8. 線性
yangbenjingtiduxishihoujiancefenxijiweixianxingfenxi,ciguochengyeshiyongyuxiaochuyangbendejizhixiaoying。jizhixiaoyingdaozhidejieguoyoujiayinxinghejiayangxingliangzhong,zaixianxingxishishijiukeyibianbiechulai,dangcunzaijizhixiaoyingshiyangbendexishixianxingjiubuhuimanzu,shuominggaileiyangbenyoukenengbushiyongELISA kit,在研發階段就需要優化反應體係等消除基質效應帶來的幹擾。
9. 回收率
回收實驗可檢測試劑盒是否受幹擾因子的影響,也是辨別基質效應的一種方法。在研發過程中,一般會采用低、中和高濃度的分析物被摻入到已知濃度的驗證樣本中,進行回收實驗測定,回收率應介於80%-120%,表明試劑盒的性能較好。
10. 穩定性
即試劑盒在有效期內的穩定性。通常采用加速降解的方法來推斷試劑盒的有效期。通常試劑盒在37℃放置一天折合有效期2個月,實際工作中,一般將試劑盒在37℃破壞3-7天(tian)後(hou),然(ran)後(hou)檢(jian)測(ce)上(shang)述(shu)指(zhi)標(biao),觀(guan)察(cha)是(shi)否(fou)在(zai)範(fan)圍(wei)內(nei)。也(ye)可(ke)留(liu)樣(yang)至(zhi)有(you)效(xiao)期(qi)後(hou)進(jin)行(xing)檢(jian)驗(yan),來(lai)衡(heng)量(liang)有(you)效(xiao)期(qi),對(dui)於(yu)批(pi)量(liang)大(da)的(de)指(zhi)標(biao),可(ke)將(jiang)加(jia)速(su)降(jiang)解(jie)和(he)留(liu)樣(yang)檢(jian)驗(yan)相(xiang)結(jie)合(he)的(de)方(fang)法(fa)。
另外,ELISA實驗操作時質控標準如下:
1、嚴格按照試劑說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
2、jiayanghoujishifangrenfuxiang。biaobenjiaoduoshi,yaofenpicaozuo。anshuomingbuzhouyangekongzhicaozuoshijian,fangzhifuyushijianrenweiyanchang,daozhifeiteyixingjiehejinfuyufanyingkongzhouwei,nanyiqingxichedi。
3、封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發,產生周邊現象從而導致“花板”的出現。
4、用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板後好在吸水紙(選擇幹淨、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍幹:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象而導致“花板”的出現。
5、合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
6、加酶試劑後用吸水紙在酶標板表麵輕拭吸幹。
7、顯色劑盡量在臨用前配製,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
8、加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產生氣泡。
9、應保證C清潔,整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至低限度。從而提高檢測的特異性。並得到更準確、可靠的實驗結果。
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