在一般分光光度計的使用說明書上,要求儀器預熱時間約20分鍾;若是帶微處理器的分光光度計,開機後儀器自動進入自檢 (初始化)狀態,約需1O分鍾左右。在分光光度計預熱這個環節上,很多使用者或多或少存在問題,如開機隻預熱電路係統 (不調節波長、打開吸收池暗箱蓋預熱等)或認為初始化過程就是預熱等等。
對帶微處理器有自檢功能的分光光度計,開機後儀器自檢 (初始化)結束後,在測定窗口上,設置所需波長值, 用一個吸收池裝上純淨水置於光路上,調 “0000A”後,預熱儀器,當儀器顯示讀數不再變化後即可進行測定。
對於紫外可見分光光度計,由於有雙光源 (鎢燈與氘燈), 為了延長燈的使用壽命,開機自檢完成後可以關掉測定時不用的光源燈。
日ri常chang在zai使shi用yong分fen光guang光guang度du計ji時shi,是shi否fou要yao經jing常chang進jin行xing儀yi器qi波bo長chang準zhun確que度du的de檢jian查zha?答da案an是shi否fou定ding的de。當dang在zai日ri常chang測ce定ding中zhong發fa現xian儀yi器qi測ce定ding靈ling敏min度du下xia降jiang,這zhe時shi才cai應ying進jin行xing波bo長chang準zhun確que度du的de檢jian查zha,最zui簡jian易yi的de檢jian查zha方fang法fa (粗檢 )是:儀器開機後,調節波長為 580nm,在吸收池座的通光道中插入一張白色卡片紙,若能觀察到一長方形的黃色光斑,說明波長準確度屬正常範圍,否則就應進行波 長校正。
當儀器經過長途搬運、受過機械振動或更換光源燈泡後, 必須進行波長準確度的檢查與校正。粗檢同上,其校正方法有:幹涉濾光片或鐠釹濾光片校正法、利用氘燈的特征發射線校正法。具體步驟可參考儀器使用說明書。
按照吸收池使用的基本順序分說如下:
(1)吸收池的潤洗
吸收池裝液前必須用待裝溶液潤洗2~3遍,潤洗前是否要用純水先潤洗一遍呢?這可看具體情況區別對待。
如果初次用幹的吸收池裝待測液 (特別是有色溶液)時, 從維護保養吸收池的角度講,為減小其幹玻麵對顏色的吸附能力,便於用後吸收池的清洗,建議先用純水潤洗一遍,再用待裝溶液潤洗 2~3遍;若後再用此吸收池裝濃度相近或更高濃度的溶液 (如從小到大測定標準係列溶液的吸光度)時, 可直接用待裝溶液潤洗2~3遍即可。
標準曲線法定量時,如果是先測定標準係列溶液的吸光度,當測到樣品溶液時,由於測定的樣品溶液濃度比最後一 個標準溶液的濃度低或不可知時,建議先用純水潤洗一遍, 再用待裝溶液潤洗 2~3遍。
(2)吸收池的裝液、擦拭與放置 吸收池潤洗完成後注入待測溶液至池高的 2/3~3/4處。
(3)吸收池成套性檢驗及處理 新吸收池或吸收池使用一段時間後都必須進行成套性檢驗。
分光光度計在測定過程中,發現同一個溶液在不同時問裏其測定結果不同,即重複性不好,其原因是什麼?排除測定錯誤因素外,可 能原因有:
(1)儀器預熱時間不夠或預熱方法不對所造成,應延長預熱時間或采用正確的預熱方法。
(2)光電轉換器 (如光電管)因長時間使用其光電轉換 效率發生了變化導致。這時標準溶液與待測溶液的吸光度都 同樣變低,在相對定量時對結果影響很小。但是對這類儀器,一般建議連續使用時間不應超過3h,若需長時間使用,最好間歇30min 。
(1)發現測定過程中的一些不良操作不利於儀器的維護、保養,使用者應盡可能避免。如在儀器的上方進行操作(如倒溶液);拿出來的吸收池 (或吸收池架)放在儀器的麵 板上;同實驗室不同儀器的吸收池混用等。
(2)關於防塵、防潮問題
儀yi器qi一yi般ban都dou隨sui機ji附fu有you一yi隻zhi塑su料liao布bu罩zhao,不bu使shi用yong時shi用yong其qi罩zhao住zhu整zheng個ge儀yi器qi,這zhe是shi很hen好hao的de防fang塵chen手shou段duan。但dan發fa現xian很hen多duo實shi驗yan室shi裏li不bu用yong附fu來lai塑su料liao布bu罩zhao,而er是shi自zi己ji用yong一yi塊kuai普pu通tong布bu或huo做zuo成cheng布bu罩zhao來lai覆fu蓋gai儀yi 器(qi),防(fang)塵(chen)效(xiao)果(guo)不(bu)如(ru)塑(su)料(liao)布(bu)罩(zhao)理(li)想(xiang)。另(ling)外(wai),在(zai)塑(su)料(liao)布(bu)罩(zhao)隻(zhi)放(fang)入(ru)數(shu)袋(dai)防(fang)潮(chao)矽(gui)膠(jiao),也(ye)能(neng)更(geng)好(hao)起(qi)到(dao)延(yan)長(chang)防(fang)潮(chao)的(de)功(gong)效(xiao)。在(zai)防(fang)潮(chao)時(shi),如(ru)果(guo)儀(yi)器(qi)設(she)有(you)防(fang)潮(chao)幹(gan)燥(zao)筒(tong)的(de),應(ying)經(jing)常(chang)檢(jian)查(zha),發(fa)現(xian)變(bian)色(se)立(li)即(ji)更(geng) 換新的或加以烘幹再用。
長期停用的分光光度計,要定期開機除潮,如每隔一個月通電預熱半小時,以保持整機呈幹燥狀態,並且維持電子元件的性能。
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