分子生物學操作中會涉及一係列儀器,使用不當導致實驗失敗、減(jian)少(shao)儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)壽(shou)命(ming)或(huo)損(sun)壞(huai)儀(yi)器(qi)。因(yin)此(ci)在(zai)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)前(qian)細(xi)致(zhi)地(di)了(le)解(jie)各(ge)種(zhong)儀(yi)器(qi)的(de)使(shi)用(yong)方(fang)法(fa)及(ji)注(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang),是(shi)使(shi)後(hou)繼(ji)實(shi)驗(yan)事(shi)半(ban)功(gong)倍(bei)的(de)一(yi)個(ge)必(bi)要(yao)準(zhun)備(bei)。
一、冷凍離心機
低溫分離技術是分子生物學研究中必不可少的手段。基因片段的分離、酶mei蛋dan白bai的de沉chen澱dian和he回hui收shou以yi及ji其qi它ta生sheng物wu樣yang品pin的de分fen離li製zhi備bei實shi驗yan中zhong,都dou離li不bu開kai低di溫wen離li心xin技ji術shu,因yin此ci低di溫wen冷leng凍dong離li心xin機ji已yi成cheng為wei分fen子zi生sheng物wu學xue研yan究jiu中zhong必bi需xu的de重zhong要yao工gong具ju。
使用方法:
1.離心機應放置在水平堅固的地板或平台上,並力求使機器處於水平位置以免離心時造成機器震動。
2.打開電源開關,按要求裝上所需的轉頭,將預先以托盤天平平衡好的樣品放置於轉頭樣品架上(離心筒須與樣品同時平衡),關閉機蓋。
3.按功能選擇鍵,設置各項要求:溫度、速度、時間、加速度及減速度,帶電腦控製的機器還需按儲存鍵,以便記憶輸入的各項信息。
4.按啟動鍵,離心機將執行上述參數進行運作,到預定時間自動關機。
5.待(dai)離(li)心(xin)機(ji)完(wan)全(quan)停(ting)止(zhi)轉(zhuan)動(dong)後(hou)打(da)開(kai)機(ji)蓋(gai),取(qu)出(chu)離(li)心(xin)樣(yang)品(pin),用(yong)柔(rou)軟(ruan)幹(gan)淨(jing)的(de)布(bu)擦(ca)淨(jing)轉(zhuan)頭(tou)和(he)機(ji)腔(qiang)內(nei)壁(bi),待(dai)離(li)心(xin)機(ji)腔(qiang)內(nei)溫(wen)度(du)與(yu)室(shi)溫(wen)平(ping)衡(heng)後(hou)方(fang)可(ke)蓋(gai)上(shang)機(ji)蓋(gai)。
注意事項:
1.機體應始終處於水平位置,外接電源係統的電壓要匹配,並要求有良好的接地線。
2.開機前應檢查轉頭安裝是否牢固,機腔有無異物掉入。
3.樣品應預先平衡,使用離心筒離心時離心筒與樣品應同時平衡。
4.揮發性或腐蝕性液體離心時,應使用帶蓋的離心管,並確保液體不外漏,以免腐蝕機腔或造成事故。
5.擦拭離心機腔時動作要輕,以免損壞機腔內溫度感應器。
6.每次操作完畢應作好使用情況記錄,並定期對機器各項性能進行檢修。
7.離心過程中若發現異常現象,應立即關閉電源,報請有關技術人員檢修。
附:相對離心力與每分鍾轉速的換算
離li心xin機ji的de轉zhuan速su,在zai以yi前qian實shi驗yan資zi料liao中zhong一yi般ban以yi每mei分fen鍾zhong多duo少shao轉zhuan來lai表biao示shi。由you於yu離li心xin力li不bu僅jin為wei轉zhuan速su函han數shu,亦yi為wei離li心xin半ban徑jing的de函han數shu,即ji轉zhuan速su相xiang同tong時shi,離li心xin半ban徑jing越yue長chang,產chan生sheng的de離li心xin力li越yue大da。因yin此ci僅jin以yi轉zhuan速su表biao達da離li心xin力li是shi不bu夠gou科ke學xue的de,近jin年nian來lai主zhu張zhang用yong相xiang對dui離li心xin力li(RCF)來表示比較合理。現在國際資料中,已改用相對離心力來表示。
二、PCR擴增儀
目前各公司提供的PCR儀操作方法各有不同,按其操作說明進行操作。
值zhi得de提ti出chu的de是shi,在zai使shi用yong一yi定ding時shi期qi後hou,樣yang品pin孔kong的de實shi際ji溫wen度du與yu儀yi器qi顯xian示shi溫wen度du有you時shi會hui有you較jiao大da差cha異yi,應ying當dang請qing廠chang商shang的de技ji術shu支zhi持chi人ren員yuan校xiao對dui儀yi器qi的de各ge項xiang性xing能neng。
三、數字式酸度計
【一】、準備工作
1.儀器應平放在符合使用環境的工作台上,依視覺角度支起支架。
2.pH值的定位測量法:
(一)二點定位法(高精度測量方法)
(1) 連接好電極線路,將參比電極及活化滿24h以上清潔的PH電極移入第一標準緩衝液pH1中(例pH1=4.00),待儀器響應穩定後,調節定位旋鈕至儀器顯示為“0.00”;
(2) 將電級係統從第1種標準液中取出,用去離子水衝洗幹淨後以濾紙吸幹電級表麵水份,移入第2種標準液(例pH2=9.18)中,儀器響應穩定後,調節斜率旋鈕,使儀器顯示為(△pH=pH1-pH2=9.18-4.00=5.18)此後斜率旋鈕不可再動,除非更換電極係統;
(3) 斜率調節完成後,重新調節定位旋鈕,使儀器顯示第2種標準液的實際pH值(9.18),至此2點定位結束;
(4) 將電極從第2種標準液中取出衝洗、吸幹後移入待測溶液中,儀器響應穩定後顯示的數值即為待測溶液的pH值。
(二)一點定位法(粗略測量法)
(1) 將溫度補償旋鈕調至溶液溫度值;
(2) 向左將斜率補償旋鈕旋轉至頭;
(3) 將電級係統移入標準液中(一點法僅用一種標準液,如pH=4.00時),調節定位旋鈕使儀器顯示“4.00”;
(4) 取出電級衝洗吸幹水分後移至待測溶液中,儀器響應穩定後顯示的數值即為待測溶液的pH值。
(三)溫度的測量
1.將功能選擇撥至溫度檔。
2.將溫度探頭插入插孔,並將溫度探頭置於環境條件或溶液中,儀器響應穩定後儀器顯示值即為環境條件或溶液溫度值。
(四)注意事項
1.認真做好儀器使用前準備工作。
2.儀器通電後或測量過程中出現顯示不穩或亂跳現象,應切斷電源進行檢查,如電壓、預熱時間及電極係統等是否正常。
3.使用不同電極應注意排除離子的幹擾,選擇好鹽橋,必要時應使用離子強度固定劑。
4.電極係統從第1種溶液取出移入第2種溶液之前,須用去離子水或雙蒸水清洗幹淨,再用濾紙吸幹表麵水分,以免影響測定結果的準確性。
5.儀器應存放於幹燥、清潔無腐蝕的場所,每次測量結束後應關閉電源,退出電極及溫度探頭妥善保存。玻璃電極清洗後可浸於去離子水待用(注意水麵不得低於玻璃球泡),甘汞電極清潔後套上橡皮帽置於配套盒中保存,當甘汞電極內充液泄漏或不飽和及鹽橋中斷時,應及時補充飽和內充液。
6.該類儀器均采用大規模集成電路,輸入阻值較高,在對儀器內部進行任何零部件修理焊接時,應使用45W以下有良好地線的烙鐵,無接地線烙鐵應撥下電源插頭焊接。
【二】、pH(酸堿度)測量
1.將功能選擇撥至“pH”檔,調節定位旋扭,斜率補償旋鈕及溫度補償旋鈕顯示值應有相應變化。
2.通過儀器溫度檔測定標準液及待測樣品液溫度(要求兩種液體溫度保持一致,以減少測定誤差),並用溫度補償旋鈕調節至溶液實際溫度值。
四、分光光度計
不(bu)同(tong)物(wu)質(zhi)對(dui)不(bu)同(tong)波(bo)長(chang)入(ru)射(she)光(guang)的(de)吸(xi)收(shou)程(cheng)度(du)各(ge)不(bu)相(xiang)同(tong),從(cong)而(er)形(xing)成(cheng)特(te)征(zheng)性(xing)的(de)吸(xi)收(shou)光(guang)譜(pu)。分(fen)光(guang)光(guang)度(du)法(fa)不(bu)僅(jin)適(shi)應(ying)於(yu)可(ke)見(jian)光(guang)區(qu),同(tong)時(shi)還(hai)可(ke)擴(kuo)展(zhan)至(zhi)紫(zi)外(wai)光(guang)區(qu)及(ji)紅(hong)外(wai)光(guang)區(qu),因(yin)此(ci)給(gei)科(ke)研(yan)實(shi)驗(yan)帶(dai)來(lai)了(le)極(ji)大(da)方(fang)便(bian)。下(xia)麵(mian)重(zhong)點(dian)介(jie)紹(shao)分(fen)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)的(de)使(shi)用(yong)及(ji)注(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang)。
使用規則:
1.接通穩壓器電源,待穩壓器輸出電壓穩定至200V後打開光度計電源,儀器自動進入初始化。
2.初始化約需時10 min,內容包括:①尋找零級光;②建立基線;③最後當顯示器指示××nm時,,表明儀器完成初始化程序,可進入檢測狀態。
3.按要求輸入各項參數,選擇相應比色杯(玻璃或石英),將空白管、標準管及待測管依次放入比色皿架內,關上比色池蓋。
4.以空白管自動調零。
5.試樣槽依次移至樣品位置,待數據顯示穩定後按“START/STOP”鍵,打印機自動打印所測數據,重複上述步驟,直到所有樣品檢測完畢。
6.檢測結束後應及時取出比色杯,並清洗幹淨放回原處,同時關上儀器電源開關及穩壓器電源開關,做好使用情況登記。
注意事項:
1.儀器初次使用或使用較長時間(一般為一年),需檢查波長準確度,以確保檢測結果的可靠性。
2.youyuchangtuyunshuhuoshineibanyunkenengzaochengguangyuanweizhipianyi,daozhiliangdianliupiaoyizengda。cishiduiguangyuanweizhijinxingtiaozheng,zhizhidadaoyouguanjishuzhibiaoweizhi。ruojingtiaozhengxiaozhenghoubochangzhunquedu、暗電源漂移及亮電流漂移三項關鍵指標仍未符合要求,則應停止使用,並及時通知有關技術人員檢修。
3.每次檢測結束後應檢查比色池內有否溶液溢出,若有溢出應隨時用濾紙吸幹,以免引起測量誤差或影響儀器使用壽命。
4.儀器每次使用完畢,應於燈室內放置數袋矽膠(或其它幹燥劑),以免反射鏡受潮黴變或沾汙,影響儀器使用,同時蓋好防塵罩。
5.儀器室應通常保持潔淨幹燥,室溫以5-35℃為宜,相對溫度不得超過85%。有條件者應於室內配備空調機及除濕機,以確保儀器性能穩定。
6.儀器室不得存放酸、堿、揮發性或腐蝕性等物質,以免損壞儀器。
7.儀器長時間不用時,應定時通電預熱,每周1次,每次30min,以保證儀器處於良好使用狀態。
五、電泳儀
電dian泳yong技ji術shu是shi分fen子zi生sheng物wu學xue研yan究jiu不bu可ke缺que少shao的de重zhong要yao分fen析xi手shou段duan。電dian泳yong一yi般ban分fen為wei自zi由you界jie麵mian電dian泳yong和he區qu帶dai電dian泳yong兩liang大da類lei,自zi由you界jie麵mian電dian泳yong不bu需xu支zhi持chi物wu,如ru等deng電dian聚ju焦jiao電dian泳yong、等速電泳、密度梯度電泳及顯微電泳等,這類電泳目前已很少使用。而區帶電泳則需用各種類型的物質作為支持物,常用的支持物有濾紙、醋酸纖維薄膜、非凝膠性支持物、凝膠性支持物及矽膠-Gbocengdeng,fenzishengwuxuelingyuzhongzuichangyongdeshiqiongzhitangningjiaodianyong。suoweidianyong,shizhidaidianlizizaidianchangzhongdeyundong,butongwuzhiyouyusuodaidianhejifenziliangdebutong,yincizaidianchangzhongyundongsudubutong,genjuzheyitezheng,yingyongdianyongfabiankeyiduibutongwuzhijinxingdingxinghuodingliangfenxi,huojiangyidinghunhewujinxingzufenfenxihuodangezufentiquzhibei,zhezailinchuangjianyanhuoshiyanyanjiuzhongjuyoujiqizhongyaodeyiyi。dianyongyizhengshijiyushangshuyuanlishejizhizaode。xiamianjiandanjieshaoqishiyongfangfajizhuyishixiang。
使用方法:
1.首先用導線將電泳槽的兩個電極與電泳儀的直流輸出端聯接,注意極性不要接反。
2.電泳儀電源開關調至關的位置,電壓旋鈕轉到最小,根據工作需要選擇穩壓穩流方式及電壓電流範圍。
3.接通電源,緩緩旋轉電壓調節鈕直到達到的所需電壓為止,設定電泳終止時間,此時電泳即開始進行。
4.工作完畢後,應將各旋鈕、開關旋至零位或關閉狀態,並撥出電泳插頭。
注意事項:
1.電泳儀通電進入工作狀態後,禁止人體接觸電極、電泳物及其它可能帶電部分,也不能到電泳槽內取放東西,如需要應先斷電,以免觸電。同時要求儀器必須有良好接地端,以防漏電。
2.yiqitongdianhou,buyaolinshizengjiahuobochushuchudaoxianchatou,yifangduanluxianxiangfasheng,suiranyiqineibufusheyoubaoxiansi,danduanluxianxiangrengyoukenengdaozhiyiqisunhuai。
3.youyubutongjiezhizhichiwudedianzuzhibutong,dianyongshisuotongguodedianliuliangyebutong,qiyongdongsudujiyongzhizhongdiansuoxushijianyebutong,gubutongjiezhizhichiwudedianyongbuyaotongshizaitongyidianyongyishangjinxing。
4.在總電流不超過儀器額定電流時(最大電流範圍),可以多槽關聯使用,但要注意不能超載,否則容易影響儀器壽命。
5.某(mou)些(xie)特(te)殊(shu)情(qing)況(kuang)下(xia)需(xu)檢(jian)查(zha)儀(yi)器(qi)電(dian)泳(yong)輸(shu)入(ru)情(qing)況(kuang)時(shi),允(yun)許(xu)在(zai)穩(wen)壓(ya)狀(zhuang)態(tai)下(xia)空(kong)載(zai)開(kai)機(ji),但(dan)在(zai)穩(wen)流(liu)狀(zhuang)態(tai)下(xia)必(bi)須(xu)先(xian)接(jie)好(hao)負(fu)載(zai)再(zai)開(kai)機(ji),否(fou)則(ze)電(dian)壓(ya)表(biao)指(zhi)針(zhen)將(jiang)大(da)幅(fu)度(du)跳(tiao)動(dong),容(rong)易(yi)造(zao)成(cheng)不(bu)必(bi)要(yao)的(de)人(ren)為(wei)機(ji)器(qi)損(sun)壞(huai)。
6.使用過程中發現異常現象,如較大噪音、放電或異常氣味,須立即切斷電源,進行檢修,以免發生意外事故。
六、分析天平
fenxitianpingshidingliangfenxigongzuozhongbukequeshaodezhongyaoyiqi,chongfenlejieyiqixingnengjishulianzhangwoqishiyongfangfa,shihuodekekaofenxijieguodebaozheng。fenxitianpingdezhongleihenduo,youputongfenxitianping、半自動/全自動加碼電光投影阻尼分析天平及電子分析天平等。下麵就電子分析天平的使用方法及注意事項做一介紹。
操作方法:
1.檢查並調整天平至水平位置。
2.事先檢查電源電壓是否匹配(必要時配置穩壓器),按儀器要求通電預熱至所需時間。
3.預熱足夠時間後打開天平開關,天平則自動進行靈敏度及零點調節。待穩定標誌顯示後,可進行正式稱量。
4.稱cheng量liang時shi將jiang潔jie淨jing稱cheng量liang瓶ping或huo稱cheng量liang紙zhi置zhi於yu稱cheng盤pan上shang,關guan上shang側ce門men,輕qing按an一yi下xia去qu皮pi鍵jian,天tian平ping將jiang自zi動dong校xiao對dui零ling點dian,然ran後hou逐zhu漸jian加jia入ru待dai稱cheng物wu質zhi,直zhi到dao所suo需xu重zhong量liang為wei止zhi。
5.被稱物質的重量是顯示屏左下角出現“→”標誌時,顯示屏所顯示的實際數值。
6.稱量結束應及時除去稱量瓶(紙),關上側門,切斷電源,並做好使用情況登記。
注意事項:
1.天平應放置在牢固平穩水泥台或木台上,室內要求清潔、幹燥及較恒定的溫度,同時應避免光線直接照射到天平上。
2.稱量時應從側門取放物質,讀數時應關閉箱門以免空氣流動引起天平擺動。前門僅在檢修或清除殘留物質時使用。
3.電子分析天平若長時間不使用,則應定時通電預熱,每周一次,每次預熱2h,以確保儀器始終處於良好使用狀態。
4.天平箱內應放置吸潮劑(如矽膠),當吸潮劑吸水變色,應立即高溫烘烤更換,以確保吸濕性能。
5.揮發性、腐蝕性、強酸強堿類物質應盛於帶蓋稱量瓶內稱量,防止腐蝕天平。
6.通電前應按工作電源要求檢查電壓是否符合要求,若電源波動太大,應經交流穩壓後再送接儀器。
7.電源應用良好接線,以消除外界幹擾,使用攪拌器時,務必使攪拌器外殼與儀器接地端相連。
8.接通儀器電源,經10min預熱後,可進行測量工作。
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