常chang規gui製zhi種zhong,其qi設she備bei昂ang員yuan,條tiao件jian要yao求qiu嚴yan格ge,技ji術shu也ye複fu雜za,菌jun種zhong成cheng本ben高gao。建jian一yi個ge菌jun種zhong廠chang,設she備bei投tou資zi少shao則ze上shang千qian元yuan,多duo則ze幾ji萬wan元yuan。簡jian易yi製zhi種zhong技ji術shu,就jiu是shi不bu需xu要yao專zhuan門men設she備bei,利li用yong家jia裏li現xian有you條tiao件jian就jiu可ke製zhi種zhong。
(一)蒸汽接種法
準備:先把接種操作室打掃幹淨,保持潮濕清潔。準備水壺或鋁鍋1隻,煤球爐或電爐1隻,接種台1張,接種針或大鑷子一把。蒸料滅菌桶:用鐵皮做成比鋁鍋口徑小一點的圓桶,桶底放鐵篩架,桶內裝菌袋、瓶。上邊口用塑料紙或木蓋封口。
操作:jiangmeiqiuluhuodianlufangzaicaozuotaipang,zaijiangshuihuhuolvguofangzailuzishangmian,guoneizhuangshiliangdeshui,jiezhonggongjuxianfangzaiguoneizhufeixiaodu。jiezhongshi,guanhaomenchuang,xijingshuangshou,daishangkouzhao。jiangjunzhongkuaizhijietongguozhengqifangruzaipeizhongdepeiyangliaoshang。zaizhengqishangjiezhong,jishufuyoufangbian,qiejiezhongzhiliangkekao。yinweizhengqizaishangmaodeguochengzhongchanshengyiguchongli,bashuihuhuoguoshangdekongqipaikai,zhengqibuduanchansheng,jiuxingchengguoshangyipianwujunqu。youyujunzhongdedaozhengqideshirun,bizaijiujingdengshangjiedezhonghuifudegengkuai,wuranyeshao。lingwaizhengqijiezhongbushiyonghuaxueyaopin,kebimianzaijiezhongshiyaopinduirutideduhai。
(二)代替瓊脂培養基
1.綠豆粉培養基:將新鮮、幹燥、不黴變的豆粉隊放入鍋內煮沸調團狀,裝入試管或三角瓶內,塞好棉塞,用 牛皮紙或報紙包紮好試管上部,成捆放於高壓鍋內,用12公斤/厘米2壓力滅菌半小時,然後慢慢放汽,取出試管凝固成斜麵即成。
2.麥粒種:將小麥粒用溫水浸泡2小時,撈出放入竹篩內,4個小時燒一次清水,約24小時左右,麥粒就萌發 小芽約1厘米。這時再放火鍋內煮沸半小時,取出用涼水冷卻後,加入石膏、幹馬糞使之成散粒,然後分裝試管、三角瓶、蘑菇瓶、雜酒瓶,裝量按常規。塞好棉塞進行滅菌,15磅壓力滅菌1小時。然後接種。 采用此法可節約大量瓊脂。化學藥品。
(三)於實體組織分離簡易方法
在無菌環境中,直接切取菇體未形成孢子組織塊,進行 培養即稱簡易分離技術。
方法:在第一批菇中,選取具有該品種特性的、發育正常、菌蓋肥厚、朵大、無wu病bing蟲chong害hai的de子zi實shi體ti作zuo種zhong菇gu。在zai蒸zheng汽qi上shang用yong手shou把ba子zi實shi體ti一yi分fen為wei二er,用yong消xiao毒du過guo的de小xiao刀dao在zai萌meng蓋gai和he菌jun柄bing交jiao界jie處chu切qie取qu一yi小xiao塊kuai菌jun肉rou,移yi放fang在zai斜xie麵mian培pei養yang基ji中zhong央yang。分fen離li完wan後hou標biao上shang菌jun種zhong導dao和he分fen離li時shi間jian,然ran後hou培pei養yang。
還可將於實體菌柄與菌蓋交界處的菌肉,挑一塊直接放 入滅過菌的原種瓶,培養即可。這種菌種也可直接用於栽培或擴接。
(四)以菇種菇的方法
以菇種菇,就是將子實體直接當菌種栽培。方法是:把培養料按常規栽培要求拌勻後,壓塊,在料塊表麵放些子實體(子實體要幹淨無汙染),子實體上撒一層培養料,蓋上塑料紙即可。注意子實體放入後,不能重壓。在20℃以下的低溫培養。
(五)"U"型音提純菌種
常規提純銀耳伴生菌――香灰菌絲,用試管培養基反複提純,手續繁多且不易提純,我們采用玻璃"口"型管提純香灰菌絲,不用瓊脂培養基,就可得到純的香灰菌絲,其方法:取1―2厘米口徑的玻璃"U"型管數支,裝上木屑培養基,兩端用塑料紙包紮嚴(耐高壓塑料紙),滅菌後,在接種箱內,用接種針挑香灰菌絲前端白色處一點,接於"U"管一端,經培養,菌絲長至另一端後,及時挑取一點放入又一"U"型管內,這樣反複進行提純,可獲得純菌絲。
(六)幾種簡易母種培養基的製作
1.缺少土豆時可用米湯或小麥煮水代替
(1)米湯培養基
煮米飯時在鍋中多加些水;將米湯濾在沒有油汙的幹淨容器內,取1000毫升,倒在小鍋中,加熱煮沸,加入瓊脂20克,攪拌使之溶化,再加入葡萄糖(如無葡萄糖,加白糖亦可)20克,蛋白腖5克(沒有可不加),維生素B1片(10毫克),待藥物全部溶解後,趁熱倒入漏鬥內,分裝試管,裝量為試管長度的 1/4,經 15磅壓力滅菌30分鍾,取出;擺成斜麵。平菇菌絲在米湯培養基上的生長速度比在PDA培養基上快1倍左右。
(2)小麥汁培養基
取小麥5斤;淘洗幹淨,置鍋中,加水煮沸,煮至小麥膨脹而不裂開,中間無白心為度,過濾後取澄清液1000毫升(不足量可加清水補充),在濾液中加入瓊脂20克,葡萄糖或白糖20克,製備方法同米湯培養基,過濾後的小麥粒加入0.5%碳酸粉和1.5%的石膏粉,可用於製作原種培養基,在小麥汁培養基上先後接種平菇、鳳尾菇、香菇、木耳、金針菇,其長勢均比在PDA培養基強。
2.缺少瓊脂時可用玉米粒或米飯作培養基
(l)玉米粒培養基
將玉米顆粒用冷水泡脹,衝成綠豆粒大小碎塊或將嫩玉米粒切碎,裝入試管,裝量為試管的 1/3~1/2,用竹筷稍壓緊,然後塞上棉塞,置高壓鍋內,15磅壓力滅菌45分鍾,取出冷卻後即可作為組織分離或轉接菌種的培養基,將組織塊或菌絲接入其中,25℃左右下培養,7~10天菌絲長滿,菌絲體潔白濃密,擴接成原種,長勢亦好。
(2)米飯培養基
將已濾去米湯即將入瓶的米飯分裝入試管內,稍稍壓緊,使米粒成形,塞上棉塞。滅菌、接種,培養同玉米粒培養基。
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