手機版
薄層色譜分析法，是利用各成分對同一吸附劑（如矽膠）吸附能力不同，使得流動相（溶劑）流過吸附劑過程中，連續的產生吸附、解吸附、再吸附、再(zai)解(jie)吸(xi)附(fu)，從(cong)而(er)達(da)到(dao)各(ge)成(cheng)分(fen)互(hu)相(xiang)分(fen)離(li)。在(zai)化(hua)工(gong)領(ling)域(yu)中(zhong)，有(you)一(yi)種(zhong)層(ceng)析(xi)分(fen)離(li)技(ji)術(shu)非(fei)常(chang)出(chu)名(ming)，就(jiu)是(shi)薄(bo)層(ceng)色(se)譜(pu)法(fa)，也(ye)叫(jiao)薄(bo)層(ceng)層(ceng)析(xi)，這(zhe)是(shi)一(yi)種(zhong)快(kuai)速(su)分(fen)離(li)化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)的(de)最(zui)有(you)效(xiao)層(ceng)析(xi)方(fang)法(fa)，它(ta)的(de)工(gong)作(zuo)原(yuan)理(li)就(jiu)是(shi)利(li)用(yong)吸(xi)附(fu)各(ge)成(cheng)分(fen)，使(shi)其(qi)達(da)到(dao)互(hu)相(xiang)分(fen)離(li)的(de)目(mu)的(de)。針(zhen)對(dui)此(ci)種(zhong)技(ji)術(shu)，今(jin)天(tian)小(xiao)析(xi)姐(jie)就(jiu)來(lai)給(gei)大(da)家(jia)介(jie)紹(shao)一(yi)下(xia)薄(bo)層(ceng)色(se)譜(pu)法(fa)的(de)5個步驟、rf值、用途及注意事項。
薄層色譜法的5個步驟
步驟一：薄層板製備除另有規定外，將1份固定相和3份水在研缽中向一方向研磨混合，去除表麵的氣泡後，倒入塗布器中，在玻板上平穩地移動塗布器進行塗布(厚度為0.2～0.3mm)，取下塗好薄層的玻板，置水平台上於室溫下晾幹，後在110℃烘30分鍾，即置有幹燥劑的幹燥箱中備用。使用前檢查其均勻度(可通過透射光和反射光檢視)。手工製板一般分不含粘合劑的軟板和含粘合劑的硬板兩種。
步驟二：薄層板的活化矽膠板於105-110℃烘30分鍾，氧化鋁板於150-160℃烘4小時，可得活性的薄層板。
步驟三：點樣點樣方式：分為手動點樣和自動點樣。手動點樣主要器具為微量毛細管、微量注射器等。自動點樣采用半自動點樣儀或全自動點樣儀，按預設程序自動點樣。手動點樣靈活方便，常用於各種TCL鑒別中，器具以微量毛細管最常用。儀器的自動點樣準確性好，常用於薄層掃描法的含量測定。
點樣方法：分(fen)為(wei)接(jie)觸(chu)式(shi)點(dian)樣(yang)和(he)噴(pen)霧(wu)點(dian)樣(yang)。噴(pen)霧(wu)點(dian)樣(yang)為(wei)儀(yi)器(qi)控(kong)製(zhi)，在(zai)此(ci)不(bu)展(zhan)開(kai)描(miao)述(shu)。接(jie)觸(chu)式(shi)手(shou)工(gong)點(dian)樣(yang)時(shi)，應(ying)注(zhu)意(yi)小(xiao)心(xin)用(yong)點(dian)樣(yang)器(qi)垂(chui)直(zhi)接(jie)觸(chu)薄(bo)層(ceng)板(ban)表(biao)麵(mian)以(yi)防(fang)止(zhi)損(sun)傷(shang)板(ban)麵(mian)。若(ruo)薄(bo)層(ceng)吸(xi)附(fu)劑(ji)表(biao)麵(mian)被(bei)損(sun)壞(huai)或(huo)點(dian)成(cheng)窪(wa)孔(kong)，則(ze)展(zhan)開(kai)後(hou)斑(ban)點(dian)成(cheng)不(bu)規(gui)則(ze)形(xing)狀(zhuang)；靠(kao)近(jin)溶(rong)劑(ji)前(qian)沿(yan)的(de)化(hua)合(he)物(wu)形(xing)成(cheng)三(san)角(jiao)形(xing)，靠(kao)近(jin)原(yuan)點(dian)的(de)化(hua)合(he)物(wu)形(xing)成(cheng)新(xin)月(yue)形(xing)，影(ying)響(xiang)測(ce)定(ding)結(jie)果(guo)。原(yuan)點(dian)損(sun)失(shi)帶(dai)來(lai)誤(wu)差(cha)，也(ye)將(jiang)使(shi)展(zhan)開(kai)後(hou)的(de)定(ding)量(liang)和(he)判(pan)斷(duan)不(bu)準(zhun)確(que)。
步驟四：展開
展開劑的配製：配pei製zhi展zhan開kai劑ji時shi，應ying嚴yan格ge控kong製zhi其qi比bi例li準zhun確que度du，如ru遇yu到dao比bi例li很hen小xiao的de溶rong劑ji時shi，應ying盡jin量liang滿man足zu其qi精jing確que度du要yao求qiu，而er不bu是shi為wei圖tu方fang便bian省sheng事shi直zhi接jie用yong滴di管guan加jia入ru。展zhan開kai劑ji配pei好hao後hou如ru果guo渾hun濁zhuo不bu清qing，不bu能neng立li即ji使shi用yong。應ying轉zhuan移yi入ru分fen液ye漏lou鬥dou中zhong，待dai其qi靜jing置zhi分fen層ceng澄cheng清qing後hou再zai取qu其qi上shang層ceng(或下層)液進行展開。
步驟五：顯色薄層板顯色方法有哪些？主要有三種方法，分別是蒸汽顯色法、物理顯色法和試劑顯色法。
薄層色譜法的rf值rf值指的是溶質移動的距離/溶液移動的距離。表示物質移動的相對距離。
各種物質的Rf隨要分離化合物的結構，濾紙或薄層板的種類、溶劑、溫度等不同而不同，但在條件固定的情況下，Rf對每一種化合物來說是一個特定數值。
薄層色譜法的用途有哪些？主要有以下三大用途，一起來看看吧！
用途一：快速分離兩種物質；
用途二：鑒定少量有機物的組成；
用途三：跟蹤反應進程。
薄層色譜注意事項
薄層色譜法的注意事項有哪些？主要有以下幾個注意事項。注意事項一：所用玻璃板應洗淨不掛水珠，光滑平整；
注意事項二：鋪板要均勻，厚度適宜，並於室溫下晾幹後在110℃活化30分鍾，置於有幹燥劑的幹燥箱或幹燥器中備用；注意事項三：點樣點一般為圓點，不能太大。TLC操作方便，高效，在有機合成中主要有以下作用：
1、反應原料投料前判斷原料純度。
2、監控反應反應是否有新點生成。
原料是否反應完全。
3、後處理通過TLC預先判斷後處理（如淬滅、中和）方法的合理性，例如：是否破壞產物。
萃取、結晶等後處理過程的監測。
4、選擇柱層析的洗脫條件待分離組分Rf值在0.2左右的展開劑比例為洗脫劑的合適值。
5、初步判斷反應產物的純度5%以上的有紫外吸收的雜質通常在TLC中都可以觀測。
TLC yeshiyixiangkaoyanjishudefenxifangfa，zaishiyongbocengbandeguochengzhong，womentongchanghuiyudaoyixiewenti，xiaobianjinxinglezongjiebinggeichuleyixiejiejuedefangfa，gongdajiacankao：
（一） 官能團轉化與展開劑極性變化關係官能團轉化1，極性增大：RNO2→NH2RNHBn (Boc, Cbz)→RNH2RX→RCNRCHO（R-X）→CH2OH2，極性減小：R-OH→R-X (Cl, Br, I)RCOOH→RCO2R RC-NH2→RC-H隨著反應官能團的轉化，當產物極性變化比較大，在TLC中Rf＜0.2時，為了準確判斷，展開劑極性需要適當增大，反之，當極性變小Rf＞0.6，展開劑極性需要適當調小。展開劑配比需要結合官能團的極性大小去調試,具體調試方法見下圖：
展開劑
上圖，展開劑體係調試
常用一般極性的體係：PE/EA。常用極性較大的體係：DCM/CH3OH。當常用體係對某些化合物分離度不明顯時，某些溶劑間按一定比例混合可能會有比較好的分離效果：PE/DCM,PE/Acetone,Toluene/Acetone,DCM/EA,EA/CH3OH等。PS：有些反應產物極性變化很小（RCH3→RCH2X），可能需要單向多次展開。
小編給大家整理常見官能團與溶劑極性變化關係：
附1：常用官能團極性比較烷烴（-CH3,-CH2-）＜烯烴（-CH=CH-）＜醚類（-OCH3，-OCH2-）＜硝基化合物（-NO2）＜二甲胺（-N(CH3)2）＜脂類（-COOR）＜酮類（-CO-）＜醛類（-CHO）＜硫醇（-SH）＜胺類（-NH2）＜酰胺（-NHCOCH3）＜醇類（R-OH）＜酚類（Ar-OH）＜羧酸類（-COOH）。
附2：常用展開劑極性順序石油醚＜甲苯＜二氯甲烷＜乙醚＜乙酸乙酯＜正丁醇＜四氫呋喃＜二氧六環＜丙酮＜甲醇＜乙腈＜水。（二）拖尾現象及解決方法
TLC點板的點應該是圓形，但是實際操作過程中經常會到如上圖2的情況，原因分析：
1、樣品過載首先考慮樣品濃度過大，薄層板過載，可嚐試降低樣品濃度或減少上樣量。
2、矽膠與樣品吸附能力較強
矽膠與酸性或堿性化合物之間吸附能力較強，在TLC過程中可能存在分子和離子兩種狀態，使得吸附不完全，造成拖尾現象。（1）酸性化合物：在分析酸類化合物，需要在展開劑中加入0.1%-0.5%醋酸或者甲酸，可以增強展開劑的極性，也可以抑製羧酸的電離。（2）堿性化合物：與酸類化合物原理類似，在展開劑中加入0.1%-0.5%的氨水或者三乙胺（氨水比三乙胺好去除），還有一種方法就是選購樂研堿性矽膠板，分析板和製備板均有哦，也可以為您量身定製。
3、溶解度如圖6，樣品點呈長帶狀，很可能是由溶解度引起的：（1）樣品未完全溶解：點樣樣品一定要是溶液形式，若是難溶物，選擇大極性溶劑溶解，用吹風機（或者氮氣流）將溶劑吹幹後再展開。（2）展開劑對樣品的溶解性不好，可以通過更換展開劑的體係來改善：常用展開劑的溶劑之間可以混搭，不僅限於兩種，也可三種以上，具體條件要結合底物性質，各種搭配需要大家去嚐試；對於大極性化合物，如氨基酸類的，需要大極性展開劑，正丁醇/醋酸/水、異丙醇/氨水/水等。
4、矽膠板含水矽膠板長時間暴露在空氣中，容易吸潮，點樣展開後可能會有拖尾，這種情況，建議使用前用烘箱100℃活化10min。 文章來源：化學寶庫 藥物分析學社
