第一章 植物製片的方法及準備
植物製片技術是植物顯微技術課的一個重要組成部分,在有關植物形態建成、植物雜交育種、作物病蟲害防治、藥yao用yong植zhi物wu的de培pei育yu和he鑒jian別bie以yi及ji林lin木mu材cai性xing鑒jian定ding等deng多duo方fang麵mian的de研yan究jiu和he教jiao學xue工gong作zuo中zhong,都dou需xu要yao應ying用yong顯xian微wei製zhi片pian技ji術shu,由you於yu各ge種zhong作zuo物wu器qi官guan的de性xing質zhi差cha異yi以yi及ji研yan究jiu目mu的de的de不bu同tong,就jiu需xu要yao不bu同tong的de製zhi片pian方fang法fa,但dan因yin限xian於yu學xue時shi及ji篇pian幅fu,本ben書shu僅jin根gen據ju常chang用yong的de基ji本ben原yuan理li及ji教jiao學xue中zhong行xing之zhi有you效xiao的de方fang法fa加jia以yi介jie紹shao。
第一節植物製片的基本要求與主要製片方法
植物內部結構不能用大而厚的組織塊置於顯微鏡下觀察,必須進行製作切片,才能供顯微鏡下觀察應用。
石蠟(或徒手)切片,是將植物切成薄的材料,按下列主要步驟與要求製成永存切片。
1.采樣:材料的選擇與分割
2.殺生、固定與器皿清洗
3.衝洗(有的不經此步)
4.脫水(各級酒精)
5.透明
6.滲透(例如浸蠟)
7.包埋(石蠟包埋)
8.切片(切片機或徒手切片)
9.粘片
10.烘片
11.脫包埋劑(石蠟)
12.經各級酒精(脫水)
13.染色
14.分色
15.脫水
16.透明
17.封藏成永存片
從上述主要環節來看,首先將材料加以處理(1、2、3項),第二步進行製片基礎的處理工作(4、5、6、7項),在保證質量完成這兩類工作基礎上,方可順利完成切片工作(包括8、9、10項),也就是說切出符合規格的薄片來,然後再對組織進行染色、脫水、透明等一係列工作,才可製成透明清晰、染色鮮豔、適合顯微鏡觀察攝影,並作教學、科研長期保存的永存片。其詳細製片過程與方法,在以後章節內加以介紹。
通常製片分兩大類型。
第二節 溶液的配製
(一)各級酒精濃度的配製 在植物製片中常用各級酒精,一般以95%酒精來配製,為節約起見,避免用無水酒精來配製各級酒精(表1一2)。
在實驗中使用酒精量較大,每次以量筒量液花費時間多,可在500ml細口瓶有玻璃塞的瓶上貼一條寬1cm與(yu)瓶(ping)等(deng)長(chang)的(de)白(bai)色(se)紙(zhi)條(tiao),僅(jin)在(zai)第(di)一(yi)次(ci)用(yong)量(liang)筒(tong)量(liang)酒(jiu)精(jing)與(yu)蒸(zheng)館(guan)水(shui)的(de)用(yong)量(liang)處(chu)劃(hua)上(shang)刻(ke)度(du),以(yi)後(hou)每(mei)當(dang)瓶(ping)內(nei)溶(rong)液(ye)用(yong)完(wan),即(ji)以(yi)紙(zhi)條(tiao)上(shang)刻(ke)度(du)分(fen)別(bie)倒(dao)入(ru)酒(jiu)精(jing)和(he)蒸(zheng)館(guan)水(shui)的(de)各(ge)用(yong)量(liang)即(ji)可(ke)。
(二)低濃度溶液配製 製片中染色液絕大多數為此類溶液。如1%番紅水溶液,即為番紅1g溶於l00mL的蒸餾水中;又如0.5%曙紅(伊紅)酒精溶液為0.5g曙紅溶於l00mL的95%酒精中。
其他如重量百分比濃度、摩爾濃度、克當量濃度等溶液的配製,在附錄5中介紹。
第二章 石蠟法製片原理與方法
第一節 材料的選擇與分割
材料的選擇和切割是根據研究目的而決定的,應注意以下諸條件。
1.應選取新鮮、無病蟲害並具代表性的材料。
2.先作徒手切片或剝離檢查,決定適宜的材料立即固定處理。
3.注意按季節及植物生長發育的不同階段而選取材料。
4.材料大小要適當,如根的直徑在5mm以內的,可切取5-10mm長的小段,直徑在5mm以上者可縱分割成1/2或1/4,橫切厚度約3-5mm;若以滑走切片機切片,長度約在2-3.5cm。
葉的切取切成2-5mm,若葉較寬可切10mm的長條,葉麵切取的部位,以研究者的目的靈活選取。切取材料必須使用新刀片,刀口和葉麵垂直迅速切割下來。
花、果的切割:huayaohexiongruiqiege,huayaheyousuideqiege,xuboquwaibulinpianjiyeqiaoheqitabufen,qiequduoyubufenzairugudingye,youdehuaxuzexuqudiaowaifangbaopian,yibanxiaodehuabujingqiegeketourugudingye,dahuaguocaijinxingfengechuli。
手機版




