zhunbeigongzuoduikaizhanxibaopeiyangyichangzhongyao
，gongzuoliangyejiaoda
，yinggeiyuzugoudezhongshi，tuibeigongzuozhongmouyihuanjiedeshuhukedaozhishiyanshibaihuowufajinxing。zhunbeigongzuodeneirongbaokuoqimindeqingxi、幹燥與消毒，培養基與其他試劑的配製
、分裝及滅菌，無菌室或超淨台的清潔與消毒，培養箱及其他儀器的檢查與調試。

2、取材

在無菌環境下從機體取出某種組織細胞（視實驗目的而定）
，經過一定的處理（如消化分散細胞、分離等）後接入培養器血中
，這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的*培養稱為原代培養。

理論上講各種動物和人體內的所有組織都可以用於培養
，實際上幼體組織（尤其是胚胎組織）bichengniangetidezuzhirongyipeiyang，fenhuachengdudidezuzhibifenhuagaoderongyipeiyang
，zhongliuzuzhibizhengchangzuzhirongyipeiyang。qucaihouyinglijichuli
，jinkuaipeiyang，yingubunengmashangpeiyangshi，kejiangzuzhikuaiqiechenghuangdoubandadexiaokuai
，zhi4℃的(de)培(pei)養(yang)液(ye)中(zhong)保(bao)存(cun)。取(qu)組(zu)織(zhi)時(shi)應(ying)嚴(yan)格(ge)保(bao)持(chi)無(wu)菌(jun)，同(tong)時(shi)也(ye)要(yao)避(bi)免(mian)接(jie)觸(chu)其(qi)他(ta)的(de)有(you)害(hai)物(wu)質(zhi)。取(qu)病(bing)理(li)組(zu)織(zhi)和(he)皮(pi)膚(fu)及(ji)消(xiao)化(hua)道(dao)上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)時(shi)容(rong)易(yi)帶(dai)菌(jun)，為(wei)減(jian)少(shao)汙(wu)染(ran)可(ke)用(yong)抗(kang)菌(jun)素(su)處(chu)理(li)。

3、培養

將(jiang)取(qu)得(de)的(de)組(zu)織(zhi)細(xi)胞(bao)接(jie)入(ru)培(pei)養(yang)瓶(ping)或(huo)培(pei)養(yang)板(ban)中(zhong)的(de)過(guo)程(cheng)稱(cheng)為(wei)培(pei)養(yang)。如(ru)係(xi)組(zu)織(zhi)塊(kuai)培(pei)養(yang)，則(ze)直(zhi)接(jie)將(jiang)組(zu)織(zhi)塊(kuai)接(jie)入(ru)培(pei)養(yang)器(qi)皿(min)底(di)部(bu)，幾(ji)個(ge)小(xiao)時(shi)後(hou)組(zu)織(zhi)塊(kuai)可(ke)貼(tie)牢(lao)在(zai)底(di)部(bu)，再(zai)加(jia)入(ru)培(pei)養(yang)基(ji)。如(ru)係(xi)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)，一(yi)般(ban)應(ying)在(zai)接(jie)入(ru)培(pei)養(yang)器(qi)皿(min)之(zhi)前(qian)進(jin)行(xing)細(xi)胞(bao)計(ji)數(shu)，按(an)要(yao)求(qiu)以(yi)一(yi)定(ding)的(de)量(liang)（以每毫升細胞數表示）接入培養器皿並直接加入培養基。細胞進入培養器皿後
，立即放入培養箱中
，使細胞盡早進入生長狀態。

正在培養中的細胞應每隔一定時間觀察一次，觀察的內容包括細胞是否生長良好，形態是否正常，有無汙染，培養基的pH是否太酸或太堿（由酚紅指示劑指示），此外對培養溫度和CO₂濃度也要定時檢查。

原代培養一般有一段潛伏期（數小時到數十天不等），在zai潛qian伏fu期qi細xi胞bao一yi般ban不bu分fen裂lie，但dan可ke貼tie壁bi和he遊you走zou。過guo了le潛qian伏fu期qi後hou細xi胞bao進jin入ru旺wang盛sheng的de分fen裂lie生sheng長chang期qi。細xi胞bao長chang滿man瓶ping底di後hou要yao進jin行xing傳chuan代dai培pei養yang，將jiang一yi瓶ping中zhong的de細xi胞bao消xiao化hua懸xuan浮fu後hou分fen至zhi兩liang到dao三san瓶ping繼ji續xu培pei養yang。每mei傳chuan代dai一yi次ci稱cheng為wei“一代”。二倍體細胞一般隻能傳幾十代，而轉化細胞係或細胞株則可無限地傳代下去。轉化細胞可能具有惡性性質，也可能僅有不死性（Immortality）而無惡性。

4、凍存及複蘇

為了保存細胞，特別是不易獲得的突變型細胞或細胞株，要將細胞凍存。凍存的溫度一般用液氮的溫度（-196℃）

，將細胞收集至凍存管中加入含保護劑（一般為二甲亞碸或甘油）depeiyangji，yiyidingdelengquesududongcun
，baocunyuyedanzhong。zaididewenduxia，xibaobaocundeshijianjihushiwuxiande。fusuyibancaiyongkuairongfangfa
，jicongyedanzhongquchudongcunguanhou，lijifangru37℃水中，使之在一分鍾內迅速融解。然後將細胞轉入培養器皿中進行培養。

凍存過程中保護劑的選用、細胞密度、降溫速度及複蘇時溫度
、融化速度等都對細胞活力有影響。

5、常用儀器設備

無菌室、超淨工作台、三重純水蒸餾器
、抽氣泵、壓力蒸氣消毒器、電熱恒溫培養箱、培養器具、CO₂培養箱
、恒溫水浴鍋
、倒置顯微鏡、離心機、無菌過濾器
、洗刷裝置、細胞計數板和電子細胞技術儀等等。