1、合理分隔實驗室:將樣品的處理、配製PCR反應液、PCR循環擴增及PCR產物的鑒定等步驟分區或分室進行,特別注意樣本處理及產物的鑒定等步驟分區或分室進行,及PCR產物的鑒定應與其它步驟嚴格分開。
最好能劃分①標本處理區;②PCR反應液製備區;③PCR循環擴增區;④PCR產物鑒定區。其實驗用品及吸樣槍應專用,實驗前應將實驗室用紫外線消毒以破壞殘留的DNA或RNA。
2、吸樣槍:xiyangqiangwuranshiyigezhidezhuyidewenti。youyucaozuoshibushenjiangyangpinhuomobanhesuanxiruqiangneihuozhanshangqiangtoushiyigeyanzhongdewuranyuan,yinerjiayanghuoxiqumobanhesuanshiyaoshifenxiaoxin,xiyangyaoman,xiyangshijinliangyicixingwancheng,jiduocichouxi,yimianjiaochawuranhuochanshengqirongjiaowuran。
3、預混和分裝PCR試劑:所有的PCR試劑都應小量分裝,如有可能,PCR反應液應預先配製好,然後小量分裝,-20℃保存。以減少重複加樣次數,避免汙染機會。另外,PCR試劑,PCR反應液應與樣品及PCR產物分開保存,不應放於同一冰盒或同一冰箱。
4、防止操作人員汙染,使用一次性手套、吸頭、小離心管應一次性使用。5、設(she)立(li)適(shi)當(dang)的(de)陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)和(he)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao),陽(yang)性(xing)對(dui)照(zhao)以(yi)能(neng)出(chu)現(xian)擴(kuo)增(zeng)條(tiao)帶(dai)的(de)最(zui)低(di)量(liang)的(de)標(biao)準(zhun)病(bing)原(yuan)體(ti)核(he)酸(suan)為(wei)宜(yi),並(bing)注(zhu)意(yi)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)的(de)可(ke)能(neng)性(xing),每(mei)次(ci)反(fan)應(ying)都(dou)應(ying)有(you)一(yi)管(guan)不(bu)加(jia)模(mo)板(ban)的(de)試(shi)劑(ji)對(dui)照(zhao)及(ji)相(xiang)應(ying)不(bu)含(han)有(you)被(bei)擴(kuo)增(zeng)核(he)酸(suan)的(de)樣(yang)品(pin)作(zuo)陰(yin)性(xing)對(dui)照(zhao)。6、減少PCR循環次數,隻要PCR產物達到檢測水平就適可而止。7、選擇質量好的Eppendorf管guan,以yi避bi免mian樣yang本ben外wai溢yi及ji外wai來lai核he酸suan的de進jin入ru,打da開kai離li心xin管guan前qian應ying先xian離li心xin,將jiang管guan壁bi及ji管guan蓋gai上shang的de液ye體ti甩shuai至zhi管guan底di部bu。開kai管guan動dong作zuo要yao輕qing,以yi防fang管guan內nei液ye體ti濺jian出chu。