細胞培養是細胞和分子生物學中使用的最重要的工具之一,它為研究正常的生理學和生物化學提供了出色的模型係統(例如,代謝研究,衰老),藥物和有毒化合物對細胞的影響以及細胞的影響誘變和癌變。 它也用於藥物篩查和發育,以及生物化合物(例如疫苗,治療蛋白)的大規模生產。 將細胞培養用於這些應用中的任何一種的主要優點是可以通過使用一批克隆細胞獲得的結果的一致性和可重複性。
細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)是(shi)指(zhi)從(cong)動(dong)物(wu)或(huo)植(zhi)物(wu)中(zhong)去(qu)除(chu)細(xi)胞(bao),然(ran)後(hou)在(zai)有(you)利(li)的(de)人(ren)工(gong)環(huan)境(jing)中(zhong)生(sheng)長(chang)。細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)在(zai)培(pei)養(yang)前(qian)直(zhi)接(jie)從(cong)組(zu)織(zhi)中(zhong)取(qu)出(chu)並(bing)通(tong)過(guo)酶(mei)或(huo)機(ji)械(xie)手(shou)段(duan)分(fen)解(jie),或(huo)者(zhe)它(ta)們(men)可(ke)以(yi)來(lai)源(yuan)於(yu)已(yi)經(jing)建(jian)立(li)的(de)細(xi)胞(bao)係(xi)或(huo)細(xi)胞(bao)株(zhu)
1.初級培養
原代培養是指細胞從組織中分離並在適當條件下增殖,直到它們占據所有可用基質(即達到彙合)後的培養階段。在這個階段,必須通過將細胞轉移到具有新鮮生長培養基的新容器中來對細胞進行傳代培養(即傳代),以提供更多的繼續生長的空間。
2.細胞係
在第一次繼代培養後,原代培養物被稱為細胞係或亞克隆。來源於原代培養物的細胞係具有有限的壽命(即,它們是有限的),當它們傳代時,具有最高生長能力的細胞占優勢,從而在群體中產生一定程度的基因型和表型一致性。
3.細胞株
ruguotongguokelonghuoqitafangfacongpeiyangwuzhongjijixuanzexibaoxideyaqun,zegaixibaoxichengweixibaozhu。xibaozhutongchangzaiqinbenxikaishihouhuodeewaideyichuanbianhua。
4.有限細胞係與連續細胞係
正常細胞在失去增殖能力之前通常隻分裂有限的次數,這是一種遺傳決定的事件,稱為衰老;zhexiexibaoxibeichengweiyouxiande。raner,yixiexibaoxitongguoyizhongchengweizhuanhuadeguochengbiandebuxiu,zhezhongguochengkeyizifafasheng,yekeyitongguohuaxuehuobingduyoudao。dangyigeyouxiandexibaoxijinglizhuanhuanbinghuodewuxianfenliedenenglishi,tajiubianchengleyigelianxudexibaoxi。
連(lian)續(xu)培(pei)養(yang)的(de)細(xi)胞(bao)係(xi)容(rong)易(yi)發(fa)生(sheng)遺(yi)傳(chuan)漂(piao)變(bian),有(you)限(xian)的(de)細(xi)胞(bao)係(xi)注(zhu)定(ding)會(hui)衰(shuai)老(lao),所(suo)有(you)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)物(wu)都(dou)容(rong)易(yi)受(shou)到(dao)微(wei)生(sheng)物(wu)汙(wu)染(ran),即(ji)使(shi)是(shi)運(yun)行(xing)實(shi)驗(yan)室(shi)也(ye)可(ke)能(neng)出(chu)現(xian)設(she)備(bei)故(gu)障(zhang)。由(you)於(yu)已(yi)建(jian)立(li)的(de)細(xi)胞(bao)係(xi)是(shi)一(yi)種(zhong)寶(bao)貴(gui)的(de)資(zi)源(yuan),其(qi)替(ti)代(dai)品(pin)昂(ang)貴(gui)且(qie)耗(hao)時(shi),因(yin)此(ci)將(jiang)其(qi)冷(leng)凍(dong)保(bao)存(cun)以(yi)備(bei)長(chang)期(qi)儲(chu)存(cun)至(zhi)關(guan)重(zhong)要(yao)。
一yi旦dan從cong傳chuan代dai培pei養yang中zhong獲huo得de少shao量liang剩sheng餘yu的de細xi胞bao,應ying將jiang其qi作zuo為wei種zhong子zi儲chu備bei冷leng凍dong,並bing加jia以yi保bao護hu,不bu得de供gong一yi般ban實shi驗yan室shi使shi用yong。可ke從cong冷leng凍dong種zhong子zi儲chu備bei中zhong製zhi備bei和he補bu充chong工gong作zuo儲chu備bei。如ru果guo種zhong子zi儲chu備bei耗hao盡jin,然ran後hou,冷leng凍dong保bao存cun的de工gong作zuo儲chu備bei可ke以yi作zuo為wei製zhi備bei新xin鮮xian種zhong子zi儲chu備bei的de來lai源yuan,從cong初chu始shi冷leng凍dong開kai始shi,產chan生sheng數shu量liang的de增zeng加jia最zui小xiao。
冷凍保存培養細胞的最佳方法是在液氮中,在培養基中,在二甲基亞碸(DMSO)或(huo)甘(gan)油(you)等(deng)冷(leng)凍(dong)保(bao)護(hu)劑(ji)的(de)存(cun)在(zai)下(xia)保(bao)存(cun)細(xi)胞(bao)。低(di)溫(wen)保(bao)護(hu)劑(ji)可(ke)以(yi)降(jiang)低(di)介(jie)質(zhi)的(de)冰(bing)點(dian),也(ye)可(ke)以(yi)降(jiang)低(di)冷(leng)卻(que)速(su)度(du),從(cong)而(er)大(da)大(da)降(jiang)低(di)冰(bing)晶(jing)形(xing)成(cheng)的(de)風(feng)險(xian),而(er)冰(bing)晶(jing)形(xing)成(cheng)會(hui)損(sun)害(hai)細(xi)胞(bao)並(bing)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)死(si)亡(wang)。
DMSO已知有助於有機分子進入組織。處理含有二甲基亞碸的試劑時,應使用適用於此類材料危害的設備和做法。按照當地法規處理試劑。
手機版








