1
、明確亞硝酸鹽的測定與控製成品質量的關係。

    2、明確與掌握鹽酸萘乙二胺法的基本原理與操作方法。

    二、原理：

    樣yang品pin經jing沉chen澱dian蛋dan白bai質zhi
，除chu去qu脂zhi肪fang後hou，在zai弱ruo酸suan條tiao件jian下xia硝xiao酸suan鹽yan與yu對dui氨an基ji苯ben磺huang酸suan重zhong氮dan化hua後hou，生sheng成cheng的de重zhong氮dan化hua合he物wu
，再zai與yu萘nai基ji鹽yan酸suan二er氨an乙yi烯xi偶ou聯lian成cheng紫zi紅hong色se的de重zhong氮dan染ran料liao，產chan生sheng的de顏yan色se深shen淺qian與yu亞ya硝xiao酸suan根gen含han量liang成cheng正zheng比bi，可ke以yi比bi色se測ce定ding。反fan應ying式shi如ru下xia：

三、試劑與儀器

1、亞鐵氰化鉀溶液：稱取106克亞鐵氰化鉀[K₄Fe₉(CN)₅.3H₂O]
，溶於水後，稀釋至1000毫升。

    2、乙酸鋅溶液：稱取220克乙酸鋅[Zn(CH₂C00)₂·2H₂0]，加30毫升冰乙酸溶於水，並稀釋至1000毫升。

    3、飽和硼砂溶液：稱取5克硼酸鈉(Na₂B0₇·10H₂0)
，溶於100毫升熱水中，冷卻後備用。

    4、0.4％對氨基苯磺酸溶液：稱取0.4克對氨基苯磺酸，溶於100毫升20％的鹽酸中，避光保存。

    5、0.2％鹽酸萘乙二胺溶液：稱取0.2克鹽酸萘乙二胺，溶於100毫升水中，避光保存。

    6
、亞硝酸鈉標準溶液：精密稱取0.1000克於矽膠幹燥器中幹燥24小時的亞硝酸鈉
，加水溶解移入500毫升容量瓶中
，並稀釋至刻度。此溶液每毫升相當於200微克亞硝酸鈉。

    7、亞硝酸鈉標準使用液：臨用前，吸取亞硝酸鈉標準溶液5.00毫升
，置於200毫升容量瓶中，加水稀釋至刻度
，此溶液每毫升相當於5微克亞硝酸鈉。

    8，小型絞肉機。

    9、分光光度計。

    四、操作方法：

    1、樣品處理：稱取5.0克經絞碎混勻的樣品，置於50毫升燒杯中，加工2.5毫升飽和溶液，攪拌均勻，以70℃左右的水約30毫升將樣品全部洗入500毫升容量瓶中
，置沸水浴中加熱15分鍾
，取出後冷至室溫

，然後一麵轉動一麵加入5毫升亞鐵氰化鉀溶液，搖勻，再加入5毫升乙酸鋅溶液以沉澱蛋白質，加水至刻度，混勻，放置0.5小時，除去上層脂肪，清液用濾紙過濾棄去初濾液30毫升
，濾液備用。

    2、測定

    吸取40毫升上述濾液於50毫升比色管中，另吸取0.00
、0.20、0．40、0．60

、0.80、1.00、1.50、2.00、2.50毫升亞硝酸鈉標準使用液(相當於0、1、2、3、5
、7、10、12.5微克亞硝酸鈉)
，分別置於50毫升比色管中
，於標準與樣品管中分別加入2毫升0.4％對氨基苯磺酸溶液，混勻，靜置3-5分鍾後各加入1毫升0.2％鹽酸萘乙二胺溶液
，加水至刻度
，混勻，靜置15分鍾，用2厘米比色杯，以零管調節零點，於波長538nm處測吸光度，繪製標準曲線比較。

計算：  X=(A×1000)/(m×40/500×1000×1000)

X：樣品中亞硝酸鹽的含量，g／kg；

m：樣品質量，g
；

A：測定用樣液中亞硝酸鹽的含量，ug．