要培養微生物,首先就需要接種,而接種必須在無菌條件下進行。這就需要建造無菌室或接種箱,為接種創造必要的條件。
無菌室可以建在實驗室內,作為實驗室的一個小套間。麵積為4~5平方米,高2.5米左右。無菌室外應連接一個小緩衝間,麵積為2平方米左右。緩衝間和無菌室的門不要建在同一條直線上,以減少空氣中雜菌進入無菌室。
無菌室和緩衝間應作到清潔、密閉性好,室內最好有換氣設備,以便在工作結束後更換室內空氣。兩個房間中應各安裝l盞30瓦紫外線燈管和照明用的日光燈,無菌室的紫外線燈應懸吊在工作台的正上方,距台麵1米,以發揮最大的消毒功能。無菌室內的工作台等用具用品,應經常保持清潔,避免雜菌汙染。
如果û有條件建造無菌室,可以用接種箱代替。接種箱結構簡單,容易製作,其正麵安裝玻璃,便於觀察。箱前方開兩個圓洞各接連1隻套袖,操作時將兩臂從套袖伸入箱內進行操作。箱內也應懸吊一盞紫外線殺菌燈和一盞日光燈。
二、移液器
用來移取一定量的液體進行接種,主要由按鈕、活塞、彈簧和可以裝卸的吸頭組成。規格有10uL、20uL、100uL、1000uL、5mL、10mL等,可用定量吸取液體,吸頭為一次性用品,使用方便。
移(yi)液(ye)器(qi)有(you)固(gu)定(ding)量(liang)程(cheng)移(yi)液(ye)器(qi)和(he)可(ke)調(tiao)量(liang)程(cheng)移(yi)液(ye)器(qi)。固(gu)定(ding)量(liang)程(cheng)移(yi)液(ye)器(qi)可(ke)移(yi)取(qu)的(de)體(ti)積(ji)是(shi)固(gu)定(ding)的(de),通(tong)常(chang)功(gong)能(neng)簡(jian)單(dan),價(jia)格(ge)比(bi)較(jiao)便(bian)宜(yi)。可(ke)調(tiao)量(liang)程(cheng)移(yi)液(ye)器(qi)可(ke)在(zai)容(rong)量(liang)範(fan)Χ內nei移yi取qu任ren意yi體ti積ji的de液ye體ti,通tong常chang較jiao複fu雜za,價jia格ge比bi較jiao高gao。實shi驗yan人ren員yuan可ke以yi根gen據ju日ri常chang工gong作zuo的de需xu要yao選xuan用yong集ji中zhong不bu同tong規gui格ge的de合he適shi的de移yi液ye器qi。另ling外wai,還hai有you可ke高gao壓ya滅mie菌jun的de移yi液ye器qi和he多duo通tong道dao移yi液ye器qi等deng特te殊shu用yong途tu的de移yi液ye器qi可ke供gong選xuan擇ze。
移液器需要定期送至儀器檢測部門進行校準,並在移液器顯著λ置貼上校準合格標簽及校準有效期限。除了送檢校準外,平時實驗室也應定期對移液器進行自校。自校方法如下:取適量無菌無雜質的優質蒸餾水至於4℃恒溫冰箱內24h。打開精密電子天平(精度為0.01g以上),放置一無菌無雜質的小燒杯,重新歸零。待精密電子天平的0值穩定後,將移液器調至一數值(如:1mL、5mL等)吸取4℃的蒸餾水加入小燒杯內(純水在4℃時密度最大,此時1mL純水質量為1g)。觀察電子天平顯示的質量數值是否與加入的純水體積一致(如:吸1mL純水質量是否顯示1.00g,依次類推)。
三、接種針
用來穿刺接種或挑去單個菌落進行平板劃線,最早用白金絲製作,先多用鎳鉻合金絲製成,接種針是一段長8cm,筆直的細絲,固定在長約20cm的金屬柄上。
四、接種環
用來進行液體和劃線接種,接種針的一段緊緊纏繞在直徑約2mm的圓棒(如:槍頭尖、牙簽等)上,是頂部成為一個圓環,從 根部剪斷稍短的一段鎳鉻絲、使圓環環閉無交叉,調整圓環,使圓環的圓心和根部鎳鉻絲在同一直線上,在圓環根部大約5mm處折成160°~170°的夾角,製好的鎳鉻絲環插至接種棒上。
五、接種圈
用來移植砂土管中的菌種,在接種針的頂端卷起幾圈呈盤狀的環。
六、接種鉤
用來接種ù菌和放線菌或蘸取微小菌落的培養物,將接種針的頂端彎成一遍長約3mm的直角。
七、塗布器
用來進行菌落計數或菌種分離。在火焰上將長20cm、直徑3mm~4mm的玻璃棒的一段彎成3cm的等邊三角形,再使三角形平麵與柄成140°角,便於操作。
八、移液管
用來稀釋菌懸液及液體接種。上端過濾棉花,有0.1mL、0.2mL、0.5mL、1mL、5mL、10mL等規格。
九、滴管
用來進行液體接種的。一般為一次性的塑料滴管。
十、其它
不便使用酒精燈的地方可以使用一次性塑料接種針(環)。一次性接種針(環)采用高分子材料聚丙烯(PP)製成,柔軟而富有彈性,表麵經過特殊處理後具有親水性。接種環的規格按直徑一般分1.0uL和10.0uL。
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