一、Western blot 技術起源

1975年，Edwin Southern發明了DNA雜交檢測技術

，命名為Southern blot。1977年，James Alwine、David Kemp和George Stark發明了RNA雜交檢測技術，命名為Northern blot。兩年後位於美國斯坦福大學的George Stark發明了將蛋白從電泳凝膠上轉移到活化纖維素上的技術
，隨後Harry Towbin發展出更快速
、簡單的電轉技術。1981年Neal Burnette正式將這一技術命名為“Western blot”。

二
、Western blot 用來幹什麼
？

（一）確定目的蛋白的表達情況

這是Western blot最常規的應用
，如檢測患者的標本與正常人的標本、實驗條件處理後細胞與未處理的對照細胞之間目的蛋白的表達變化情況

，通過灰度分析可以確定目的蛋白表達水平是升高還是降低。

（二）研究蛋白間的相互作用

這是與免疫共沉澱（co-immunoprecipitation，CO-IP）技術相結合的一種檢測蛋白質之間相互作用的常用方法。通過CO-IP技(ji)術(shu)將(jiang)相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)複(fu)合(he)體(ti)分(fen)離(li)出(chu)來(lai)後(hou)進(jin)行(xing)凝(ning)膠(jiao)電(dian)泳(yong)

，然(ran)後(hou)利(li)用(yong)相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)的(de)特(te)異(yi)性(xing)抗(kang)體(ti)進(jin)行(xing)檢(jian)測(ce)。適(shi)用(yong)於(yu)對(dui)已(yi)知(zhi)的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi)的(de)相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)進(jin)行(xing)檢(jian)測(ce)
，不(bu)適(shi)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)一(yi)個(ge)蛋(dan)白(bai)質(zhi)未(wei)知(zhi)的(de)相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)蛋(dan)白(bai)
；也可以用於蛋白質-DNA、蛋白質-RNA相互作用的後續分析。

（三）確定目的蛋白的細胞定位

通過分別提取細胞不同部位的蛋白質，如膜蛋白
、胞漿蛋白核蛋白或線粒體蛋白等
，將分離出來的不同部位的蛋白質進行Western blot檢測可以分別檢測目的蛋白在不同部位的表達情況。

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