（一）按照反應裝置的結構，自動生化分析儀主要分為流動式(Flow system)、分立式(Discrete system)兩大類。

 

1．流動式 指測定項目相同的各待測樣品與試劑混合後的化學反應在同一管道流動的過程中完成。這是第一代自動生化分析儀。

 

2．分立式 指各待測樣品與試劑混合後的化學反應都是在各自的反應杯中完成。其中有幾類分支。

 

(1)典型分立式自動生化分析儀。此型儀器應用最廣。

 

(2)離(li)心(xin)式(shi)自(zi)動(dong)生(sheng)化(hua)分(fen)析(xi)儀(yi)，每(mei)個(ge)待(dai)測(ce)樣(yang)品(pin)都(dou)是(shi)在(zai)離(li)心(xin)力(li)的(de)作(zuo)用(yong)下(xia)
，在(zai)各(ge)自(zi)的(de)反(fan)應(ying)槽(cao)內(nei)與(yu)試(shi)劑(ji)混(hun)合(he)，完(wan)成(cheng)化(hua)學(xue)反(fan)應(ying)並(bing)測(ce)定(ding)。由(you)於(yu)混(hun)合(he)，反(fan)應(ying)和(he)檢(jian)測(ce)幾(ji)乎(hu)同(tong)時(shi)完(wan)成(cheng)，它(ta)的(de)分(fen)析(xi)效(xiao)率(lv)較(jiao)高(gao)。

 

3．袋式自動生化分析儀是以試劑袋來代替反應杯和比色杯
，每個待測樣品在各自的試劑袋內反應並測定。

 

4．固相試劑自定生化分析儀(亦稱幹化學式自動分析儀) 是將試劑固相於膠片或濾紙片等載體上，每個待測樣品滴加在相應試紙條上進行反應及測定。操作快捷
、便於攜帶是它的優點。

 

(二)典型分立式自動生化分析儀基本結構

 

1．樣品(Sample)係統

 

樣品包括校準品、質控品和病人樣品。係統一般由樣品裝載
、輸送和分配等裝置組成。

 

樣品裝載和輸送裝置常見的類型有：

 

(1)樣品盤(Sample disk)，jifangzhiyangpindezhuanpanyoudanquanhuoneiwaiduoquan，danduanzhihuoyushijizhuanpanhuofanyingzhuanpanxiangtaohe，yunxingzhongyuyangpinfenpeibipeihezhuandong。youdecaiyonggenghuanshiyangpinpan，fengongzuohedaimingqu
，qizhongfangzhiduogehuxingyangpinjia(Sector)作轉載台，儀器在測定中自動放置更換，均對樣品盤上放置的樣品杯或試管的高度、直徑和深度有一定要求
，有的需專用樣品杯，有的可直接用采血試管。樣品盤的裝載數，以及校準品、質控品、常規樣品和急診樣品的裝載數，一般都是固定的。這些應根據工作需要選擇。

 

(2)傳動帶式或軌道式進樣 即試管架(Rack)不連續，常為10個一架，靠步進馬達驅動傳送帶，將試管架依次前移，再單架逐管橫移至固定位置
，由樣品分配臂采樣。

 

(3)鏈式進樣試管固定排列在循環的傳動鏈條上，水平移動到采樣位置
，有的儀器隨後可清洗試管。

 

分配加樣裝置大都由注射器、步進馬達或傳動泵、加樣臂和樣品探針等組成
，①注射器(syrine unit)。根據注射器直徑和活塞移動距離的多少

，定量吸取樣品或試劑。它的精度決定加樣的精度，一般可精確到1微wei升sheng。注zhu射she器qi漏lou液ye時shi，首shou先xian考kao慮lv是shi否fou探tan針zhen堵du塞sai
，其qi次ci是shi注zhu射she器qi活huo塞sai磨mo損sun等deng。有you的de加jia液ye係xi統tong采cai用yong容rong積ji型xing注zhu射she泵beng和he數shu控kong脈mai衝chong步bu進jin馬ma達da，提ti高gao精jing度du。②樣品探引(Probe)與yu加jia樣yang臂bi相xiang聯lian，直zhi接jie吸xi取qu樣yang品pin。探tan針zhen均jun設she有you液ye麵mian感gan應ying器qi，防fang止zhi探tan針zhen損sun傷shang和he減jian少shao攜xie帶dai汙wu染ran。有you的de設she有you阻zu塞sai檢jian測ce報bao警jing係xi統tong當dang探tan針zhen樣yang品pin中zhong的de血xue凝ning塊kuai等deng物wu質zhi阻zu塞sai時shi．儀yi器qi會hui自zi動dong報bao警jing衝chong洗xi探tan針zhen，並bing跳tiao過guo當dang前qian樣yang品pin

，對dui下xia一yi樣yang品pin加jia樣yang。有you的de還hai有you智zhi能neng化hua防fang撞zhuang裝zhuang置zhi遇yu到dao阻zu礙ai探tan針zhen立li即ji停ting止zhi運yun動dong並bing報bao警jing。即ji使shi如ru此ci，它ta仍reng是shi非fei正zheng規gui操cao作zuo時shi的de易yi損sun件jian。為wei了le保bao護hu探tan針zhen，除chu預yu先xian需xu要yao根gen據ju樣yang品pin容rong器qi的de高gao低di、最低液麵高度等進行設置外、，樣品容器的規格
、放(fang)置(zhi)以(yi)及(ji)液(ye)麵(mian)高(gao)度(du)等(deng)設(she)定(ding)條(tiao)件(jian)不(bu)得(de)隨(sui)意(yi)改(gai)變(bian)。在(zai)某(mou)些(xie)儀(yi)器(qi)上(shang)，采(cai)樣(yang)器(qi)和(he)加(jia)液(ye)器(qi)組(zu)合(he)在(zai)一(yi)起(qi)，加(jia)樣(yang)品(pin)和(he)加(jia)試(shi)劑(ji)或(huo)稀(xi)釋(shi)液(ye)一(yi)個(ge)探(tan)針(zhen)一(yi)次(ci)完(wan)成(cheng)。③加樣臂。連接探引
，在樣品杯(試劑瓶)和反應杯之間運動
，完成采樣和加樣(加試劑)。它的運動方式，與儀器工作效率及工作壽命有一定關係。④閥門用以決定液體流動方向。⑤稀釋係統。對樣品進行預稀釋
、過後稀釋或加倍，對標準原液係列稀釋等。不同儀器的稀釋方式有所差異，要注意識別。試劑係統亦有稀釋功能：

 

2.試劑(Reagent)係統一般由試劑儲放和分配加液裝置組成。

 

(1)試劑倉常與試劑轉盤結合在起。多數儀器將試劑倉設為冷藏室，以提高在線試劑的穩定期。

 

(2)分配加液裝置(Dispense unit)。與樣品係統的類似。，試劑探針常常可以對試劑預加溫，雙試劑係統的試劑2(R2)探針起始量宜較下
，以便配合不同R1/R2比例的試劑。

 

(3)試劑瓶(Bottle)。有不同的形狀及大小規格。如 COBAS MIRA PLUS儀有4、10、15、35ml等規格，瓶底呈凹形，OLYMPUS Au600儀有30和60ml兩種；日立7060儀有20、50

、100ml三種等規格。應根據工作量和試劑規格．考慮試劑瓶殘留死體積和更換頻率，合理選用。獨特設計的卡式試劑盒，體積小

，防蒸發
，方便儲存。

 

(4)配套試劑常有條形碼
，儀器設有條形碼檢查係統，可對試劑的種類、批號
、存量、有效期和校準曲線等貨剌
，進行核對校驗
，如BeckmanCX7等。

 

(5)試劑瓶蓋自動開關係統，更有利於試劑保存。有的儀器可在運行中添加

，更換試劑，有的則須在暫停狀態進行。

 

3.條形碼(Barcode)識讀係統

 

一般由掃描係統、信號整形和譯碼器三部分組成。掃描係統以光源掃射黑條白空相間的條碼符號由於條和空對光的反射不同
、不同寬窄的條符反射光持續時間不同
，產生強度不同的反射光．再經光電轉換元件接收並轉換成相應強度的電信號
，最後通過信號整形

，由譯碼器解譯。係統自動識別樣品架及樣品編號識別試劑
、校準品及其批號、失效期
，有的並可識別校驗校準曲線等信息。

 

實驗室常用條形碼類型有CODE 39、CODE 128
、2 of 5 Standard、Interleaved2of 5等。要自編樣品條形碼需要條形碼輸入器，條形碼閱讀係統與條形碼要匹配。已有全自動試管分配暨條形碼粘貼準備係統。

 

4．反應係統

 

(1)反應盤裝載一係列反應比色杯（Cuvettes）,多為轉盤形式。反應測定過程中按固定程序，在加樣臂
、加液臂
、攪拌棒、光(guang)路(lu)和(he)清(qing)洗(xi)裝(zhuang)置(zhi)之(zhi)間(jian)轉(zhuan)動(dong)。有(you)的(de)儀(yi)器(qi)在(zai)反(fan)應(ying)杯(bei)中(zhong)完(wan)成(cheng)反(fan)應(ying)後(hou)再(zai)吸(xi)入(ru)比(bi)色(se)杯(bei)比(bi)色(se)，現(xian)在(zai)更(geng)常(chang)見(jian)反(fan)應(ying)和(he)檢(jian)測(ce)同(tong)在(zai)比(bi)色(se)杯(bei)中(zhong)進(jin)行(xing)，效(xiao)率(lv)更(geng)高(gao)，尤(you)其(qi)適(shi)於(yu)連(lian)續(xu)監(jian)測(ce)法(fa)。比(bi)色(se)杯(bei)多(duo)采(cai)用(yong)硬(ying)質(zhi)石(shi)英(ying)玻(bo)璃(li)、硬質玻璃
、無紫外光吸收的丙烯酸塑料等，使用壽命不一。Dimension係(xi)列(lie)的(de)比(bi)色(se)杯(bei)在(zai)機(ji)器(qi)內(nei)自(zi)動(dong)製(zhi)造(zao)，自(zi)動(dong)封(feng)口(kou)，免(mian)衝(chong)洗(xi)
，無(wu)汙(wu)染(ran)。流(liu)動(dong)池(chi)式(shi)主(zhu)要(yao)在(zai)小(xiao)型(xing)分(fen)析(xi)儀(yi)用(yong)。容(rong)積(ji)一(yi)般(ban)幾(ji)十(shi)微(wei)升(sheng)，但(dan)抽(chou)液(ye)管(guan)道(dao)占(zhan)用(yong)較(jiao)多(duo)反(fan)應(ying)液(ye)
，多(duo)樣(yang)品(pin)連(lian)續(xu)使(shi)用(yong)，增(zeng)加(jia)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)機(ji)會(hui)。

 

蠕動泵(Pump)。banzidongshenghuayixuyaorudongbengchouxifanyingyejinrenliudongbisechizuoceding。yaoqiudingqiduirudongbengxiaozhun，jitongguoxirendingliangdeshuilaijianyanbengdexiyeliangshifouzhunque。yibanjunsheyoubengxiaozhungongneng。

 

(2)混合裝置(Mixing unit) 如采用多頭回旋攪拌棒(二頭雙清洗式攪拌係統)。攪拌棒常具特氟隆不粘塗層，避免液體粘附。

 

(3)溫控裝置生化分析儀通過恒溫控製裝置來保持孵育溫度的調控和恒定也是由計算機來控製的，理想的孵育溫度波動應小於±01℃。保持恒溫的方式有三種。①空氣浴恒溫：即在比色杯與加熱器之間隔有空氣。空氣浴恒溫的特點是方便、速度快、不需要特殊材料
，但穩定性和均勻性較水浴稍差。羅氏(Roche)的cobas和0lympus Au2700係統采用的就是空氣浴恒溫模式。②水浴循環式：即(ji)在(zai)比(bi)色(se)杯(bei)周(zhou)圍(wei)充(chong)盈(ying)有(you)水(shui)



，加(jia)熱(re)器(qi)控(kong)製(zhi)水(shui)的(de)溫(wen)度(du)。水(shui)浴(yu)恒(heng)熱(re)的(de)特(te)點(dian)是(shi)溫(wen)度(du)恒(heng)定(ding)，但(dan)需(xu)特(te)殊(shu)的(de)防(fang)腐(fu)劑(ji)以(yi)保(bao)證(zheng)水(shui)質(zhi)的(de)潔(jie)淨(jing)，且(qie)要(yao)定(ding)期(qi)更(geng)換(huan)循(xun)環(huan)水(shui)。日(ri)立(li)係(xi)統(tong)生(sheng)化(hua)分(fen)析(xi)儀(yi)采(cai)用(yong)的(de)即(ji)是(shi)水(shui)浴(yu)循(xun)環(huan)恒(heng)溫(wen)裝(zhuang)置(zhi)。⑧恒溫液循環間接加熱式：結構原理是在比色杯周圍流動著一種特殊的恒溫液(具無味、無汙染
、惰性、不蒸發等特點)。bisebeihehengwenyezhijianyoujixiaodekongqixiafeng，hengwenyetongguojiarexiafengdekongqidadaohengwen
，qiwenduwendingxingyouyuganshi，heshuiyushixunhuanshixiangbibuxuyaoteshubaoyang。

 

5．清洗(Wash)係統

 

探針和攪拌棒采用激流式等方式自動衝洗。清洗裝置一般由吸液針、tuyezhenhecashishuazucheng。qingxigongzuoliuchengweixichufanyingyixiyuyizhuruchunshuiyixiganyicagan。qingxiyeyoujianxinghesuansuiliangzhong。yibanshuolai，zaixichufanyingyehou，yiqixianyongjianxingyechongxi
，zaiyongsuanxingyechongxi，zuihouyongqulizishuichongxisanbian。cashishuadegongnengshixiqubeibishanggualindeshui
，shuatineibuyoufuxizhuangzhi。shiyongjinchengzhongyaozhuyicashishuashifoumosun。

 

值得注意的是，對於常規衝洗還不能清除交叉汙染(carry—over)的(de)實(shi)驗(yan)要(yao)特(te)別(bie)處(chu)理(li)，以(yi)減(jian)少(shao)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)或(huo)攜(xie)帶(dai)汙(wu)染(ran)。例(li)如(ru)，膽(dan)固(gu)醇(chun)測(ce)定(ding)試(shi)劑(ji)中(zhong)的(de)膽(dan)酸(suan)鹽(yan)對(dui)血(xue)清(qing)總(zong)膽(dan)汁(zhi)酸(suan)的(de)測(ce)定(ding)有(you)幹(gan)擾(rao)
，在(zai)消(xiao)除(chu)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)的(de)程(cheng)序(xu)中(zhong)，可(ke)輸(shu)入(ru)程(cheng)序(xu)，指(zhi)令(ling)總(zong)膽(dan)汁(zhi)酸(suan)不(bu)在(zai)測(ce)試(shi)膽(dan)固(gu)醇(chun)的(de)比(bi)色(se)杯(bei)中(zhong)進(jin)行(xing)測(ce)定(ding)

，如(ru)不(bu)能(neng)避(bi)開(kai)
，儀(yi)器(qi)則(ze)對(dui)比(bi)色(se)杯(bei)進(jin)行(xing)特(te)別(bie)衝(chong)洗(xi)，防(fang)止(zhi)發(fa)生(sheng)交(jiao)叉(cha)汙(wu)染(ran)。

 

衝chong洗xi水shui的de水shui溫wen自zi動dong控kong製zhi到dao與yu恒heng溫wen反fan應ying槽cao溫wen度du相xiang近jin，保bao證zheng反fan應ying係xi統tong的de恒heng溫wen
，並bing增zeng加jia去qu汙wu力li。急ji診zhen測ce定ding後hou采cai用yong針zhen對dui性xing清qing洗xi，似si乎hu比bi采cai用yong固gu定ding的de全quan麵mian清qing洗xi程cheng序xu更geng有you效xiao率lv更geng經jing濟ji。耗hao水shui量liang儀yi器qi間jian相xiang差cha較jiao大da。

 

ABBOTT AEROSET 自動生化分析儀等係統具有自動清洗功能(smart wash)和最佳標本順序選擇功能(OSS)。即儀器根據試劑或樣品間交叉汙染的項目組合
，自動改變檢測順序，避免互有影響的分析項目
；確實無法回避時，則采用選定的特殊清洗劑作自動清洗。

 

6．比色係統

 

(1)光源多數采有鹵素燈，工作波長為325～800nm。鹵素燈的使用壽命較短，一般隻有1 000～l 500小時。當燈的發光強度不夠時，儀器會自動報警，應及時更換，部分生化分析儀采用的是長壽命的氙燈

，24小時待機可工作數年，工作波長285-750nm。

 

(2)比色杯 自動生化分析儀的比色杯也是反應杯。比色杯的光徑0.5～0.7 cm不等
，通常為石英或優質塑料。光徑小的省試劑，當比色杯光徑小於1 cm時，部分儀器可自動校正為1cm。生化分析儀的比色杯自動衝洗裝置在儀器完成比色分析後做自動反複衝洗

、吸幹的動作，比色杯在自動檢查合格後繼續循環使用。要及時更換不合格的比色杯。如采用的是石英比色杯，比色杯要定期檢查清洗。

 

(3)單色器與檢測器各類自動生化分析儀應用的是可見一紫外吸收光譜法
，即監測200-700nm光區某特定波長下發色基團吸光度的變化，輔以微機軟件係統的計算來完成測定。可見一紫外吸光譜定量的基礎是Lamber—Beer定律。

 

傳統的分光度測定普遍采用前分光，即在光源燈和樣品杯之間先要用濾光片、棱鏡或光柵分光
，通過可調的狹縫，取得與樣品“互補”的單色光之後，照射到樣品杯，再用光電池或光電管作為檢測器，測定樣品對單色光的吸收量(吸光度)。

 

而現代大多生化分析儀采用後分光測量技術。後分光測定：將一束白光(混合光)xianzhaodaoyangpinbei，ranhouzaiyongguangzhafenguang
，tongshiyongyiliefaguangerjiguanpaizaiguangzhahoumianzuoweijianceqi。houfenguangdeyoudianshibuxuyidongyiqibisexitongzhongderenhebujian
，ketongshixuanyongshuangbochanghuoduobochangjinxingceding
，zheyangkejiangdibisedezaosheng
，tigaofenxidejingqueduhejianshaoguzhanglv。

 

生sheng化hua儀yi的de單dan色se器qi即ji分fen光guang裝zhuang置zhi，有you幹gan涉she濾lv光guang片pian和he光guang柵zha分fen光guang兩liang類lei。幹gan涉she濾lv光guang片pian有you插cha入ru式shi和he可ke旋xuan轉zhuan的de圓yuan盤pan式shi兩liang種zhong。插cha入ru式shi就jiu是shi將jiang需xu用yong的de濾lv光guang片pian插cha入ru濾lv片pian槽cao中zhong
，圓yuan盤pan式shi是shi將jiang儀yi器qi配pei備bei的de濾lv光guang片pian都dou安an裝zhuang在zai圓yuan盤pan中zhong
，使shi用yong時shi旋xuan轉zhuan至zhi所suo需xu濾lv光guang片pian處chu即ji可ke。幹gan涉she濾lv光guang片pian價jia格ge便bian宜yi，但dan易yi變bian潮chao黴mei變bian，從cong而er影ying響xiang檢jian測ce結jie果guo的de準zhun確que性xing，半ban自zi動dong生sheng化hua分fen析xi儀yi多duo采cai用yong此ci種zhong濾lv光guang片pian。

 

光柵分光可分為全息反射式光柵和蝕刻式凹麵光柵兩種。前者是在玻璃上覆蓋一層金屬膜後製成
，有一定程度的相差易被腐蝕
；後者是將所選波長固定地刻製在凹麵玻璃上，耐磨損
、抗腐蝕、無相差。全自動生化分析儀多采用光柵分光。

 

7．程序控製係統

 

計算機是自動生化分析儀的大腦
，標本、shijidezhujiaheshibie，tiaomadeshibie
，hengwenkongzhi
，chongxikongzhi


，jieguodayin，zhikongdejiankong，yiqigezhongguzhangdebaojingdengdoushiyoujisuanjikongzhiwancheng。yiqiyidaishengguoyidai，zidonghuachengduyuelaiyuegao

，youdeyiqishenzhikeyiwanchengbufenrichangbaoyangchengxu。zidongshenghuafenxiyishujuchuligongnengriquwanshan，ru：反應進程中吸光度，各種測定方法，各種校準方法室內質控結果的統計等，生化儀都可進行處理。計算機還可以調看病人的數據、儀器的性能指標、儀器的運行狀態等。自動生化儀中的質控和病人結果還可通過儀器計算機與實驗室信息係統(LIS)的對接進行網絡管理。

 

程序控製器是係統的硬件部分。它主要包括：

 

(1)微處理器和主機電腦。用於儀器各個單元和總體控製
，應具有程控操作、故障診斷、多種數據處理和儲存等強大功能。一般根據儀器功能的需要和電腦硬件市場的主流產品來配置。

 

(2)顯示器(CRT monitor unit)。通常用鍵盤、鼠標、觸摸屏等方式進行操作。

 

(3)係統及配套軟件。多采用Windows-NT或windows界麵
，具全圖形化設計，多菜單選擇
，信息導引，故障報警
，幫助提示，人機“對話”
，方便直觀

，不少儀器有即時反應曲線顯示。

 

(4)通過Rs 232 c等數據接口與其他計算機
、打印機等設備傳輸數據。具人工智能雙向通訊係統(Host query)，儀器可直接自行向主電腦詢問病人／樣品基本資料及檢測項目。有的具遠程通訊及監控功能
，可遙控遠處測試及維修檢查

，實現網絡工作。

 

自zi動dong生sheng化hua分fen析xi儀yi均jun采cai用yong程cheng序xu控kong製zhi的de自zi動dong分fen析xi。分fen析xi程cheng序xu一yi經jing確que定ding
，工gong作zuo時shi隻zhi要yao簡jian單dan地di輸shu入ru測ce定ding項xiang目mu或huo編bian碼ma，儀yi器qi即ji可ke按an編bian製zhi程cheng序xu自zi動dong完wan成cheng測ce定ding、計算和報告。具體的控製程序因儀器而異
，一般分為固定程序和自編程序兩種。固定程序為儀器廠家預先設定，常與指定試劑配套
；youdebunenggenggai，youdeyekeyouyonghuxiugai。tayupeitaoshijiyitongshiyongshi，jifangbiangongzuo，zhiliangyebijiaokekao

，danchengbenjiaogao。zibianchengxulinghuoshiyong，bianyukaifaxinxiangmu，qiangtiaochengxudelinghuoxing。biru，chengpicedingguochengzhongyingkesuishicharujizhenbiaobencedingerbudaluanyuanyouchengxu；單個急診標本測定操作簡捷
、消耗少
，可靈活預稀釋或重複測定。

 

二、儀器一般工作流程

 

生化分析儀的正確應用
，隻是掌握了測定技術原理還不夠，還需要對具體儀器的工作流程及測定計算方法有足夠的了解。

 

(一)一般工作流程

 

工作流程可以通過儀器的測定周期來考察。重點關注比色杯空白讀數點(CB)
、加樣品點（S）、各試劑加液點(R1
、R2
、……)、試劑空白讀數點(RB)
、各測定讀數點(P)
、gedianshijianjiangejizhouqizongshijiandeng。meigeyiqiyibandouzaifanyingzhuanpandegudingweizhihefanyingcedingzhouqidegudingshijianshezhiyangpinshijihexishidejiayewei，yijicedingdushudian。ruHITACHI 7170在P1到P34周期為10分鍾時，PO前加樣品，Rl在Pl前，R2在P5和P6間，R3在P16和P17間，R4在：P33和P34間。

 

(二)數據處理計算方法

 

儀yi器qi在zai各ge個ge吸xi光guang度du讀du數shu點dian讀du取qu的de吸xi光guang度du數shu據ju，並bing不bu一yi定ding都dou納na人ren濃nong度du計ji算suan。儀yi器qi往wang往wang根gen據ju儀yi器qi定ding義yi和he操cao作zuo者zhe設she定ding的de要yao求qiu，對dui吸xi光guang度du原yuan始shi數shu據ju作zuo計ji算suan處chu理li
，轉zhuan換huan成cheng所suo謂wei反fan應ying數shu據ju
，再zai按an係xi數shu或huo公gong式shi作zuo濃nong度du計ji算suan。舉ju例li如ru下xia：

 

1．HITACH 7170的終點法測定點(A )吸光度計算為(AX+AX－1)／2。實際吸光度=吸光度數據×10 000。

 

2．0LYHPUS AU 600試劑空白數據：P0點試劑空白(RB)=P0點吸光度一比色杯水空白(wB)；任一測定點試劑空白(RB )。該點吸光度一比色杯水空白(WB)。

 

3．Monarch 1 000兩點終點法的反應數據。(終點測定吸光度一終點空白吸光度)一(始點測定吸光度一始點空白吸光度)。

 

4．AU 600的終點法(帶試劑空白，END法)的反應數據=終點吸光度一P0點吸光度(試劑空白，RB)。終點法(不帶試劑空白，END)．法)的反應數據=終點吸光度-比色杯水空白(WB)。

 

5．Au 600的兩點法(自身空白)的反應數據=[加第二試劑後測定點讀數一P0點讀數]一[加第二試劑前測定點讀數一PO點讀數]。

 

三、主要操作程序

 

(一)儀器運行前操作程序

 

主要進行儀器的基本設置：

 

l．試驗項目設置對試驗名稱

、編碼
，試驗組合(Profile)、試驗輪次(Round)，必要時包括試驗順序等設置。

 

2．各試驗的參數設置包括試驗間比值
、結果核對等參數的設定。

 

3．劑設置根據有關試驗參數
，設置各試驗的試劑位
、試劑瓶規格，必要時設定試劑批號
、失效期等。

 

4．校準品設置對校準品的位置、濃度和數量等進行設置。

 

5．質控設置 根據質控要求。設置質控物個數，質控規則，質控項目及相應質控參數等。

 

6．樣品管設置 包括樣品管類型
，殘留液高度（死體積），識別方式等設置。

 

7．其他設置對數據傳輸方式
、結果報告格式

、複查方式及複查標準等設置。

 

(二)常規操作程序

 

開機(預熱、保養)-設置開始條件(日期時間索引
、輪次
、樣品起始號等)-根據需要，申請校準
、質控和病人測定項目(包括架號、杯號或順序號。測定中可繼續申請)_裝載校準品、質控物和病人標本-裝載試劑-核對儀器起始狀態（未應用條碼係統，采用順序識別樣品時，尤其要核對測定起始編號是否與樣品架號和申請號相符）-定標和質控測定-檢查定標和質控結果-病人標本測定-測定過程監控（試劑檢查，觀察分析結果
，編輯校正）-數據傳遞（打印報告，向檢驗管理係統傳輸
，包括工作量統計、財務統計、病人情況追蹤
、質控分析等)。測定後保養。

 

(三)測定結果檢查分析

 

1．要了解和熟悉儀器的各種警示符號的含義與作用在正確設定參數的前提下
，利用各種警示符能提高我們發現問題和解決問題的效率。

 

2．要熟悉和靈活運用儀器的相關操作屏(界麵) 如：用反應過程監測(Reaction Monitor)，觀察反應時間進程曲線；用校準追蹤(Calibration Trace)回顧分析校準曲線；利用統計(Statistics)了解不同日期段病人測定均值及數據分析；運用分析數據編輯(Data Edit)察看和校正測定數據。

 

3．校準的檢查要充分利用儀器設置的功能
，監測校準曲線圖形
、各校準點吸光度值(不能忽略試劑空白值及空白速率值)、計算K值等的波動情況，以及與以往的比較。必要時
，應進一步檢查反應時間進程曲線。必須結合質控數據來把握實驗條件。

 

4．病bing人ren結jie果guo的de檢jian查zha除chu了le目mu測ce觀guan察cha或huo用yong血xue清qing指zhi數shu了le解jie標biao本ben性xing狀zhuang，注zhu意yi和he了le解jie臨lin床chuang資zi料liao及ji診zhen斷duan外wai，學xue會hui分fen析xi反fan應ying時shi間jian進jin程cheng曲qu線xian及ji數shu據ju是shi重zhong要yao的de基ji本ben功gong。

 

四、基本測定方法

 

(一)終點法(End point method)

 

根據反應達到平衡時反應產物的吸收光譜特征及其吸光度大小，對物質進行定量分析的方法。對一般化學反應來說，反應完全(或正、逆反應動態平衡)、反應產物穩定時為反應終點。對抗原一抗體反應來說

，是抗原和抗體完全反應
、形成最大且穩定的免疫複合物時為終點。在反應時間進程曲線上為與x軸平行線區段。在測定計算方式上，一般分為一點法和兩點法兩種。

 

1．一點法(One Point) 以試劑和樣品混合之前的空氣空白(GB)、水空白(WB)或試劑空白(RB)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)值(zhi)為(wei)測(ce)定(ding)計(ji)算(suan)基(ji)點(dian)，以(yi)反(fan)應(ying)終(zhong)點(dian)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)讀(du)數(shu)減(jian)去(qu)空(kong)白(bai)讀(du)數(shu)，得(de)到(dao)反(fan)應(ying)吸(xi)光(guang)度(du)。通(tong)過(guo)與(yu)相(xiang)同(tong)條(tiao)件(jian)下(xia)校(xiao)準(zhun)液(ye)反(fan)應(ying)吸(xi)光(guang)度(du)的(de)比(bi)較(jiao)

，求(qiu)得(de)測(ce)定(ding)結(jie)果(guo)。常(chang)與(yu)一(yi)點(dian)校(xiao)準(zhun)法(fa)配(pei)合(he)使(shi)用(yong)，即(ji)采(cai)用(yong)一(yi)個(ge)校(xiao)準(zhun)濃(nong)度(du)，校(xiao)準(zhun)曲(qu)線(xian)通(tong)過(guo)零(ling)點(dian)且(qie)成(cheng)線(xian)性(xing)。也(ye)應(ying)用(yong)多(duo)點(dian)校(xiao)準(zhun)。

 

2．兩點終點法(Two Point End)即終點一始點法 以yi試shi劑ji和he樣yang品pin混hun合he之zhi後hou的de某mou一yi時shi間jian點dian作zuo為wei始shi點dian
，以yi反fan應ying終zhong點dian的de吸xi光guang度du讀du數shu減jian去qu始shi點dian讀du數shu。一yi定ding條tiao件jian下xia可ke降jiang低di樣yang品pin對dui反fan應ying或huo反fan應ying本ben身shen的de特te異yi性xing於yu擾rao(主要指色度幹擾)。常采用雙試劑，多以加R2前某一點作測定始點；某些情況下，也可以加R2後一點作測定始點。若使用單試劑
，主反應啟動太快或儀器起始讀數點受限時難以運用。

 

固定時間法(Fixed Method)與兩點終點法的區別隻是在：測定讀數的末點不在反應平衡區段
，而是根據方法學選擇。如血清肌酐(苦味酸法)測定。

 

3．三點終點法 即雙終點法，在一個通道內一次進行兩項反應相關的終點法測定。比如同測遊離脂肪酸和甘油三酯。某些儀器(如HITACHI係列)設置此方法。

 

(二)連續監測法(Continuous monitoring method)

 

又稱速率法(Rate Assay)。即連續監測反應過程，根據所測定的產物生成或底物消耗的速度進行定量分析的方法。在反應時間進程曲線上為反應呈恒速區段(斜率保持不變)，常用於酶活性線性反應期測定。

 

1．連續監測法即零級反應速率法，亦稱斜率法。在較長的反應時間區段內(至少90-120秒)，每隔一定時間(常為2~30秒)讀取一次吸光度值，至少讀取4點
，得到3個△A
；一般將連續多次讀數作最小二乘法處理，讀數間隔時間太短的作帶速率時間(TR)多點法處理
，均取線性反應部分的讀數
，求出單位時間內的反應速率△A/min。此法必須以零級反應為測定計算的基礎，因為隻有在零級反應下
，單位時間內的吸光度變化(反應速率△A/min)caiyumeihuolichengzhengbi。cifaxiangduijianshaolefenxiwucha
，dadatigaolefenxisuduhezhunquexing。danshi，banzidongshenghuafenxiyicaiyongdanyangpinlianxujiance，xiangdanghaoshi。yingyonglianxujiancefa，shouxianyingzhunbeixianxingfanweineidegao、中、低濃度的樣品，分別作反應時間進程曲線，了解不同濃度下反應全過程，兼顧確定延遲時間和線性監測期。

 

2．兩點速率法即所謂擬一級速率法。在反應中選取兩時問點t 1

、t 2，讀取吸光度A 1、A2，計算(A2-A1)，(t2-t1)=△A，△t。此方法與終點兩點法的區別主要有兩點：後一讀數點反應未達終點，以速率計算結果。它與連續監測法比較，缺點在於人為確定t 1、t 2，不定因素較多，不能保證反應在t 1-t 2期間呈線性
，影響結果準確性；應在常規測定前，先做預試驗來確定線性時間段。若在選擇的時間段內反應不成線性(如零級反應期短，儀器無法設置或測定)，則隻能改用終點法。優點在於方法簡單

；酶活力較低、測定吸光度值較小時，可增加測定時間段而不受儀器連續監測時間點的局限，減少讀數誤差。

 

3．速率B法在一個通道內一次進行兩項反應相關的速率法測定。它既可以是兩項試驗測定
，也可用於幹擾或／及樣品空白自動補償0後一用途的原理是：利用儀器的微機自動處理，在第一反應(幹擾反應)一直維持線性的前提下，可以從第二反應(主反應)速率中扣除第一反應速率的延續影響。如用於消除膽紅素轉化為膽綠素吸光度下降、對肌酐苦味酸法測定的負幹擾等。某些儀器(如HITACHI係列)設置此方法。

 

(三)空白(blank)校正

 

zaifenguangguangdufazhong
，changliyongkongbairongyelaitiaojieyiqidexiguangdulingdian
，huoyonglaidixiaomouxiecedingdeganraoyinsu。zaishenghuafenxiyicedingzhong
，chulecaiyongshuanghuoduobochang、兩liang點dian法fa等deng排pai除chu背bei景jing幹gan擾rao外wai，常chang要yao運yun用yong專zhuan門men空kong白bai測ce定ding，以yi便bian從cong樣yang品pin測ce定ding吸xi光guang度du中zhong扣kou除chu其qi影ying響xiang。正zheng確que選xuan擇ze空kong白bai校xiao正zheng，對dui提ti高gao準zhun確que度du起qi重zhong要yao作zuo用yong。

 

1．試(shi)劑(ji)空(kong)白(bai)一(yi)般(ban)在(zai)方(fang)法(fa)類(lei)型(xing)和(he)校(xiao)準(zhun)模(mo)式(shi)中(zhong)，即(ji)分(fen)為(wei)有(you)或(huo)無(wu)試(shi)劑(ji)空(kong)白(bai)兩(liang)大(da)類(lei)。試(shi)劑(ji)空(kong)白(bai)單(dan)獨(du)測(ce)定(ding)或(huo)與(yu)校(xiao)準(zhun)配(pei)合(he)測(ce)定(ding)
，並(bing)需(xu)預(yu)選(xuan)裝(zhuang)載(zai)去(qu)離(li)子(zi)水(shui)樣(yang)品(pin)杯(bei)或(huo)試(shi)劑(ji)空(kong)白(bai)架(jia)。校(xiao)準(zhun)或(huo)病(bing)人(ren)樣(yang)品(pin)的(de)各(ge)測(ce)定(ding)點(dian)吸(xi)光(guang)度(du)
，均(jun)要(yao)扣(kou)除(chu)相(xiang)應(ying)測(ce)定(ding)點(dian)的(de)試(shi)劑(ji)空(kong)白(bai)吸(xi)光(guang)度(du)或(huo)空(kong)白(bai)速(su)率(lv)值(zhi)。無(wu)試(shi)劑(ji)空(kong)白(bai)的(de)方(fang)法(fa)，多(duo)直(zhi)接(jie)以(yi)反(fan)應(ying)杯(bei)的(de)水(shui)空(kong)白(bai)作(zuo)為(wei)測(ce)定(ding)基(ji)準(zhun)值(zhi)。

 

在(zai)不(bu)少(shao)儀(yi)器(qi)中(zhong)

，試(shi)劑(ji)空(kong)白(bai)測(ce)定(ding)類(lei)似(si)校(xiao)準(zhun)測(ce)定(ding)，並(bing)非(fei)在(zai)病(bing)人(ren)樣(yang)品(pin)測(ce)定(ding)時(shi)實(shi)時(shi)測(ce)定(ding)。所(suo)以(yi)，要(yao)注(zhu)意(yi)它(ta)的(de)測(ce)定(ding)頻(pin)率(lv)
，避(bi)免(mian)因(yin)試(shi)劑(ji)批(pi)號(hao)或(huo)質(zhi)量(liang)的(de)變(bian)化(hua)造(zao)成(cheng)試(shi)劑(ji)空(kong)白(bai)的(de)改(gai)變(bian)引(yin)起(qi)的(de)計(ji)算(suan)誤(wu)差(cha)。

 

2.樣品空白 主要為了消除樣品本身混濁或色度的幹擾。常采用空白通道法
，測定校正結果=顯色反應通道結果-空白通道結果。多數儀器須另外占用測定通道，分析速度減半，但去幹擾的準確性應高於兩點終點