培養基由於配製的原料不同,使用要求不同,而貯存保管方麵也稍有不同。
以下就是配置的方法和常見知識。
就微生物主要類型而言,有細菌、放線菌、酵母菌、黴菌、原生動物、藻類及病毒之分,培養它們所需的培養基各不相同。在實驗室中常用牛肉膏蛋白腖培養基(或簡稱普通肉湯培養基)培養細菌,用高氏I號合成培養基培養放線菌,培養酵母菌一般用麥芽汁培養基,培養黴菌則一般用查氏合成培養基。
培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)營(ying)養(yang)物(wu)質(zhi)濃(nong)度(du)合(he)適(shi)時(shi)微(wei)生(sheng)物(wu)才(cai)能(neng)生(sheng)長(chang)良(liang)好(hao),營(ying)養(yang)物(wu)質(zhi)濃(nong)度(du)過(guo)低(di)時(shi)不(bu)能(neng)滿(man)足(zu)微(wei)生(sheng)物(wu)正(zheng)常(chang)生(sheng)長(chang)所(suo)需(xu),濃(nong)度(du)過(guo)高(gao)時(shi)則(ze)可(ke)能(neng)對(dui)微(wei)生(sheng)物(wu)生(sheng)長(chang)起(qi)抑(yi)製(zhi)作(zuo)用(yong),例(li)如(ru)高(gao)濃(nong)度(du)糖(tang)類(lei)物(wu)質(zhi)、無機鹽、重(zhong)金(jin)屬(shu)離(li)子(zi)等(deng)不(bu)僅(jin)不(bu)能(neng)維(wei)持(chi)和(he)促(cu)進(jin)微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)生(sheng)長(chang),反(fan)而(er)起(qi)到(dao)抑(yi)菌(jun)或(huo)殺(sha)菌(jun)作(zuo)用(yong)。另(ling)外(wai),培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)各(ge)營(ying)養(yang)物(wu)質(zhi)之(zhi)間(jian)的(de)濃(nong)度(du)配(pei)比(bi)也(ye)直(zhi)接(jie)影(ying)響(xiang)微(wei)生(sheng)物(wu)的(de)生(sheng)長(chang)繁(fan)殖(zhi)和(he)(或)代謝產物的形成和積累,其中碳氮比(C/N)的影響較大。嚴格地講,碳氮比指培養基中碳元素與氮元素的物質的量比值,有時也指培養基中還原糖與粗蛋白之比。
培養基的pH必須控製在一定的範圍內,以滿足不同類型微生物的生長繁殖或產生代謝產物。各類微生物生長繁殖或產生代謝產物的最適pH條件各不相同,一般來講,細菌與放線菌適於在pH7-7.5範圍內生長,酵母菌和黴菌通常在pH4.5-6範圍內生長。
不同類型微生物生長對氧化還原電位(F)的要求不一樣,一般好氧性微生物在F值為+0.1V以上時可正常生長,一般以+0.3一+0.4V為宜,厭氧性微生物隻能在F值低於+0.1V條件下生長,兼性厭氧微生物在F值為+0.1V以上時進行好氧呼吸,在+0.1V以下時進行發酵。F值與氧分壓和pH有關,也受某些微生物代謝產物的影響。在pH相對穩定的條件下,可通過增加通氣量(如振蕩培養、攪拌)提高培養基的氧分壓,或加入氧化劑,從而增加F值;在培養基中加入抗壞血酸、硫化氫、半胱氨酸、穀胱甘肽、二硫蘇糖醇等還原性物質可降低F值。
在zai配pei製zhi培pei養yang基ji時shi應ying盡jin量liang利li用yong廉lian價jia且qie易yi於yu獲huo得de的de原yuan料liao作zuo為wei培pei養yang基ji成cheng分fen,特te別bie是shi在zai發fa酵jiao工gong業ye中zhong,培pei養yang基ji用yong量liang很hen大da,利li用yong低di成cheng本ben的de原yuan料liao更geng體ti現xian出chu其qi經jing濟ji價jia值zhi。
要(yao)獲(huo)得(de)微(wei)生(sheng)物(wu)純(chun)培(pei)養(yang),必(bi)須(xu)避(bi)免(mian)雜(za)菌(jun)汙(wu)染(ran),因(yin)此(ci)對(dui)所(suo)用(yong)器(qi)材(cai)及(ji)工(gong)作(zuo)場(chang)所(suo)進(jin)行(xing)消(xiao)毒(du)與(yu)滅(mie)菌(jun)。對(dui)培(pei)養(yang)基(ji)而(er)言(yan),更(geng)是(shi)要(yao)進(jin)行(xing)嚴(yan)格(ge)的(de)滅(mie)菌(jun)。對(dui)培(pei)養(yang)基(ji)一(yi)般(ban)采(cai)取(qu)高(gao)壓(ya)蒸(zheng)汽(qi)滅(mie)菌(jun),一(yi)般(ban)培(pei)養(yang)基(ji)用(yong)1.05kg/cm2,121.3℃條件下維持15-30min可達到滅菌目的
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