
一、 樣品消化
1、 稱取試樣(根據樣品含氮量)置於洗滌烘幹的消化管內,加入催化劑和10ml硫酸。
2、 將(jiang)消(xiao)化(hua)管(guan)分(fen)別(bie)放(fang)入(ru)消(xiao)化(hua)架(jia)各(ge)個(ge)孔(kong)內(nei),然(ran)後(hou)置(zhi)於(yu)消(xiao)化(hua)爐(lu)上(shang),開(kai)啟(qi)抽(chou)吸(xi)泵(beng)水(shui)閥(fa),使(shi)抽(chou)吸(xi)泵(beng)處(chu)於(yu)吸(xi)氣(qi)狀(zhuang)態(tai)。接(jie)通(tong)電(dian)源(yuan),在(zai)加(jia)熱(re)初(chu)始(shi)階(jie)段(duan),需(xu)注(zhu)意(yi)觀(guan)測(ce),防(fang)止(zhi)試(shi)樣(yang)因(yin)急(ji)沸(fei)而(er)飛(fei)濺(jian)。(初化時,電壓調至180V-200V溫度不宜太高)。
二、 蒸餾
1、 用橡膠管連接NaOH、HO注入接口,冷卻水接口和排水口。
2、 按an下xia蒸zheng汽qi開kai關guan,蒸zheng發fa爐lu內nei水shui由you冷leng卻que水shui接jie口kou通tong過guo冷leng凝ning管guan,經jing平ping穩wen器qi慢man慢man流liu入ru,由you於yu蒸zheng發fa爐lu水shui位wei不bu斷duan上shang升sheng,使shi電dian極ji板ban之zhi間jian電dian流liu逐zhu步bu增zeng加jia,水shui溫wen經jing過guo電dian熱re板ban加jia熱re而er上shang升sheng,但dan由you於yu初chu始shi時shi水shui溫wen較jiao低di,水shui溫wen迅xun速su上shang升sheng,蒸zheng汽qi尚shang未wei能neng馬ma上shang產chan生sheng,電dian流liu急ji劇ju增zeng加jia,造zao成cheng熔rong絲si管guan斷duan裂lie。待dai電dian流liu表biao指zhi向xiang5A時即釋放蒸汽開關,待指針回落到零時,再按蒸汽開關,反複幾次,等蒸汽正常噴出,電流表固定在4-5A時,即開始正常蒸餾。
3、 在250ml三角燒瓶中加入2%硼酸50ml和2-3滴混合指示劑,將其套在蒸餾器的接收管上,並且讓管口浸沒在硼酸溶液中。
4、 扳(ban)動(dong)蒸(zheng)餾(liu)托(tuo)盤(pan)架(jia)把(ba)需(xu)要(yao)蒸(zheng)餾(liu)的(de)消(xiao)化(hua)管(guan)固(gu)定(ding)在(zai)蒸(zheng)餾(liu)托(tuo)盤(pan)上(shang),通(tong)過(guo)麵(mian)板(ban)開(kai)關(guan)分(fen)別(bie)向(xiang)消(xiao)化(hua)管(guan)注(zhu)入(ru)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)和(he)氫(qing)氧(yang)化(hua)鈉(na)溶(rong)液(ye),然(ran)後(hou)開(kai)啟(qi)蒸(zheng)汽(qi)開(kai)關(guan),向(xiang)試(shi)管(guan)內(nei)注(zhu)入(ru)蒸(zheng)汽(qi),進(jin)行(xing)蒸(zheng)餾(liu)。待(dai)接(jie)收(shou)瓶(ping)液(ye)麵(mian)高(gao)於(yu)150ml時將接收瓶下移,使接收管離開液麵,用水衝洗出氣口,繼續蒸餾半分鍾,然後取下接收瓶,帶滴定。
三、 滴定
用0.1N HCl滴定接收瓶內的溶液,滴定溶液由綠色變成淡紫色時為止,記下消耗HCl的毫升數,按下式計算蛋白含量:

式中:V―消耗鹽酸的毫升數
V―空白試驗時消耗鹽酸的毫升數
N―鹽酸的當量濃度
0.014―1ml鹽酸的克當量數
A―固定係數(6.25,5.7等)
W―試樣重量
(空白測定:用0.1克糖代替樣品或不加樣品作空白測定)
四、 注意事項
1、 消化時若有氣體外溢,加大抽吸泵水的流速。
2、 氫(qing)氧(yang)化(hua)鈉(na)溶(rong)液(ye)因(yin)長(chang)期(qi)不(bu)用(yong),管(guan)裏(li)容(rong)易(yi)產(chan)生(sheng)粘(zhan)固(gu)現(xian)象(xiang),每(mei)次(ci)工(gong)作(zuo)後(hou)把(ba)氫(qing)氧(yang)化(hua)鈉(na)外(wai)接(jie)皮(pi)管(guan)移(yi)入(ru)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)瓶(ping)內(nei),抽(chou)洗(xi)幾(ji)次(ci),待(dai)下(xia)次(ci)使(shi)用(yong)時(shi),在(zai)蒸(zheng)餾(liu)時(shi)需(xu)排(pai)出(chu)100ml氫氧化鈉,以防稀釋,影響測定誤差。
3、 每次蒸餾結束,必須迅速取下消化管,防止消化管液體倒吸至蒸發爐內腐蝕電極板。
4、 盛水和氫氧化鈉的容器應低於儀器高度,防止泵停止工作後大氣壓把液體壓入消化管。
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