試驗方法:以接種針挑取待試菌可疑菌落或純培養物,穿刺接種並塗布於斜麵,置36±1℃培養18~24h,觀察結果。
三糖鐵瓊脂(TSI)成分:
蛋白腖 20.0g
牛肉膏 3.0g
乳 糖 10.0g
蔗 糖 10.0g
葡萄糖 1.0g
硫酸亞鐵銨(含6個結晶水) 0.5g
酚 紅 0.025g或5g/L溶液5mL
氯化鈉 5.0g
硫代硫酸鈉 0.5g
瓊 脂 12.0g
蒸餾水 1000.0mL
除酚紅和瓊脂外,將其他成分加入400mL蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10min,加熱煮沸至完全溶解,調至pH7.4±0.1。另將瓊脂加入600mL蒸餾水中,攪拌均勻,靜置約10min, 加熱煮沸至完全溶解。
將上述兩溶液混合均勻後,再加入酚紅指示劑,混勻,分裝試管(12mm×100mm),每管約2~4mL,高壓滅菌121℃ 10 min或115℃15 min,滅菌後置成高層斜麵,呈桔紅色。
原理分析:本培養基適合於腸杆菌科的鑒定。用於觀察細菌對糖的利用和硫化氫(變黑)的產生。該培養基含有乳糖、蔗糖和葡萄糖的比例為10:10:1,隻(zhi)能(neng)利(li)用(yong)葡(pu)萄(tao)糖(tang)的(de)細(xi)菌(jun),葡(pu)萄(tao)糖(tang)被(bei)分(fen)解(jie)產(chan)酸(suan)可(ke)使(shi)斜(xie)麵(mian)先(xian)變(bian)黃(huang),但(dan)因(yin)量(liang)少(shao),生(sheng)成(cheng)的(de)少(shao)量(liang)酸(suan),因(yin)接(jie)觸(chu)空(kong)氣(qi)而(er)氧(yang)化(hua),加(jia)之(zhi)細(xi)菌(jun)利(li)用(yong)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)含(han)氮(dan)物(wu)質(zhi),生(sheng)成(cheng)堿(jian)性(xing)產(chan)物(wu),故(gu)使(shi)斜(xie)麵(mian)後(hou)來(lai)又(you)變(bian)紅(hong),底(di)部(bu)由(you)於(yu)是(shi)在(zai)厭(yan)氧(yang)狀(zhuang)態(tai)下(xia),酸(suan)類(lei)不(bu)被(bei)氧(yang)化(hua),所(suo)以(yi)仍(reng)保(bao)持(chi)黃(huang)色(se)。
而發酵乳糖的細菌(e.coli),則產生大量的酸,使整個培養基呈現黃色。
如ru培pei養yang基ji接jie種zhong後hou產chan生sheng黑hei色se沉chen澱dian,是shi因yin為wei某mou些xie細xi菌jun能neng分fen解jie含han硫liu氨an基ji酸suan,生sheng成cheng硫liu化hua氫qing,硫liu化hua氫qing和he培pei養yang基ji中zhong的de鐵tie鹽yan反fan應ying,生sheng成cheng黑hei色se的de硫liu化hua亞ya鐵tie沉chen澱dian。
提問:誌賀氏菌都能分解葡萄糖,產酸不產氣,大多不發酵乳糖,不產生H2S。應該產生什麼現象?
大腸杆菌,能分解葡萄糖產酸產氣,大多數能分解乳糖,不產生H2S。應該是什麼現象?
沙門氏菌,能分解葡萄糖,不發酵乳糖,大多數產生H2S,多數產氣。
下麵照片所示2-3-4,可能是大腸杆菌、沙門氏菌還是誌賀氏菌?

答案:2-誌賀氏菌 3-沙門氏菌 4-大腸杆菌
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