度的1/2左右,不得超過3/5。
②接種。無菌操作接種每支母種可擴接30支左右。
③培養 25~27℃培養7~8天,菌絲長滿培養基斜麵,再培養1~2天,加大菌絲量,用於接原種。母種接種2天後,經常檢查菌絲生長及雜菌汙染情況。
2.原種製備
(1)培養基配方
①棉籽殼90克,麩皮10克,尿素0.2克,過磷酸鈣1克,石灰2克,水140克左右。
②棉籽殼70克,玉米芯20克,麩皮10克,尿素0.2克,過磷酸鈣1克,石灰2克,水150克左右。
③麥粒(或玉米粒)原種100克,碳酸鈣(工業用的)或石膏粉2克。
(2)製備方法 按配方將料稱好,麩皮、玉米芯同棉籽殼先拌勻,其他輔料(尿素、磷肥等)加入水中攪勻,再加入棉籽殼中,充分拌勻,裝瓶。0.5千克幹料裝罐頭瓶4個(ge),中(zhong)間(jian)打(da)一(yi)小(xiao)洞(dong)到(dao)瓶(ping)底(di),以(yi)利(li)通(tong)氣(qi),加(jia)速(su)菌(jun)絲(si)生(sheng)長(chang),用(yong)聚(ju)丙(bing)烯(xi)包(bao)紮(zha)瓶(ping)口(kou)和(he)粒(li)種(zhong)製(zhi)作(zuo)時(shi),要(yao)將(jiang)麥(mai)粒(li)洗(xi)淨(jing),浸(jin)泡(pao)一(yi)夜(ye),煮(zhu)開(kai)半(ban)小(xiao)時(shi),粒(li)中(zhong)間(jian)無(wu)白(bai)芯(xin)但(dan)不(bu)開(kai)花(hua),瀝(li)去(qu)多(duo)餘(yu)水(shui)分(fen),加(jia)入(ru)碳(tan)酸(suan)鈣(gai)或(huo)石(shi)膏(gao)粉(fen)拌(ban)勻(yun),裝(zhuang)瓶(ping)至(zhi)1/2,最多不超過2/3。
(3)滅菌、接種、培養
①滅菌 1.5千克/平方厘米高壓滅菌1.5~2小時或常壓滅菌7~8小時。
②接種 無菌操作接種,每支母種可接5~6瓶。
③培養 23~25℃左右培養25天左右,菌絲長滿瓶,再培養2~3天,加大菌絲量,用於接栽培種。
3.栽培種製備
(1)培養基配方
①棉籽殼95克,麩皮5克,尿素0,2克,過磷酸鈣1克,石灰2克,水140克。
②棉籽殼60克,玉米芯30克,麩皮10克,尿素0.3克,過磷酸鈣1克,石灰2克,水150克。
(2)製備方法 按配方稱料,將麩皮、玉米芯與棉籽殼先拌勻,其他輔料加入水中攪勻,再加入棉籽殼中,充分拌勻後裝入聚丙烯袋中,袋直徑15厘米,厚4×10-2~5×10-2毫米,長30~33厘米,每袋裝入幹料約0.4千克,用繩將袋口紮好,也可用罐頭瓶製栽培種。
(3)滅菌、接種、培養
①滅菌 1.5千克/平方厘米高壓滅菌2小時,或常壓滅菌8~10小時。
②接種 無菌操作接種,每瓶原種可接20袋左右栽培種。
③培養 22℃培養25~30天,菌絲長滿袋後,再培養2~3天,加大菌絲量,用於栽培。
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