購買前
【方法一】向廠家索要或從其網站下載說明書,查找ELISA的性能指標:準確度(加標回收率、稀釋線性)、精密度(板內差、板間差)、靈敏度、樣本值、特異性、校準。一般來說,除了校準不一定每份說明書都有外,其餘的指標一般都需要羅列(部分樣本需要高倍稀釋的,可能沒有準確度這個指標)。如果無法提供這些性能指標,則說明該試劑盒可能是假貨,或者試劑盒開發過程不夠科學嚴謹,有可能無法檢測出真實的樣本值。
【方法二】對於誇大ELISA涵蓋的指標的範圍,尤其是不常見的種屬,可先去國際ELISA試劑盒供應商(如eBioscience、R&D)網站上搜索,如果搜索不到該種屬的ELISA試劑盒,則有可能是假貨,需要小心謹慎。
【方法三】將“廠家名”、“ELISA”和“假貨”等關鍵詞在網上搜索,有的網站等會有打假曝光台。
購買後
【方法一】檢查說明書、包裝盒的質量,通常偽劣產品為了降低成本,印刷的質量會比較差。其次仔細閱讀說明書,如上所示查找ELISA的性能指標。
【方法二】
Ⅰ.利用幹擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:
(1)將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody:antigen=1:2的混合孵育液
(2)37℃孵育15分鍾後,代替原試劑盒中的檢測抗體
(3)後續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶複合物和底物
(4)實shi驗yan完wan畢bi後hou,檢jian測ce其qi標biao準zhun曲qu線xian,如ru果guo標biao準zhun曲qu線xian良liang好hao則ze說shuo明ming加jia入ru的de目mu的de抗kang原yuan和he試shi劑ji盒he抗kang體ti不bu匹pi配pei,試shi劑ji盒he檢jian測ce抗kang體ti針zhen對dui的de是shi非fei目mu的de抗kang原yuan,該gai試shi劑ji盒he為wei偽wei劣lie假jia造zaoELISA試劑盒。
(5)如(ru)果(guo)標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)無(wu)線(xian)性(xing),則(ze)說(shuo)明(ming)試(shi)劑(ji)盒(he)檢(jian)測(ce)抗(kang)體(ti)已(yi)被(bei)目(mu)的(de)抗(kang)原(yuan)中(zhong)和(he)或(huo)幹(gan)擾(rao),影(ying)響(xiang)了(le)其(qi)實(shi)際(ji)試(shi)劑(ji)盒(he)抗(kang)體(ti)的(de)檢(jian)測(ce)作(zuo)用(yong),則(ze)該(gai)試(shi)劑(ji)盒(he)檢(jian)測(ce)抗(kang)體(ti)針(zhen)對(dui)的(de)是(shi)目(mu)的(de)抗(kang)原(yuan)。
Ⅱ.如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
(1)取出購買的試劑盒A的包被板兩條。
(2)一條包被板加試劑盒A的標準品做標準曲線。
(3)另一條包被板加試劑盒B的標準品做標準曲線。
(4)後續操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶複合物和底物。
(5)實驗完畢後,檢測兩條標準曲線,如果兩條標準曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(6)如果兩條標準曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標,試劑盒A隻能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
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