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液相色譜法（HPLC）是一種廣泛應用於分析化學領域的分離技術。在反相液相色譜中使用C8/C18柱時，選擇合適的流動相至關重要。本文將詳細討論在使用C8/C18柱時為何要避免高水相流動相，以及在高比例水性流動相下保留極性分析物的色譜柱選擇。
zhongsuozhouzhi，zaifanxiangyexiangsepuzhong，gudingxiangshifeijixingde，erliudongxiangshijixingde。womenruheshiliudongxiangchengjixingne？tongguotianjiashuizheyangdeshuixingzufen。raner，tianjiashuidebiliyouxianzhi，bunengshiyonghanshuiliangguogaodeliudongxiangjinxingfanxiangyexiangsepufenxi，ru90%、95%甚至100%。那麼，這是什麼原因呢？
首(shou)先(xian)，我(wo)們(men)需(xu)要(yao)了(le)解(jie)為(wei)什(shen)麼(me)要(yao)使(shi)用(yong)高(gao)含(han)水(shui)量(liang)的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)。原(yuan)因(yin)可(ke)能(neng)是(shi)為(wei)了(le)保(bao)留(liu)高(gao)極(ji)性(xing)分(fen)子(zi)，如(ru)有(you)機(ji)酸(suan)。例(li)如(ru)抗(kang)壞(huai)血(xue)酸(suan)，這(zhe)些(xie)分(fen)子(zi)在(zai)性(xing)質(zhi)上(shang)是(shi)高(gao)極(ji)性(xing)的(de)，它(ta)們(men)在(zai)反(fan)相(xiang)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)中(zhong)不(bu)會(hui)被(bei)充(chong)分(fen)保(bao)留(liu)，因(yin)為(wei)我(wo)們(men)的(de)固(gu)定(ding)相(xiang)是(shi)非(fei)極(ji)性(xing)的(de)，而(er)非(fei)極(ji)性(xing)固(gu)定(ding)相(xiang)不(bu)會(hui)保(bao)留(liu)這(zhe)些(xie)極(ji)性(xing)化(hua)合(he)物(wu)。因(yin)此(ci)，需(xu)要(yao)在(zai)流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)添(tian)加(jia)高(gao)比(bi)例(li)的(de)水(shui)相(xiang)。這(zhe)是(shi)因(yin)為(wei)水(shui)是(shi)一(yi)種(zhong)極(ji)性(xing)溶(rong)劑(ji)，它(ta)能(neng)夠(gou)與(yu)極(ji)性(xing)較(jiao)強(qiang)的(de)分(fen)析(xi)物(wu)形(xing)成(cheng)氫(qing)鍵(jian)或(huo)離(li)子(zi)相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)，從(cong)而(er)降(jiang)低(di)分(fen)析(xi)物(wu)在(zai)流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)的(de)溶(rong)解(jie)度(du)，有(you)利(li)於(yu)分(fen)析(xi)物(wu)在(zai)色(se)譜(pu)柱(zhu)上(shang)的(de)保(bao)留(liu)和(he)分(fen)離(li)。
接下來，我們需要了解C8或C18固定相的性質。C8/C18是一種常用的反相液相色譜柱，其表麵鍵合有C8或C18烷基鏈，具有類似油脂的非極性特性。在反相色譜法中，分析物在流動相和固定相之間進行分配，以實現分離。由於C8/C18柱的固定相非極性，它們通常適用於分析非極性或弱極性分析物。然而，油水不能混合，類似油脂的非極性特性使得C8或C18固定相在高比例水相中不能被潤濕。當流動相中有一定比例的有機溶劑，如乙腈或甲醇（其性質為非極性）時，對C8或C18具有良好的潤濕性。而鍵合的固定相是位於矽膠孔內的，這意味流動相能夠潤濕C8或C18固定相的孔。這一點是非常重要的，否則它們將無法實現對目標分析物的保留。然而，如果使用100%的水相作為流動相，這會使C8或C18鍵(jian)合(he)固(gu)定(ding)相(xiang)幹(gan)涸(he)。因(yin)為(wei)水(shui)具(ju)有(you)較(jiao)高(gao)的(de)表(biao)麵(mian)張(zhang)力(li)，流(liu)經(jing)固(gu)定(ding)相(xiang)的(de)水(shui)分(fen)子(zi)不(bu)會(hui)進(jin)入(ru)孔(kong)內(nei)，而(er)隻(zhi)會(hui)通(tong)過(guo)孔(kong)之(zhi)間(jian)的(de)空(kong)間(jian)。這(zhe)樣(yang)一(yi)來(lai)，孔(kong)就(jiu)不(bu)會(hui)打(da)開(kai)，如(ru)果(guo)孔(kong)沒(mei)有(you)被(bei)潤(run)濕(shi)，那(na)麼(me)固(gu)定(ding)相(xiang)無(wu)法(fa)處(chu)於(yu)活(huo)躍(yue)狀(zhuang)態(tai)，不(bu)能(neng)與(yu)分(fen)析(xi)物(wu)發(fa)生(sheng)相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)。這(zhe)就(jiu)是(shi)在(zai)反(fan)相(xiang)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)中(zhong)使(shi)用(yong)C8/C18柱時要避免高水相流動相的原因。
當C8/C18固定相暴露在高水相流動相中時，由於表麵張力較高，C8/C18表麵會脫水，這種現象稱為固定相塌陷、鏈折疊或固定相打結，化合物無法正常地與固定相發生相互作用進行保留。
那麼，固定相塌陷會帶來哪些問題呢？固定相塌陷可能會導致保留減少、保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)的(de)不(bu)重(zhong)複(fu)的(de)現(xian)象(xiang)。並(bing)且(qie)如(ru)果(guo)想(xiang)再(zai)次(ci)從(cong)幹(gan)涸(he)狀(zhuang)態(tai)恢(hui)複(fu)到(dao)潤(run)濕(shi)狀(zhuang)態(tai)，這(zhe)個(ge)反(fan)向(xiang)過(guo)程(cheng)將(jiang)需(xu)要(yao)很(hen)長(chang)的(de)時(shi)間(jian)。保(bao)留(liu)的(de)減(jian)少(shao)是(shi)因(yin)為(wei)鍵(jian)合(he)固(gu)定(ding)相(xiang)的(de)活(huo)性(xing)表(biao)麵(mian)存(cun)在(zai)於(yu)矽(gui)膠(jiao)孔(kong)中(zhong)，而(er)孔(kong)內(nei)沒(mei)有(you)被(bei)潤(run)濕(shi)，化(hua)合(he)物(wu)也(ye)無(wu)法(fa)進(jin)入(ru)孔(kong)內(nei)與(yu)其(qi)發(fa)生(sheng)相(xiang)互(hu)作(zuo)用(yong)。因(yin)此(ci)，保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)會(hui)減(jian)少(shao)。例(li)如(ru)，如(ru)果(guo)使(shi)用(yong)90%的水和10%的甲醇作為流動相，保留時間為10分鍾。此時，如果隻使用100%的水，10分鍾的保留時間會急劇減少到3~4fenzhong。diergezhongyaodedianshibaoliushijiandezhongfuxinghuijiangdi，kenenghuisuizheshijiandetuiyierfashengbianhua。suoyi，ruguobaoliushijianbianhuahenda，kenengshiyinweiliudongxiangzhongshuihanliangjiaogao。
如果別無選擇，隻能使用水性或高比例水相的流動相，那麼在方法開發階段，需要注意選擇合適的色譜柱。
1.未封端色譜柱。未封端柱表麵存在較多的具有一定極性的遊離矽醇，遊離矽醇使固定相表麵能被潤濕，有利於極性分析物的保留。
2.短鏈烷基色譜柱：鍵合鏈之間存在遊離體積，矽醇的屏蔽作用很小，有利於極性分析物的分離。
3.極性嵌入烷基相色譜柱：在烷基鏈中嵌入極性基團，增強與極性分析物之間的相互作用，提高保留性能。
4.寬孔徑相色譜柱：以便水可以滲透到孔內使相濕潤，有利於極性分析物在高水相流動相下的保留。
綜上所述，在使用C8/C18色(se)譜(pu)柱(zhu)時(shi)，應(ying)避(bi)免(mian)高(gao)水(shui)相(xiang)流(liu)動(dong)相(xiang)，以(yi)免(mian)造(zao)成(cheng)固(gu)定(ding)相(xiang)塌(ta)陷(xian)等(deng)問(wen)題(ti)。針(zhen)對(dui)高(gao)水(shui)相(xiang)流(liu)動(dong)相(xiang)下(xia)保(bao)留(liu)極(ji)性(xing)分(fen)析(xi)物(wu)的(de)需(xu)求(qiu)，可(ke)以(yi)選(xuan)擇(ze)其(qi)他(ta)類(lei)型(xing)的(de)色(se)譜(pu)柱(zhu)進(jin)行(xing)分(fen)析(xi)。 
