細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)是(shi)指(zhi)將(jiang)細(xi)胞(bao)從(cong)動(dong)物(wu)或(huo)植(zhi)物(wu)體(ti)內(nei)取(qu)出(chu),然(ran)後(hou)在(zai)適(shi)宜(yi)的(de)人(ren)工(gong)環(huan)境(jing)中(zhong)生(sheng)長(chang)的(de)過(guo)程(cheng)。細(xi)胞(bao)可(ke)以(yi)在(zai)培(pei)養(yang)前(qian)直(zhi)接(jie)從(cong)組(zu)織(zhi)中(zhong)取(qu)出(chu)並(bing)通(tong)過(guo)酶(mei)或(huo)機(ji)械(xie)方法進行解離,也可以來源於已建立的細胞係或細胞株。細胞常規培養是在細胞房中進行,在超淨工作台或生物安全櫃中,把細胞處理好,根據需要加入細胞培養基,放入細胞培養瓶/皿或細胞培養板中,再放到帶有5% CO2 的37℃恒溫培養箱中培養。
細xi胞bao培pei養yang過guo程cheng中zhong如ru果guo操cao作zuo不bu當dang或huo者zhe條tiao件jian控kong製zhi不bu合he適shi容rong易yi受shou到dao化hua學xue或huo者zhe生sheng物wu因yin素su的de汙wu染ran。凡fan混hun入ru細xi胞bao培pei養yang環huan境jing中zhong對dui細xi胞bao生sheng存cun有you害hai的de成cheng分fen和he造zao成cheng細xi胞bao不bu純chun的de異yi物wu都dou應ying視shi為wei汙wu染ran,細xi胞bao汙wu染ran不bu能neng全quan被bei消xiao除chu,但dan能neng減jian少shao其qi發fa生sheng的de頻pin率lv和he後hou果guo的de嚴yan重zhong性xing。細xi胞bao汙wu染ran根gen據ju汙wu染ran源yuan主zhu要yao可ke以yi分fen為wei化hua學xue性xing、物理性和生物性汙染。
化學性汙染
培pei養yang環huan境jing中zhong許xu多duo化hua學xue物wu質zhi都dou可ke以yi引yin起qi細xi胞bao的de汙wu染ran。化hua學xue物wu質zhi並bing不bu總zong是shi抑yi製zhi細xi胞bao的de生sheng長chang,某mou些xie化hua學xue物wu質zhi如ru激ji素su就jiu可ke促cu進jin細xi胞bao的de生sheng長chang。不bu同tong細xi胞bao對dui化hua學xue物wu質zhi汙wu染ran的de反fan應ying是shi不bu一yi樣yang的de。未wei純chun化hua的de物wu質zhi、試劑、水、血清、生長輔助因子及儲存試劑的容器都可能成為化學性汙染的來源。
細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)的(de)必(bi)需(xu)養(yang)分(fen),如(ru)氨(an)基(ji)酸(suan),若(ruo)濃(nong)度(du)超(chao)過(guo)了(le)合(he)適(shi)的(de)範(fan)圍(wei),也(ye)會(hui)對(dui)細(xi)胞(bao)產(chan)生(sheng)毒(du)性(xing)。同(tong)樣(yang),不(bu)同(tong)細(xi)胞(bao)係(xi)其(qi)最(zui)佳(jia)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)下(xia)對(dui)血(xue)清(qing)和(he)緩(huan)衝(chong)液(ye)的(de)要(yao)求(qiu)是(shi)不(bu)一(yi)樣(yang)的(de),在(zai)培(pei)養(yang)中(zhong)應(ying)嚴(yan)格(ge)控(kong)製(zhi)。
玻璃製品清洗過程中殘留的變性劑或肥皂(通常殘留在瓶蓋的內表麵)是最常見的化學性汙染。為了避免金屬離子、有機分子、細胞內毒素等物質對水的汙染,在配製液體,清洗容器時必須使用不含雜質的超純水。
dongwuxueqingshixibaopeiyangzhongchangyongdetianranpeiyangji,danxueqingyoushiqianzaideshengwujihuaxuewurandelaiyuan。youyuxueqingcaijiyuduogedongwu,erqiebutongchangshangdeshengchangongyijizhilianggebuxiangtong,yincixueqingzhongxuduochengfendenongducunzaihendadebianyi。xueqingduibutongxibaodecushengchangnenglijidufuzuoyongqujueyuzhexiexibaodefenhuagongneng、組織來源及培養基的成分等因素。在進行一係列實驗時,為了保證實驗的可重複性,最好選用同一批次的血清。
細xi胞bao培pei養yang使shi用yong的de所suo有you物wu質zhi都dou應ying是shi高gao純chun度du的de,並bing經jing過guo機ji構gou的de鑒jian定ding,實shi驗yan者zhe應ying對dui上shang述shu成cheng分fen進jin行xing純chun度du鑒jian定ding。同tong時shi,正zheng確que配pei置zhi和he儲chu存cun培pei養yang液ye及ji試shi劑ji也ye是shi非fei常chang重zhong要yao的de,應ying該gai采cai取qu標biao準zhun的de操cao作zuo步bu驟zhou,避bi免mian液ye體ti體ti積ji計ji算suan錯cuo誤wu,混hun用yong類lei似si化hua合he物wu等deng錯cuo誤wu。
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