xibaopeiyangshizhijiangxibaocongdongwuhuozhiwutineiquchu
，ranhouzaishiyiderengonghuanjingzhongshengchangdeguocheng。xibaokeyizaipeiyangqianzhijiecongzuzhizhongquchubingtongguomeihuojixie方法進行解離，也可以來源於已建立的細胞係或細胞株。細胞常規培養是在細胞房中進行，在超淨工作台或生物安全櫃中
，把細胞處理好，根據需要加入細胞培養基，放入細胞培養瓶/皿或細胞培養板中，再放到帶有5% CO₂ 的37℃恒溫培養箱中培養。

細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)過(guo)程(cheng)中(zhong)如(ru)果(guo)操(cao)作(zuo)不(bu)當(dang)或(huo)者(zhe)條(tiao)件(jian)控(kong)製(zhi)不(bu)合(he)適(shi)容(rong)易(yi)受(shou)到(dao)化(hua)學(xue)或(huo)者(zhe)生(sheng)物(wu)因(yin)素(su)的(de)汙(wu)染(ran)。凡(fan)混(hun)入(ru)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)環(huan)境(jing)中(zhong)對(dui)細(xi)胞(bao)生(sheng)存(cun)有(you)害(hai)的(de)成(cheng)分(fen)和(he)造(zao)成(cheng)細(xi)胞(bao)不(bu)純(chun)的(de)異(yi)物(wu)都(dou)應(ying)視(shi)為(wei)汙(wu)染(ran)
，細(xi)胞(bao)汙(wu)染(ran)不(bu)能(neng)全(quan)被(bei)消(xiao)除(chu)，但(dan)能(neng)減(jian)少(shao)其(qi)發(fa)生(sheng)的(de)頻(pin)率(lv)和(he)後(hou)果(guo)的(de)嚴(yan)重(zhong)性(xing)。細(xi)胞(bao)汙(wu)染(ran)根(gen)據(ju)汙(wu)染(ran)源(yuan)主(zhu)要(yao)可(ke)以(yi)分(fen)為(wei)化(hua)學(xue)性(xing)
，物(wu)理(li)性(xing)和(he)生(sheng)物(wu)性(xing)汙(wu)染(ran)。

  微生物汙染

youyutiwaipeiyangdexibaozishenmeiyoudikangwurandenengli，erzaipeiyangjizhongjiakangshengsudekangwurannengliyeshiyouxiande，yinerxibaoweishengwuwuranyidanfashengwangwangshiwufawanjiude。yibanzaixibaoshoudaowuranzaoqihuowuranjiaoqingshi
，nengjishichulibingchuquwuranwu，bufenxibaohaiyoukenengdedaowanjiu。

butongdeweishengwuwuranwuduixibaodeyingxiangyeyouchabie，weishengwuzhongzhiyuantihebingduduixibaoxingtaihejinengdeyingxiangshichangqide
，huanmandeheqianzaide。ermeijunhexijunzengzhixunsu
，nengzaihenduandeshijianneiyizhixibaoshengchanghuochanshengyouduwuzhishamiexibao。

1、黴菌汙染

zhongleihenduo，wurandeduoshiqumeijun
，baisenianzhujun，jiaomujun，heimeijun
，baozijundeng。meijunwuranhouduoshuzaipeiyangyezhongxingchengdanhuangsehuoshibaisedepiaofuwu

，yibanrouyankejian，jiaoyibeifaxian，duanqineipeiyangyeduobubianhunzhuo。daozhixianweijingxiakeyikanjianxibaozhijianyouzonghengjiaocuochuanxingdesizhuang，shuzhizhuanghuoguanzhuangjunsi，bingpiaofuzaipeiyangyezhong。henduojunsizaigaobeijingxiakeyikanjianlianzhuangpailiedejunzhu。nianzhujunjijiaomujunjunzhuchengluanyuanxing，sanzaixibaoshangjixibaozhoubianshengchang。

處理：確認是黴菌汙染
，如果細胞種類不是特別珍貴
，直接放棄，並將實驗環節消毒。

2、細菌汙染

細xi菌jun汙wu染ran較jiao常chang見jian的de有you大da腸chang杆gan菌jun
，白bai色se葡pu萄tao球qiu菌jun
，假jia單dan孢bao菌jun等deng。加jia用yong抗kang菌jun素su的de培pei養yang液ye可ke預yu防fang和he排pai除chu個ge別bie一yi般ban少shao量liang細xi菌jun的de汙wu染ran。一yi旦dan發fa生sheng細xi菌jun汙wu染ran很hen容rong易yi發fa現xian
，多duo數shu情qing況kuang下xia培pei養yang液ye短duan時shi間jian內nei變bian黃huang，表biao明ming有you大da量liang酸suan性xing物wu質zhi產chan生sheng，出chu現xian明ming顯xian渾hun濁zhuo現xian象xiang；有you時shi靜jing置zhi的de培pei養yang液ye起qi初chu不bu混hun
，但dan稍shao加jia震zhen蕩dang，就jiu有you許xu多duo混hun濁zhuo物wu漂piao起qi。倒dao置zhi顯xian微wei鏡jing下xia觀guan察cha，可ke見jian培pei養yang液ye中zhong有you大da量liang圓yuan球qiu狀zhuang顆ke粒li物wu漂piao浮fu，有you時shi在zai細xi胞bao表biao麵mian及ji周zhou圍wei有you大da量liang細xi菌jun存cun在zai，細xi胞bao停ting止zhi生sheng長chang並bing有you中zhong毒du表biao現xian。必bi要yao時shi可ke取qu少shao量liang培pei養yang液ye塗tu片pian染ran色se檢jian查zha以yi明ming確que細xi菌jun種zhong類lei；有的培養液改變不明顯而有疑似汙染，亦可向肉湯培養基內陸入少量培養液
，37℃培養以檢測。

處理：一般用抗生素的常用量的5~10倍作衝擊療法
，用藥24~48小xiao時shi後hou再zai換huan常chang規gui培pei養yang液ye，有you時shi在zai早zao期qi汙wu染ran時shi此ci法fa有you效xiao。細xi胞bao培pei養yang中zhong用yong抗kang生sheng素su多duo為wei預yu防fang細xi菌jun汙wu染ran，一yi半ban多duo聯lian合he應ying用yong。一yi旦dan發fa生sheng汙wu染ran後hou再zai使shi用yong抗kang生sheng素su常chang常chang難nan以yi除chu掉diao，有you的de抗kang生sheng素su隻zhi有you抑yi菌jun作zuo用yong而er無wu殺sha菌jun效xiao應ying。

3、支原體汙染

支原體是一種大小介於細菌和病毒之間(最小直徑0.2um)並獨立生活的微生物.約有1%可通過濾菌器。支原體無細胞壁形態呈高度多形性.可為圓形、絲狀或梨形。

支原體形態多變
，在光境下不易看清內部結構。多數支原體適合於偏堿條件下生存(PH7.6-8.0)，對酸耐受性差。對熱比較敏感，對一般抗生素不敏感。

支原體汙染細胞後.培養液可不發生混濁.多數情況下細胞病理變化輕微或不顯著，細微變化也可由於傳代
、換液而緩解.因此易被忽視。但個別嚴重者，可致細胞增殖緩慢.甚至從培養器皿脫落。為確定有無支原體汙染可做如下檢測：

a:相差顯微境檢測；b:熒光染色法；c:電鏡檢查；d:DNA分子條文檢查或支原體培養等方法。處理：市場上有多種支原體清除試劑盒，效果比較好。

4、酵母汙染

酵母到處存在
，並能在合適的環境中快速生長。酵母汙染很容易觀察到
，培養物變渾濁
，尤其在後期。一般PH值變化很小，嚴重時，PH值升高。顯微鏡下呈卵圓形或球形顆粒

，有些會芽生較小顆粒。

5、病毒汙染

組織細胞培養過程中，如果沒有除去潛在的病毒
，就會產生病毒汙染。目前，從原代猴腎細胞的培養中已發現不少於20種血清性病毒。

盡管病毒汙染的細胞不影響原代培養
，但生產疫苗是不安全的。因此
，潛在病毒是細胞大量生產和疫苗、幹擾素等生物製品製作中的難題。

6、細胞交叉汙染

細(xi)胞(bao)汙(wu)染(ran)和(he)細(xi)菌(jun)汙(wu)染(ran)不(bu)同(tong)，細(xi)胞(bao)汙(wu)染(ran)是(shi)由(you)於(yu)在(zai)培(pei)養(yang)過(guo)程(cheng)中(zhong)各(ge)種(zhong)細(xi)胞(bao)同(tong)時(shi)進(jin)行(xing)，而(er)所(suo)用(yong)器(qi)具(ju)或(huo)液(ye)體(ti)混(hun)雜(za)使(shi)用(yong)所(suo)致(zhi)。這(zhe)種(zhong)汙(wu)染(ran)沒(mei)有(you)微(wei)生(sheng)物(wu)存(cun)在(zai)
，但(dan)使(shi)培(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)不(bu)同(tong)種(zhong)類(lei)之(zhi)間(jian)發(fa)生(sheng)混(hun)亂(luan)，細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)特(te)性(xing)
，形(xing)態(tai)發(fa)生(sheng)變(bian)化(hua)。有(you)些(xie)變(bian)化(hua)輕(qing)微(wei)，不(bu)易(yi)察(cha)覺(jiao)，有(you)些(xie)則(ze)可(ke)能(neng)由(you)於(yu)汙(wu)染(ran)的(de)細(xi)胞(bao)具(ju)有(you)生(sheng)長(chang)優(you)勢(shi)而(er)最(zui)終(zhong)壓(ya)過(guo)原(yuan)來(lai)細(xi)胞(bao)而(er)導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)的(de)抑(yi)製(zhi)
，最(zui)終(zhong)死(si)亡(wang)。汙(wu)染(ran)過(guo)的(de)細(xi)胞(bao)由(you)於(yu)種(zhong)類(lei)不(bu)純(chun)，無(wu)法(fa)進(jin)行(xing)實(shi)驗(yan)研(yan)究(jiu)。