在(zai)操(cao)作(zuo)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)時(shi),有(you)沒(mei)有(you)為(wei)老(lao)是(shi)出(chu)現(xian)氣(qi)泡(pao)而(er)崩(beng)潰(kui)?有(you)沒(mei)有(you)為(wei)超(chao)聲(sheng)波(bo)震(zhen)蕩(dang)了(le)一(yi)個(ge)小(xiao)時(shi),流(liu)動(dong)相(xiang)還(hai)出(chu)現(xian)氣(qi)泡(pao),而(er)暈(yun)倒(dao)?有(you)沒(mei)有(you)為(wei)天(tian)氣(qi)晴(qing)好的時候沒出現氣泡,陰天、下雨天,同一瓶,出現了氣泡,而對自己的工作失去信心?
在操作高效液相色譜時,流動相出現氣泡,那整個工作就沒法進行了。
超聲波震蕩了一個小時的流動相,為什麼天氣晴好的時候沒出現氣泡,陰天、下雨天就會出現;是因為陰天、下雨天空氣氣壓下降,引起溶在流動相中的空氣過飽和(晴天時氣壓高還沒飽和),當高壓泵抽取流動相時,空氣析出,產生了氣泡。
超聲波震蕩了一個小時的流動相,為什麼裏麵還有空氣呢?這是由於在常壓下震蕩,驅趕空氣效果不行。
如果把裝流動相的瓶子進行抽真空,同時進行超聲波震蕩,效果會怎麼樣呢?效果非常好,隻要1min,流動相中的空氣差不多沒了;經過這樣驅逐空氣的流動相,陰天、下雨天使用也不會出現氣泡了;而且省時,不用動不動半小時、一小時超聲波震蕩;並且效果非常好。
由於氣泡的存在,會造成色譜圖上出現尖銳的噪聲峰,嚴重時會造成分析靈敏度下降;氣泡變大進入流路或色譜柱時會使流動相的流速變慢或不穩定,使基線起伏。
造成上述現象的主要原因有三條:
一是流動相溶液中往往因溶解有氧氣或混入了空氣而形成氣泡;
二是係統開始工作時未能將流路中的空氣驅趕幹淨;
三是在注入樣品時不注意混入了空氣。
而液相色譜儀在使用中,整個液路係統有兩個地方易產生氣泡!
1、泵頭吸液白管;2、檢測口流通池。
氣泡產生的原因大多數是因為:
溫度上升,壓力下降!溫度上升或柱溫上升,當接近試劑沸點時,試劑汽化產生氣泡,試劑中已含微小氣泡,因加熱變大而產生氣泡。
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氣泡產生原因及解決辦法
一、泵頭及吸液白管
1、泵頭
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2、吸液白管長氣泡。
a、xiyebaiguanjiechukongqibuweilouqi,chanshengkejianqipao,xiyebaiguanshichangyahefuyajiaobibianhuabuwei,qiloubiaoxianweidaqijinrubaiguannei,erbuyijiandaoguanneiyetilouchu。
處理方法:更換白管。
b、濾頭堵:濾頭堵使得液體流入濾頭的速度下降,泵強製吸液而產生真空氣泡。
判斷:拔掉濾頭不再長氣泡則是濾頭堵。
處理:A、30%硝酸水液超洗濾頭,20分鍾左右。B、水超洗濾頭,注意換水多超幾次。
c、流動相汽化產生氣泡。
尤其是夏天室溫高,沸點低的試劑易汽化,比如:乙酸,乙醚,氨水,石油醚等易於汽化。
處理:超聲,降室溫。
二、檢測流通池長氣泡
liutongchishiyijicunqipaodedifang,qiduijixianyingxiangjuda,liudongxiangliurusepuzhuhou,yaliyuelaiyuexiao,weixiaoqipaojiangzhujianchangda,erliutongchijiemianjiyuandayugangguanmianji,zeqipaozaichineiyichangda,qipaodetedianshichangdazaiwuwaiyadeqingkuangxia,hennansuoxiaodaogangguanneijingyixialiuchuliutongchi,suoyitajiucunzailechinei。chulifangfa:1、對於示差檢測器(示差檢測器池隻能耐幾個公斤壓力),隻能是反複衝洗斥資,舉高廢液瓶靠廢液管內液柱給池加一個微小反壓,所以這就靠成了示差池子排氣困難些,但無它法。
為了避免這類問題的出現,液相色譜實際分析過程中必須重視對流動相進行脫氣處理。
常用的脫氣方法有以下幾種:
1、吹氦脫氣法 使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣,在0.1Mpa壓力下,以約60ml/min流速通入流動相10-15min以驅除溶解的氣體。此法使用於所有的溶劑,脫氣效果較好,但在國內因氦氣價格較貴,本法使用較少;
2、加熱回流法 此法的脫氣效果較好;
3、抽真空脫氣法 此時可使用微型真空泵,降壓至0.05-0.07MPa即可除區溶解的氣體。顯然使用水泵連接抽濾瓶和G4微(wei)孔(kong)玻(bo)璃(li)漏(lou)鬥(dou)可(ke)一(yi)起(qi)完(wan)成(cheng)過(guo)濾(lv)機(ji)械(xie)雜(za)質(zhi)和(he)脫(tuo)氣(qi)的(de)雙(shuang)重(zhong)任(ren)務(wu)。由(you)於(yu)抽(chou)真(zhen)空(kong)會(hui)引(yin)起(qi)混(hun)合(he)溶(rong)劑(ji)組(zu)成(cheng)的(de)變(bian)化(hua),故(gu)此(ci)法(fa)適(shi)用(yong)於(yu)單(dan)一(yi)溶(rong)劑(ji)體(ti)係(xi)脫(tuo)氣(qi)。對(dui)多(duo)元(yuan)溶(rong)劑(ji)體(ti)係(xi)應(ying)預(yu)先(xian)脫(tuo)氣(qi)後(hou)再(zai)進(jin)行(xing)混(hun)合(he),以(yi)保(bao)證(zheng)混(hun)合(he)後(hou)的(de)比(bi)例(li)不(bu)變(bian);
4、超聲波脫氣法 它是目前實驗室使用最廣泛的脫氣方法,將配製好的流動相連同容器一起放入超聲波水漕中脫氣10-20min即可。該方法操作簡便,基本能滿足日常分析的要求;
5、在線真空脫氣法 把(ba)真(zhen)空(kong)脫(tuo)氣(qi)裝(zhuang)置(zhi)串(chuan)聯(lian)到(dao)儲(chu)液(ye)係(xi)統(tong)中(zhong),並(bing)結(jie)合(he)膜(mo)過(guo)濾(lv)器(qi),實(shi)現(xian)了(le)流(liu)動(dong)相(xiang)在(zai)進(jin)入(ru)輸(shu)液(ye)泵(beng)前(qian)的(de)連(lian)續(xu)真(zhen)空(kong)脫(tuo)氣(qi)。此(ci)法(fa)的(de)脫(tuo)氣(qi)效(xiao)果(guo)明(ming)顯(xian)優(you)於(yu)上(shang)述(shu)幾(ji)種(zhong)方(fang)法(fa),並(bing)適(shi)用(yong)於(yu)多(duo)元(yuan)溶(rong)劑(ji)體(ti)係(xi)。
其二,在液相色譜係統開始工作前,可以用注射器連接恒流泵的排空閥,抽入流動相,將流路中的空氣驅趕幹淨。
其三,在注入樣品前注意排出樣品注射器中的空氣。
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