1.首先人員操作誤差。我們是上市公司,實驗室的人一個微生物檢驗人員都是經過嚴格考核的,微生物檢驗工作都有4到5年的操作檢驗,且出現汙染後QC主管也一直在旁邊觀察了實驗人員的操作,並沒有發現有任何異常。因此可以排除人員操作誤差。
2. 設備和環境誤差。我們用於微生物檢驗的都是要求用可循環利用的經過嚴格濕熱黴菌後再烘幹的玻璃移液管、玻璃培養皿,無菌操作是在嚴格消毒後的生物安全櫃中進行,且我們微生物限定室的級別是10萬級,所用的培養箱是滅菌消毒過的另外2台tai培pei養yang箱xiang,相xiang同tong條tiao件jian下xia所suo得de檢jian品pin,一yi半ban導dao致zhi培pei養yang,一yi半ban正zheng置zhi培pei養yang,但dan是shi正zheng置zhi培pei養yang的de還hai是shi出chu現xian了le汙wu染ran,倒dao置zhi培pei養yang的de沒mei有you被bei汙wu染ran,真zhen菌jun長chang的de均jun勻yun有you規gui則ze。由you此ci設she備bei和he環huan境jing的de誤wu差cha也ye可ke以yi排pai除chu在zai外wai。
3. 物品誤差。由於我們一直都是用生理鹽水、培(pei)養(yang)基(ji),且(qie)都(dou)是(shi)經(jing)過(guo)嚴(yan)格(ge)濕(shi)熱(re)滅(mie)菌(jun),高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)鍋(guo)也(ye)是(shi)經(jing)過(guo)當(dang)地(di)藥(yao)監(jian)局(ju)校(xiao)準(zhun)過(guo)的(de),且(qie)滅(mie)菌(jun)時(shi)間(jian)的(de)調(tiao)整(zheng)在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)性(xing)質(zhi)要(yao)求(qiu)範(fan)圍(wei)內(nei),即(ji)排(pai)除(chu)了(le)檢(jian)測(ce)用(yong)品(pin)的(de)誤(wu)差(cha)。
綜合以上可以得出培養方案是造成汙染的主要原因,隨即與當地藥監局取得聯係,經溝通藥監局對真菌的培養也是開始實施2016版的方法正置培養,且沒有出現蔓延的情況,藥檢所是將平板一個一個擺開正置培養,而沒有疊起來培養。
我們將平板一個一個擺開正置培養迅速做了驗證:我們將受汙染的培養箱做了消毒滅菌,同時開啟了另外2台沒有被汙染的培養箱將需要做黴菌培養的含樣品的凝固平板分別放到2台培養箱做分開擺放正置培養及堆疊擺放正置培養,我們的實驗室的6台(tai)培(pei)養(yang)箱(xiang)都(dou)是(shi)經(jing)過(guo)校(xiao)準(zhun)的(de)且(qie)都(dou)是(shi)同(tong)型(xing)號(hao)的(de)生(sheng)化(hua)培(pei)養(yang)箱(xiang),所(suo)以(yi)設(she)備(bei)影(ying)響(xiang)因(yin)素(su)可(ke)以(yi)忽(hu)略(lve),在(zai)培(pei)養(yang)擺(bai)放(fang)方(fang)式(shi)改(gai)變(bian),其(qi)他(ta)基(ji)數(shu)不(bu)變(bian)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)培(pei)養(yang),實(shi)驗(yan)結(jie)果(guo)是(shi)一(yi)個(ge)一(yi)個(ge)擺(bai)開(kai)正(zheng)置(zhi)培(pei)養(yang)的(de)沒(mei)有(you)受(shou)汙(wu)染(ran),而(er)堆(dui)疊(die)擺(bai)放(fang)正(zheng)置(zhi)培(pei)養(yang)的(de)受(shou)到(dao)了(le)汙(wu)染(ran)。所(suo)以(yi)可(ke)以(yi)確(que)定(ding)平(ping)板(ban)的(de)擺(bai)放(fang)方(fang)式(shi)是(shi)造(zao)成(cheng)汙(wu)染(ran)的(de)原(yuan)因(yin)。
堆疊正置培養造成汙染的原因分析:2016版方法要求培養皿正置培養在培養的第3天開始需要每天觀察和記錄培養結果,正置培養可以避免在觀察時反轉使黴菌的孢子抖動散落到培養基上而產生的次生菌落。我們都知道黴菌的特性就是有蔓延性,且由於培養箱加熱,培養箱內部還有風機使內部氣流在旋轉,2016banruguoduidiefangzhizhengzhipeiyang,qieyouyigeyangpinshiyoumeijun,namejunsijiuhuitongguofengxipinmingdewangshangpa,jiuxiangpashanhuyiyang,kaixindechangzhe,qiesuizheshengchangbaozihuituoluoqietebieqing,peiyangxiangfengjichuichudefengbabaozichuisan,tingdaogaizishangshenzhitongguogaizizhijiandefengxi(蓋子沒有裝培養基比較輕)汙(wu)染(ran)了(le)其(qi)他(ta)的(de)樣(yang)品(pin),但(dan)是(shi)同(tong)一(yi)疊(die)隨(sui)著(zhe)菌(jun)絲(si)的(de)蔓(man)延(yan),通(tong)過(guo)培(pei)養(yang)皿(min)直(zhi)接(jie)蔓(man)延(yan)到(dao)另(ling)外(wai)一(yi)個(ge)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang),一(yi)個(ge)蔓(man)延(yan)一(yi)個(ge),那(na)麼(me)一(yi)疊(die)被(bei)汙(wu)染(ran)的(de)情(qing)況(kuang)會(hui)更(geng)嚴(yan)重(zhong),這(zhe)也(ye)就(jiu)驗(yan)證(zheng)了(le)我(wo)前(qian)麵(mian)提(ti)到(dao)的(de)同(tong)一(yi)疊(die)同(tong)一(yi)個(ge)方(fang)向(xiang)被(bei)汙(wu)染(ran)的(de)現(xian)象(xiang)。並(bing)不(bu)是(shi)所(suo)有(you)的(de)企(qi)業(ye)實(shi)驗(yan)室(shi)都(dou)有(you)好(hao)幾(ji)個(ge)培(pei)養(yang)箱(xiang)的(de),所(suo)以(yi)就(jiu)提(ti)醒(xing)一(yi)些(xie)微(wei)友(you)們(men),2016版的方法千萬不要將黴菌堆疊培養,如果空間不夠可以在培養箱多裝幾個隔層,問題就解決了。
如果培養箱被汙染了,可以用75%酒精和新潔爾滅兩種消毒劑對培養箱進行了全麵的消毒,且大家最好是買那種有紫外消毒、臭氧消毒的培養箱,且消毒完最好不要馬上用,消毒完最好放個幾天在使用。
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