大腸菌群(大腸杆菌)檢測實驗培養基(LST)miejunshi,ouerhuiyouxiaoqipaoliuzaixiaodaoguannei,daozhipeiyangjibunengshiyong。zhongfumiejunbujinfeishifeidian,haihuipohuaipeiyangjidechengfen。weilebimianwentidefasheng,genjushiyanjingyanheyanmisikaozuochujizhongyuanyinfenxi,binggeiyujiejuedebanfa。
*原因一:過早打開滅菌鍋
當滅菌鍋壓力表示數為0而er溫wen度du表biao示shi數shu還hai高gao於yu室shi溫wen時shi,不bu要yao打da開kai滅mie菌jun鍋guo。因yin為wei打da開kai鍋guo蓋gai瞬shun間jian,鍋guo內nei大da量liang熱re量liang散san出chu,溫wen度du突tu然ran降jiang低di,試shi管guan內nei溫wen度du也ye隨sui著zhe降jiang低di,導dao致zhi管guan內nei氣qi減jian小xiao,沸fei點dian降jiang低di,部bu分fen水shui會hui汽qi化hua留liu在zai小xiao導dao管guan內nei。
解決辦法:等滅菌鍋內氣壓和溫度都降到與室溫一致或相差不大時再打開滅菌鍋。
*原因二:試管塞塞得太緊(使用矽膠塞的時候)
試管塞塞得太緊在滅菌時會導致試管內與滅菌鍋內壓力不一致。在滅菌鍋升溫升壓時,鍋內壓力會大於管內壓力;滅菌鍋降溫降壓時,鍋內壓力小於管內壓力。鍋內壓力會大於管內壓力時,試管內壓力不夠,不能將小導管內氣體排盡,就留有氣泡;鍋內壓力小於管內壓力時,可能會使試管塞和培養基崩出,培養基報廢。
解決辦法:改用透氣性好的棉花塞,切勿使用橡皮塞。
*原因三:小導管口太小
womenkeyibayigenmaoxiguanyiduanfengkou,lingyiduanchajinshuili,maoxiguanlizenmedoubuhuijinshui。tongyangbayigeshaobeidaokoujinshuilijiuhenrongyijinshuile。xiaodaoguanzaijiayahouyifangmianshuiyaojinqu,lingwailimiandekongqiyaochulai,ruguokoutaixiaodehua,kongqiburongyichuqu,shuiyeburongyijinlai,jiuhuidaozhiqipaoliuzailimianle。
解決辦法:改用內空較大的導管,盡量使用V型管,不要使用錐型管。
原因四:培養基質量引起
youpeiyangjizhiliangyinqideqitibunengpaijinhuopeiyangjihanyougaowengaoyafenjiechanqidechengfen。miejunshiyongshuizuopeiyangjizudeduizhaoshiyan,ruopeiyangjizuyouqipao,erduizhaozumeiyouqipao,kequedingshiyouciyuanyinyinqi。
解決辦法:改用其它培養基。
原因五:滅菌鍋工作壓力不夠,使氣體不能排盡
miejunguozuidayalibugou,bunengshiguanneiyetiqiangxingbaqitijichu,zuihouhailiuyouxiaoqipao,haihuishiwendushangshenghuanman,huodabudaomiejunwendu。ciyuanyindekenengxingjiaoxiao,womenkeyizaipaichushangshusidianyuanyindeqingkuangxia,yongbujiashiguansai、大口導管做試驗,若還仍不能達到效果,就要檢查滅菌鍋了。
解決辦法:修理滅菌鍋。
注意事項:① * 為主要原因。②不要將試管倒置,以免試管口和試管塞受培養基汙染。
若使用非全自動高溫高壓滅菌鍋(此類鍋一般需要在100℃手動關閉放氣閥),則不要在鍋剛達到100℃時就關閉放氣閥,可以讓高壓鍋在100℃時多排一會兒熱氣,這樣有助於小倒管中氣體排出。
此ci外wai,盡jin量liang不bu要yao采cai用yong將jiang滅mie菌jun後hou的de試shi管guan顛dian倒dao或huo大da角jiao度du傾qing斜xie的de方fang式shi,使shi小xiao倒dao管guan內nei氣qi體ti排pai出chu。此ci種zhong方fang法fa可ke能neng會hui導dao致zhi培pei養yang基ji通tong過guo試shi管guan口kou或huo試shi管guan塞sai受shou到dao汙wu染ran,或huo者zhe導dao致zhi試shi管guan內nei液ye體ti流liu出chu。
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