在使用ELISA試劑盒進行實驗的時候
，需要注意很多問題，比如溫育、顯色

、包被等問題。其中，包被是要特別注意的一個問題，直接關係到實驗的效果。

一、 包被的方式

將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。蛋白質與聚苯 烯(xi)固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)是(shi)通(tong)過(guo)物(wu)理(li)吸(xi)附(fu)結(jie)合(he)的(de)，靠(kao)的(de)是(shi)蛋(dan)白(bai)質(zhi)分(fen)子(zi)結(jie)構(gou)上(shang)的(de)疏(shu)水(shui)基(ji)團(tuan)與(yu)固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)表(biao)麵(mian)的(de)疏(shu)水(shui)基(ji)團(tuan)間(jian)的(de)作(zuo)用(yong)。這(zhe)種(zhong)物(wu)理(li)吸(xi)附(fu)是(shi)非(fei)特(te)異(yi)性(xing)的(de)，受(shou)蛋(dan)白(bai)質(zhi)的(de)分(fen)子(zi)量(liang)、等電點
、濃度等的影響。

大(da)分(fen)子(zi)蛋(dan)白(bai)質(zhi)較(jiao)小(xiao)分(fen)子(zi)蛋(dan)白(bai)質(zhi)通(tong)常(chang)含(han)有(you)更(geng)多(duo)的(de)疏(shu)水(shui)基(ji)團(tuan)，故(gu)更(geng)易(yi)吸(xi)附(fu)到(dao)固(gu)相(xiang)載(zai)體(ti)表(biao)麵(mian)。不(bu)易(yi)吸(xi)附(fu)的(de)非(fei)蛋(dan)白(bai)質(zhi)抗(kang)原(yuan)可(ke)用(yong)間(jian)接(jie)包(bao)被(bei)的(de)抗(kang)原(yuan)經(jing)固(gu)相(xiang)抗(kang)體(ti)的(de)親(qin)和(he)層(ceng)析(xi)作(zuo)用(yong)
，包(bao)被(bei)在(zai)固(gu)相(xiang)上(shang)的(de)抗(kang)原(yuan)純(chun)度(du)大(da)大(da)提(ti)高(gao)
，因(yin)此(ci)含(han)雜(za)質(zhi)較(jiao)多(duo)的(de)抗(kang)原(yuan)也(ye)可(ke)采(cai)用(yong)捕(bu)獲(huo)包(bao)被(bei)法(fa)。

親和素生物素即用親和素先包被載體，加入生物素化的DNA，ELISA試劑盒這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用於各種抗原物質的定量測定。脂類物質無法與固相載體結合
，可將其在有機溶劑（例如乙醇）中溶解後加入ELISA板孔中
，開蓋置冰箱或冷風吹幹

，待酒精揮發後
，讓脂質自然幹固在固相表麵。

優點：試驗的特異性
、敏感性均由此得以改善，重複性亦佳。抗原用量少，僅為直接包被的1/10乃至於/100。