紫外分光光度計如何校正？
發布日期：2024-05-27
核心提示： 為了獲得準確的研究結果，準確測得樣品溶液的吸光度非常關鍵。一般來說，分析結果的不可靠性與偶然誤差和係統誤差有關。偶
為了獲(huo)得(de)準(zhun)確(que)的(de)研(yan)究(jiu)結(jie)果(guo)，準(zhun)確(que)測(ce)得(de)樣(yang)品(pin)溶(rong)液(ye)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)非(fei)常(chang)關(guan)鍵(jian)。一(yi)般(ban)來(lai)說(shuo)，分(fen)析(xi)結(jie)果(guo)的(de)不(bu)可(ke)靠(kao)性(xing)與(yu)偶(ou)然(ran)誤(wu)差(cha)和(he)係(xi)統(tong)誤(wu)差(cha)有(you)關(guan)。偶(ou)然(ran)誤(wu)差(cha)影(ying)響(xiang)測(ce)量(liang)的(de)精(jing)密(mi)度(du)，可(ke)通(tong)過(guo)足(zu)夠(gou)數(shu)量(liang)測(ce)量(liang)的(de)統(tong)計(ji)處(chu)理(li)來(lai)減(jian)少(shao);係統誤差影響測量結果的準確度，可在大體相同實驗條件下，用比較一種物質的準確測量結果，使係統誤差統一起來。紫外分光光度計：根據物質的吸收光譜研究物質的成分、結jie構gou和he物wu質zhi間jian相xiang互hu作zuo用yong的de有you效xiao手shou段duan。紫zi外wai分fen光guang光guang度du計ji可ke以yi在zai紫zi外wai可ke見jian光guang區qu任ren意yi選xuan擇ze不bu同tong波bo長chang的de光guang。物wu質zhi的de吸xi收shou光guang譜pu就jiu是shi物wu質zhi中zhong的de分fen子zi和he原yuan子zi吸xi收shou了le入ru射she光guang中zhong的de某mou些xie特te定ding波bo長chang的de光guang能neng量liang，相xiang應ying地di發fa生sheng了le分fen子zi振zhen動dong能neng級ji躍yue遷qian和he電dian子zi能neng級ji躍yue遷qian的de結jie果guo。由you於yu各ge種zhong物wu質zhi具ju有you各ge自zi不bu同tong的de分fen子zi 、原子和不同的分子空間結構，其吸收光能量的情況也就不會相同，因此，每種物質就有其特有的、固定的吸收光譜曲線，可根據吸收光譜上的某些特征波長處的吸光度的高低判別或測定該物質的含量。紫外可見分光光度法：紫外-可見分光光度法是在190〜800mn波長範圍內測定物質的吸光度，用於鑒別、雜za質zhi檢jian查zha和he定ding量liang測ce定ding的de方fang法fa。當dang光guang穿chuan過guo被bei測ce物wu質zhi溶rong液ye時shi，物wu質zhi對dui光guang的de吸xi收shou程cheng度du隨sui光guang的de波bo長chang不bu同tong而er變bian化hua。因yin此ci，通tong過guo測ce定ding物wu質zhi在zai不bu同tong波bo長chang處chu的de吸xi光guang度du，並bing繪hui製zhi其qi吸xi光guang度du與yu波bo長chang的de關guan係xi圖tu即ji得de被bei測ce物wu質zhi的de吸xi收shou光guang譜pu。從cong吸xi收shou光guang譜pu中zhong，可ke以yi確que定ding最zui大da吸xi收shou波bo長chang和he最zui小xiao吸xi收shou波bo物wu質zhi的de吸xi收shou光guang譜pu具ju有you與yu其qi結jie構gou相xiang關guan的de特te征zheng性xing。因yin此ci，可ke以yi通tong過guo特te定ding波bo長chang範fan圍wei內nei樣yang品pin的de光guang譜pu與yu對dui照zhao光guang譜pu或huo對dui照zhao品pin光guang譜pu的de比bi較jiao，或huo通tong過guo確que定ding最zui大da吸xi收shou波bo長chang，或huo通tong過guo測ce量liang兩liang個ge特te定ding波bo長chang處chu的de吸xi收shou比bi值zhi而er鑒jian別bie物wu質zhi。用yong於yu定ding量liang時shi，在zai最zui大da吸xi收shou波bo長chang處chu測ce量liang一yi定ding濃nong度du樣yang品pin溶rong液ye的de吸xi光guang度du，並bing與yu一yi定ding濃nong度du的de對dui照zhao溶rong液ye的de吸xi光guang度du進jin行xing比bi較jiao或huo采cai用yong吸xi收shou係xi數shu法fa求qiu算suan出chu樣yang品pin溶rong液ye的de濃nong度du。波長：儀器波長的允許誤差為：紫外光區± lnm , 500nm附近士 2nm。youyuhuanjingjingyinsuduijixiebufendeyingxiang，yiqidebochangjingchanghuilveyoubiandong，yincichuyingdingqiduisuoyongdeyiqijinxingquanmianxiaozhengjiandingwai，haiyingyucedingqianxiaozhengcedingbochang。changyonggongdengzhongdejiaoqiangpuxian 237. 83nm，253. 65nm，275. 28nm， 296. 73nm，313.16nm，334.15nm， 365. 02nm，404. 66nm， 435. 83nm，546. 07nm 與576. 96nm；或用儀器中氘燈的486. 02nm與656.10nm譜線進行校正；鈥玻璃在波長 279. 4nm，287. 5nm， 333. 7nm，360. 9nm，418. 5nm， 460. 0nm， 484. 5nm， 536. 2nm 與 637. 5nm 處有尖銳吸收峰，也可作波長校正用，但因來源不同或隨著時間的推移會有微小的變化，使用時應注意；近年來，常使用高氯酸鈥溶液校正雙光束儀器，以10%高氯酸溶液為溶劑，配製含氧化鈥（Ho203 ) 4 % 的溶液，該溶液的吸收峰波長為241. 13nm, 278. l0nm, 287. 18nm，333. 44nm，345.47nm,361, 31nm, 416. 28nm, 451. 30nm，485. 29nm, 536. 64nm和 640.52nm。取在120℃幹燥至恒重的基準重鉻酸鉀約60mg，精密稱定，用0.005mol/L硫酸溶液溶解並稀釋至1000ml，在規定的波長處測定並計算其吸收係數，並與規定的吸收係數比較：
E為吸收係數，常用的表示方法 ，其物理意義為當溶液濃度為1%（g/ml）,液層厚度為1cm時的吸光度數值；c為100ml溶液中所含物質的重量（按幹燥品或無水物計算），g；雜散光的檢查：可按下表所列的試劑和濃度，配製成水溶液，置1cm石英吸收池中，在規定的波長處測定透光率,應符合表中的規定。一、溫wen度du和he濕shi度du是shi影ying響xiang儀yi器qi性xing能neng的de重zhong要yao因yin素su。他ta們men可ke以yi引yin起qi機ji械xie部bu件jian的de鏽xiu蝕shi，使shi金jin屬shu鏡jing麵mian的de光guang潔jie度du下xia降jiang，引yin起qi儀yi器qi機ji械xie部bu分fen的de誤wu差cha或huo性xing能neng下xia降jiang；造成光學部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜鏽蝕，產生光能不足、雜散光、噪zao聲sheng等deng，甚shen至zhi儀yi器qi停ting止zhi工gong作zuo，從cong而er影ying響xiang儀yi器qi壽shou命ming。維wei護hu保bao養yang時shi應ying定ding期qi加jia以yi校xiao正zheng。應ying具ju備bei四si季ji恒heng濕shi的de儀yi器qi室shi，配pei置zhi恒heng溫wen設she備bei，特te別bie是shi地di處chu南nan方fang地di區qu的de實shi驗yan室shi。
二、環境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機械係統的靈活性、降低各種限位開關、按鍵、光電偶合器的可靠性，也是造成必須學部件鋁膜鏽蝕的原因之一。因此必須定期清潔，保障環境和儀器室內衛生條件，防塵。
三、yiqishiyongyidingzhouqihou，neibuhuijileiyidingliangdechenai，zuihaoyouweixiugongchengshihuozaigongchengshizhidaoxiadingqikaiqiyiqiwaizhaoduineibujinxingchuchengongzuo，tongshijianggefareyuanjiandesanreqizhongxinjingu，duiguangxuehedemifengchuangkoujinxingqingjie，biyaoshiduiguanglujinxingxiaozhun，duijixiebufenjinxingqingjiehebiyaoderunhua，zuihou，huifuyuanzhuang，zaijinxingyixiebiyaodejiance、調校與記錄。
編輯：songjiajie2010
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