1、營養成分分析
有機酸、碳水化合物、維生素、遊離脂肪酸、氨基酸
2、食品添加劑和農藥殘留分析
(1)防腐劑與甜味劑
可分離和測定濃縮果汁、軟飲料、果醬、蠔油和人造黃油中的山梨酸和苯甲酸防腐劑,也可同時分析可樂飲料中的阿斯巴甜和糖精。
(2)合成色素
(3)農藥和抗生素殘留
高效液相色譜可對飲用水、牛奶、啤酒、穀物、馬鈴薯和豬肉等食品中的農藥殘留和抗生素殘留的測定。
(4)食品毒素
高效液相色譜用於測定大豆、魚及貝類的多胺、次黃嘌呤、黃曲黴毒素、麻痹性貝毒素(saxitoxin)等食品毒素。
高效液相色譜原理:高效液相色譜是用高壓輸液泵將具有不同極性的單一溶劑或不同比例的混合溶劑、緩(huan)衝(chong)液(ye)等(deng)流(liu)動(dong)相(xiang)泵(beng)入(ru)裝(zhuang)有(you)固(gu)定(ding)相(xiang)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu),經(jing)進(jin)樣(yang)閥(fa)注(zhu)入(ru)供(gong)試(shi)品(pin),由(you)流(liu)動(dong)相(xiang)帶(dai)入(ru)柱(zhu)內(nei),在(zai)柱(zhu)內(nei)各(ge)成(cheng)分(fen)被(bei)分(fen)離(li)後(hou),依(yi)次(ci)進(jin)入(ru)檢(jian)測(ce)器(qi),色(se)譜(pu)信(xin)號(hao)由(you)記(ji)錄(lu)儀(yi)或(huo)積(ji)分(fen)儀(yi)記(ji)錄(lu)。
1.對儀器的一般要求
所用的儀器為高效液相色譜儀。色譜柱的填料和流動相的組分應按各品種項下的規定.常用的色譜柱填料有矽膠和化學鍵合矽膠。後者以十八烷基矽烷鍵合矽膠最為常用,辛基鍵合矽膠次之,氰基或氨基鍵合矽膠也有使用;離子交換填料,用於離子交換色譜;凝ning膠jiao或huo玻bo璃li微wei球qiu等deng,用yong於yu分fen子zi排pai阻zu色se譜pu等deng。注zhu樣yang量liang一yi般ban為wei數shu微wei升sheng。除chu另ling有you規gui定ding外wai,柱zhu溫wen為wei室shi溫wen,檢jian測ce器qi為wei紫zi外wai吸xi收shou檢jian測ce器qi。在zai用yong紫zi外wai吸xi收shou檢jian測ce器qi時shi,所用流動相應符合紫外分光光度法。
正文中各品種項下規定的條件除固定相種類、流動相組分、檢測器類型不得任意改變外,其餘如色譜柱內徑、長度、固定相牌號、載體粒度、流動相流速、混合流動相各組分的比例、柱溫、進樣量、檢測器的靈敏度等,均可適當改變,以適應具體品種並達到係統適用性試驗的要求。
2.係統適用性試驗
按各品種項下要求對儀器進行適用性試驗,即用規定的對照品對儀器進行試驗和調整,應達到規定的要求;或規定分析狀態下色譜柱的最小理論板數、分離度和拖尾因子.
(1)色譜柱的理論板數(n)在選定的條件下,注入供試品溶液或各品種項下規定的內標物質溶液,記錄色譜圖,量出供試品主成分或內標物質峰的保留時間t<[R]>(以分鍾或長度計,下同,但應取相同單位)和半高峰寬(W<[h/2]>),按n=5.54(t<[R]>/W<[h/2]>)<2>計算色譜柱的理論板數,如果測得理論板數低於各品種項下規定的最小理論板數,應改變色譜柱的某些條件(如柱長、載體性能、色譜柱充填的優劣等),使理論板數達到要求。
(2)分離度定量分析時,為便於準確測量,要求定量峰與其他峰或內標峰之間有較好的分離度。分離度(R)的計算公式為:2(t<[R2]>-t<[R1]>)R=──W<[1]>+W<[2]>式中t<[R2]>為相鄰兩峰中後一峰的保留時間;t<[R1]>為相鄰兩峰中前一峰的保留時間;W<[1]>及W<[2]>為此相鄰兩峰的峰寬。除另外有規定外,分離度應大於1.5。
(3)拖尾因子為保證測量精度,特別當采用峰高法測量時,應檢查待測峰的拖尾因子(T)是否符合各品種項下的規定,或不同濃度進樣的校正因子誤差是否符合要求。拖尾因子計算公式為:W<[0.05h]>T=──────2d<[1]>式中W<[0.05h]>為0.05峰高處的峰寬;d<[1]>為峰極大至峰前沿之間的距離。除另有規定外,T應在0.95~1.05間。也可按各品種校正因子測定項下,配製相當於80%、100%和120%的對照品溶液,加入規定量的內標溶液,配成三種不同濃度的溶液,分別注樣3次,計算平均校正因子,其相對標準偏差應不大於2.0%。
3.測定法
定量測定時,可根據樣品的具體情況采用峰麵積法或峰高法。但用歸一法或內標法測定雜質總量時,須采用峰麵積法。
(1)麵積歸一化法測定供試品(或經衍生化處理的供試品)中zhong各ge雜za質zhi及ji雜za質zhi的de總zong量liang限xian度du采cai用yong不bu加jia校xiao正zheng因yin子zi的de峰feng麵mian積ji歸gui一yi法fa。計ji算suan各ge雜za質zhi峰feng麵mian積ji及ji其qi總zong和he,並bing求qiu出chu占zhan總zong峰feng麵mian積ji的de百bai分fen率lv。但dan溶rong劑ji峰feng不bu計ji算suan在zai內nei。色se譜pu圖tu的de記ji錄lu時shi間jian應ying根gen據ju各ge品pin種zhong所suo含han雜za質zhi的de保bao留liu時shi間jian決jue定ding,除chu另ling有you規gui定ding外wai,可為該品種項下主成分保留時間的倍數。
(2)主zhu成cheng分fen自zi身shen對dui照zhao法fa當dang雜za質zhi峰feng麵mian積ji與yu成cheng分fen峰feng麵mian積ji相xiang差cha懸xuan殊shu時shi,采cai用yong主zhu成cheng分fen自zi身shen對dui照zhao法fa。在zai測ce定ding前qian,先xian按an各ge品pin種zhong項xiang下xia規gui定ding的de雜za質zhi限xian度du,將jiang供gong試shi品pin稀xi釋shi成cheng一yi定ding濃nong度du的de溶rong液ye作zuo為wei對dui照zhao溶rong液ye,進jin樣yang,調tiao節jie檢jian測ce器qi的de靈ling敏min度du或huo進jin樣yang量liang,使shi對dui照zhao溶rong液ye中zhong的de主zhu成cheng分fen色se譜pu峰feng麵mian積ji滿man足zu準zhun確que測ce量liang要yao求qiu。然ran後hou取qu供gong試shi品pin溶rong液ye,進jin樣yang,記ji錄lu時shi間jian,除chu另ling有you規gui定ding外wai,應ying為wei主zhu成cheng分fen保bao留liu時shi間jian的de倍bei數shu。根gen據ju測ce得de的de供gong試shi品pin溶rong液ye的de各ge雜za質zhi峰feng麵mian積ji及ji其qi總zong和he並bing和he對dui照zhao溶rong液ye主zhu成cheng分fen的de峰feng麵mian積ji比bi較jiao,計ji算suan雜za質zhi限xian度du。
(3)內標法測定供試品中雜質的總量限度采用不加校正因子的峰麵積法。取供試品,按各品種項下規定的方法配製不含內標物質的供試品溶液,注入儀器,再zai配pei製zhi含han有you內nei標biao物wu質zhi的de供gong試shi品pin溶rong液ye,在zai同tong樣yang的de條tiao件jian下xia注zhu樣yang。記ji錄lu的de時shi間jian除chu另ling有you規gui定ding外wai,應ying為wei該gai品pin種zhong項xiang下xia規gui定ding的de內nei標biao峰feng保bao留liu時shi間jian的de倍bei數shu,色se譜pu圖tu上shang內nei標biao峰feng高gao應ying為wei記ji錄lu儀yi滿man標biao度du的de30%以上,否則應調整注樣量或檢測器靈敏度。
係統控製器ProminenceCBM-20A/20Alite
CBM-20A
可連接的單元:輸液單元最多4台、自動進樣器1台、柱溫箱1台、檢測器最多2台、鎦分收集器1台、輔助控製器最多2台
連接單元數:8(可增至12)
數據緩衝:約24小時之1分析(采樣率500ms時,隻限LCsolution使用時)
CBM-20Alite
可連接的單元:輸液單元最多4台、自動進樣器(SIL-10AF/10AP/10A除外)1台、柱溫箱1台、檢測器最多2台、輔助控製器最多2台
連接單元數:5
數據緩衝:約24小時之1分析(采樣率500ms時,隻限LCsolution使用時)
輸液單元ProminenceLC-20AD/20AT/20AB
LC-20AD
輸液方式:並聯雙柱塞
柱塞容量:10μL
最大排液壓力:40MPa
流量設定範圍:0.0001mL/min-10.0000mL/min
流量準確度:1%或0.5μL/min其中較大值以內
流量精密度:0.1%RSD以下
LC-20AT
輸液方式:串聯雙柱塞
柱塞容量:主泵頭47μL、副泵頭23μL
最大排液壓力:40MPa
流量設定範圍:0.001mL/min-10.000mL/min
流量準確度:2%或2μL/min其中較大值以內
流量精密度:0.1%RSD以下
LC-20AB
輸液方式:並聯雙柱塞(2式)
柱塞容量:10μL
最大排液壓力:40MPa
流量設定範圍:0.0001mL/min-10.0000mL/min
流量準確度:1%或0.5μL/min其中較大值以內
流量精密度:0.1%RSD以下
梯度係統
LC-20AB
梯度方式:高壓混合
混合溶劑數:2液
LC-20AD/20AT高壓GE規格
梯度方式:高壓混合
混合溶劑數:2液或3液
LC-20AD/20AT低壓GE規格
梯度方式:低壓混合
混合溶劑數:最多4液
紫外可見檢測器
ProminenceSPD-20A/20AVUV-VIS檢測器
ProminenceSPD-M20APDA檢測器
SPD-20A/SPD-20AV
光源:SPD-20AD2燈、SPD-20AVD2燈、W燈
波長範圍:SPD-20A190nm-700nm、SPD-20AV190nm-900nm
波長準確度:1nm以下
波長精密度:0.1nm以下
噪聲:±0.25×10-5AU
漂移:1×10-4AU/h
線性:>2.5AU
功能:190nm-370nm或371nm以上雙波長檢測,比例色譜圖輸出,波長掃描,時間程序
SPD-M20A
光源:D2燈、W燈
二極管元件數:512
波長範圍:190nm-800nm
波長準確度:1nm以下
波長精密度:0.1nm以下
噪聲:±0.3×10-5AU
漂移:0.5×10-3AU/h
線性:>2.0AU
功能:等高線輸出,光譜檢索,最大輸出
自動進樣器ProminenceSIL-20A/20AC
進樣方式:全量進樣,進樣量可變式
進樣量設定範圍:0.1μL-100μL(標準),1μL-2,000μL(選購件)
試樣處理數:
175(1mL試樣瓶)
105(1.5mL試樣瓶)SIL-20AC70(1.5mL試樣瓶)
50(4mL試樣瓶)
192(96-孔MTP2塊)
768(384-孔MTP2塊)
在上述各規格外另可使用1.5mL試樣瓶10個
進樣量準確度:1%以下
進樣量精密度:0.3%RSD以下
交叉汙染:0.005%以下(萘、洗必泰)
反複進樣次數:最大30/1試樣
針清洗:在進樣前後任意設定
試樣冷卻器:SIL-20A無SIL-20AC模塊冷卻加熱方式,兼除潮功能4℃-40℃
試樣架切換器
試樣架切換器A
適用板:96-孔MTP,96-孔DWP
板處理塊數:12P
試樣冷卻器:無
試樣架切換器C
適用板:96-孔MTP,96-孔DWP
板處理塊數:12P
試樣冷卻器:模塊冷卻加熱方式,兼除潮功能4℃-40℃
柱溫箱ProminenceCTO-20A/20AC
調溫方式:強製空氣循環式
冷卻方式:CTO-20A無、CTO-20AC電子冷卻式
溫度控製精密度:0.1℃以下
溫度控製範圍:CTO-20A(室溫 10)℃-85℃、CTO-20AC(室溫-10)℃-85℃
收容空間:W220×H365×D95mm
可收容儀器:手動進樣器2個,梯度混合器,高壓流路切換閥2個等
定時程序:線性溫度程序
安全措施:溶劑傳感器、溫度保險絲、上限溫度限製
高效液相色譜(LC-20A)分析結果重複性好,靈敏度高,定性定量準確,並且前處理工作強度較低,可在各級食品檢測單位中推廣應用。
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