流式細胞儀是進行流式細胞分析的儀器,集電子、計算機、激光、流體理論於一體,被譽為試驗室的“CT”。
流式細胞術(Flow CytoMeter,FCM)shiyizhongzaigongnengshuipingshangduidanxibaohuoqitashengwulizijinxingdingliangfenxihefenxuandejianceshouduan,takegaosufenxishangwangexibao,bingnengtongshicongyigexibaozhongcededuogecanshu,yuchuantongyingguangjingjianzhaxiangbi,juyousudukuai、精度高、準確性好等優點, 成為當代最先進的細胞定量分析技術。
工作原理
將jiang待dai測ce細xi胞bao染ran色se後hou製zhi成cheng單dan細xi胞bao懸xuan液ye。用yong一yi定ding壓ya力li將jiang待dai測ce樣yang品pin壓ya入ru流liu動dong室shi,不bu含han細xi胞bao的de磷lin酸suan緩huan衝chong液ye在zai高gao壓ya下xia從cong鞘qiao液ye管guan噴pen出chu,鞘qiao液ye管guan入ru口kou方fang向xiang與yu待dai測ce樣yang品pin流liu成cheng一yi定ding角jiao度du,這zhe樣yang,鞘qiao液ye就jiu能neng夠gou包bao繞rao著zhe樣yang品pin高gao速su流liu動dong,組zu成cheng一yi個ge圓yuan形xing的de流liu束shu,待dai測ce細xi胞bao在zai鞘qiao液ye的de包bao被bei下xia單dan行xing排pai列lie,依yi次ci通tong過guo檢jian測ce區qu域yu。
流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)儀(yi)通(tong)常(chang)以(yi)激(ji)光(guang)作(zuo)為(wei)發(fa)光(guang)源(yuan)。經(jing)過(guo)聚(ju)焦(jiao)整(zheng)形(xing)後(hou)的(de)光(guang)束(shu),垂(chui)直(zhi)照(zhao)射(she)在(zai)樣(yang)品(pin)流(liu)上(shang),被(bei)熒(ying)光(guang)染(ran)色(se)的(de)細(xi)胞(bao)在(zai)激(ji)光(guang)束(shu)的(de)照(zhao)射(she)下(xia),產(chan)生(sheng)散(san)射(she)光(guang)和(he)激(ji)發(fa)熒(ying)光(guang)。這(zhe)兩(liang)種(zhong)信(xin)號(hao)同(tong)時(shi)被(bei)前(qian)向(xiang)光(guang)電(dian)二(er)極(ji)管(guan)和(he)90°方向的光電倍增管接收。光散射信號在前向小角度進行檢測,這種信號基本上反映了細胞體積的大小;熒光信號的接受方向與激光束垂直,經過一係列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,形成多個不同波長的熒光信號。
這些熒光信號的強度代表了所測細胞膜表麵抗原的強度或其核內物質的濃度,經光電倍增管接收後可轉換為電信號,再通過A/D轉zhuan換huan器qi,將jiang連lian續xu的de電dian信xin號hao轉zhuan換huan為wei可ke被bei計ji算suan機ji識shi別bie的de數shu字zi信xin號hao。計ji算suan機ji把ba所suo測ce量liang到dao的de各ge種zhong信xin號hao進jin行xing計ji算suan機ji處chu理li,將jiang分fen析xi結jie果guo顯xian示shi在zai計ji算suan機ji屏ping幕mu上shang,液ye可ke以yi打da印yin出chu來lai,還hai可ke以yi數shu據ju文wen件jian的de形xing式shi存cun儲chu在zai硬ying盤pan上shang以yi備bei日ri後hou的de查zha詢xun或huo進jin一yi步bu分fen析xi。
檢測數據的顯示視測量參數的不同由多種形式可供選擇。單參數數據以直方圖的形式表達,其X軸為測量強度,Y軸為細胞數目。一般來說,流式細胞儀坐標軸的分辨率有512或1024通道數,這視其模數轉換器的分辨率而定。對於雙參數或多參數數據,既可以單獨顯示每個參數的直方圖,也可以選擇二維的三點圖、等高線圖、灰度圖或三維立體視圖。
xibaodefenxuanshitongguofenlihanyoudanxibaodeyediershixiande。zailiudongshidepenkoushangpeiyouyigechaogaopindianjingti,chongdianhouzhendong,shipenchudeyeliuduanlieweijunyundeyedi,daicedingxibaojiufensanzaizhexieyedizhizhong。jiangzhexieyedichongyizhengfubutongdedianhe,dangyediliujingdaiyoujiqianfutedepianzhuanbanshi,zaigaoyadianchangdezuoyongxiapianzhuan,luorugezideshoujirongqizhong,buyuchongdiandeyediluoruzhongjiandefeiyerongqi,congershixianxibaodefenli。
應用範圍
用於白血病的分型、腫瘤細胞染色體的異倍性測定,以及免疫學研究,並已開始用於細菌鑒定,病毒感染細胞的識別和愛滋病感染者T4、T8細胞的記數。
隨著流式細胞技術水平的不斷提高,其應用範圍也日益廣泛。流式細胞術已普遍應用於免疫學、血液學、腫瘤學、細胞生物學、細胞遺傳學、生物化學等臨床醫學和基礎醫學研究領域。
技術特點
流式細胞儀作為一種先進的細胞定量分析檢測儀器,設計上采用了許多獨特的技術,其中涉及到液流係統、光路係統、信號測量和細胞分選等4個方麵。
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