光是電磁波,波長100nm~400nm稱為紫外光,400nm~780nm之間的光可被人眼觀察到,大子780nm稱cheng為wei紅hong外wai光guang。人ren們men隻zhi所suo以yi能neng夠gou看kan到dao色se彩cai,是shi因yin為wei光guang照zhao射she到dao物wu體ti上shang被bei物wu體ti反fan射she回hui來lai。綠lv色se植zhi物wu之zhi所suo以yi是shi綠lv色se,是shi因yin為wei植zhi物wu吸xi收shou了le光guang中zhong的de紅hong色se光guang譜pu。酶mei標biao儀yi測ce定ding的de原yuan理li是shi在zai特te定ding波bo長chang下xia,檢jian測ce被bei測ce物wu的de吸xi光guang值zhi。
檢測單位:
光通過被檢測物,前後的能量差異即是被檢測物吸收掉的能量,特定波長下,同一種被檢測物的濃度與被吸收的能量成定量關係。
檢測單位用OD值表示,OD是optical delnsity(光密度)的縮寫,表示被檢測物吸收掉的光密度, OD=1og(1/trans),其中trans為檢測物的透光值。根據Bouger-amberT-beer法則,OD值與光強度成下述關係:
E=OD=logΙ0/Ι其中E表示被吸收的光密度,Ι0為在檢測物之前的光強度,Ι為從被檢測物出來的光強度。
OD值由下述公式計算:
E=OD=C×D×E
C為檢測物的濃度
D為檢測物的厚度
E為摩爾因子
在zai特te定ding波bo長chang下xia測ce定ding每mei一yi種zhong物wu質zhi都dou有you其qi特te定ding的de波bo長chang,在zai此ci波bo長chang下xia,此ci物wu質zhi能neng夠gou吸xi收shou最zui多duo的de光guang能neng量liang。如ru果guo選xuan擇ze其qi它ta的de波bo長chang段duan,就jiu會hui造zao成cheng檢jian測ce結jie果guo的de不bu準zhun確que。因yin此ci,在zai測ce定ding檢jian測ce物wu時shi,我wo們men選xuan擇ze特te定ding的de波bo長chang進jin行xing檢jian測ce,稱cheng為wei測ce量liang波bo長chang。
danshimeiyizhongwuzhiduiguangnenglianghaicunzaiyidingdefeiteyixingxishou,weilexiaochuzhezhongfeiteyixingxishou,womenzaixuanquyigecanzhaobochang,yixiaochuzhegebuzhunquexing。zaicanzhaobochangxia,jiancewuguangdexishouzuixiao。jiancebochanghecanzhaobochangdexiguangzhizhichakeyixiaochufeiteyixingxishou。
Anthos 酶標儀檢測值計算
儀器中的檢測器接收透過被檢測物的光能量,轉換成二進位數字信號,最大為4095。儀器定義沒有光源下的透光值為0%,沒有檢測物的透光值為100%。則實際檢測中,檢測物的透光值均在0%~100%之間。透光值的計算如下:
T=(Meas-Min)/(Max-Min)
其中T為透光值,Meas為檢測的二進位數值,Min為在0%的情況下檢測的二進位數值,Max為在100%的情況下檢測的二進位數值,舉例如下:
Max=3600 Mn=20 Meas=30
T=(30-20)/3600-20)=0.0028
OD=1og(1/T)=1og(1/0.0028)=2.552
Anthos酶標儀的中心定位
儀(yi)器(qi)會(hui)自(zi)動(dong)對(dui)酶(mei)標(biao)孔(kong)進(jin)行(xing)中(zhong)心(xin)定(ding)位(wei),中(zhong)心(xin)定(ding)位(wei)是(shi)要(yao)消(xiao)除(chu)酶(mei)標(biao)孔(kong)底(di)的(de)凸(tu)凹(ao)引(yin)起(qi)的(de)厚(hou)薄(bo)不(bu)均(jun)帶(dai)來(lai)檢(jian)測(ce)的(de)不(bu)準(zhun)確(que)。在(zai)對(dui)每(mei)一(yi)個(ge)酶(mei)標(biao)儀(yi)進(jin)行(xing)檢(jian)測(ce)時(shi),儀(yi)器(qi)其(qi)實(shi)要(yao)進(jin)行(xing)35個點的測量,選取最中間的5個點的均值為本孔的OD值。
光源的參照通道
參照通道是用來校準由於電壓不穩或燈泡磨損帶來的影響。
酶標儀的用途和其它提示
用於ELISA試劑的測定,廣泛用於各種實驗室,包括臨床實驗室。
質量控製
質量控製是試劑檢測的重要因素。請按照試劑說明書的要求進行質量控製。
空白校正
有一些試劑盒的說陰書將空白孔設置為空氣,其它大多數空白孔的設置是用試劑來設置的,請按照試劑盒的說明書要求進行。
檢測結果的解釋
由於有相當多的因素會影響檢測的結果,如不同的酶標板,檢測試劑的體積,都會造成OD值的不同,因此,隻有使用同一酶標板反應的試劑檢測結果才能比較和分析。對結果的臨床解釋請依照試劑盒的說明書進行。
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