1 氣相色譜(GC)和高效液相色譜法(HPLC)
qixiangsepufazhuyaoshijiangdachangganjunjingguoyixilieyanshenghuadeqianchulihou,weijiexialaidefenxiyanjiutigongjinkenengduodehuaxuezufen。dachangganjundewuranchengdukeyiyongdingkongqixiangsepufalaifenxi,qiyuanlishiliyongshipinmifengxitongdingbudeweishengwudaixiechanwuCO2對微生物進行分析。這種方法對食品質量安全檢測有重大意義。與上述傳統技術相比,此種方法具有檢測速度快、靈敏度高的優點。高效液相色譜法(HPLC)主要是根據離子配對反相層析的原理來分析核酸。HPLC主要是針對DNA片段分離。長鏈DNA所攜帶的磷酸基團比較多,因此會有更多的TEAA與之相融合,其在柱內停留的時間增加。因為乙腈具有親水性,可以通過其而將DNA分離,在具備一定的變性溫度下,可以通過圖譜顯示明顯的吸收峰。該技術具有準確度高、靈敏度高、成本低等優點,可大大提高工作效率。
2 ATP生物發光技術
ATP生物發光技術是近些年來發展較快的微生物快速檢測方法。ATP是活細胞中最普遍的能量代謝產物,為細胞提供各種生理活動所需的能量,而且其在生物體內含量維持在一定的範圍內。ATPhanliangjiancedeyizhongfangfashiyingguangguangdufa,shengwufaguangshihuoxibaozaiyingguangsumeicuihuaxiafachudeyingguang。muqianshiyongdeyingguangsumeizhuyaolaiyuanyubeimeideyinghuochong,xiangduifenzizhiliangwei62000的(de)蛋(dan)白(bai)質(zhi),它(ta)可(ke)以(yi)催(cui)化(hua)熒(ying)光(guang)素(su)的(de)氧(yang)化(hua)反(fan)應(ying),這(zhe)種(zhong)反(fan)應(ying)的(de)終(zhong)產(chan)物(wu)不(bu)穩(wen)定(ding),很(hen)快(kuai)分(fen)解(jie)產(chan)生(sheng)熒(ying)光(guang)。與(yu)傳(chuan)統(tong)檢(jian)測(ce)方(fang)法(fa)相(xiang)比(bi),不(bu)同(tong)之(zhi)處(chu)在(zai)於(yu)幾(ji)分(fen)鍾(zhong)內(nei)便(bian)可(ke)獲(huo)得(de)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo),而(er)且(qie)熒(ying)光(guang)光(guang)度(du)計(ji)是(shi)便(bian)攜(xie)式(shi)的(de),使(shi)用(yong)非(fei)常(chang)方(fang)便(bian),適(shi)用(yong)於(yu)現(xian)場(chang)檢(jian)測(ce),這(zhe)種(zhong)技(ji)術(shu)可(ke)以(yi)用(yong)於(yu)檢(jian)測(ce)微(wei)小(xiao)的(de)汙(wu)染(ran)物(wu)水(shui)平(ping)以(yi)及(ji)食(shi)品(pin)加(jia)工(gong)設(she)備(bei)及(ji)其(qi)表(biao)麵(mian)的(de)清(qing)潔(jie)程(cheng)度(du)的(de)檢(jian)測(ce)。
3 PCR檢測技術
聚合酶鏈反應技術即PCR(polymerase chain reaction),該技術是在1971年首先被Kleppe等提出,1985年才作為一種檢測方法獲得認可。PCR檢測技術是一種聚合酶鏈反應,其采用變性―退火―延伸三個步驟使DNA基因能夠在體外實現解旋解鏈,類似於一種體外增加、複製形式。理論上可在2h內將一個DNA分子擴增到106~109倍,采用瓊脂糖凝膠電泳檢測PCR擴增產物的熒光條帶。
目前PCR技術廣泛用於生命科學的許多學科中。在食品微生物檢測領域,PCR可用於快速檢測食品中的微生物含量。常用的主要有免疫PCR、實時熒光定量PCR、多重PCR、反轉錄PCR和實時定量PCR等。史雲等建立了用於肉及肉製品中大腸杆菌的兩重PCR檢測方法,但該方法需要較長的時間的樣品純化處理,且對操作人員的專業知識的要求也較高。
4 生物傳感器檢測技術
生物傳感器主要是以生物化學傳感技術為基礎,用抗體、酶、細胞等作為識別元件,並與信號轉換器和電子測量儀聯合構成的一種分析工具。目前已經成熟的商品化的傳感器有免疫傳感器、酶傳感器、DNA雜交傳感器、微生物傳感器、分子印跡傳感器等。生物傳感器具有諸多優點,如高靈敏度、高選擇性、較好的穩定性、低成本、且能在複雜的體係中快速在線監測。現在用於信號傳導的方法有表麵聲波傳導、電氣化學方法和光學傳導法。用於食品微生物檢測的主要是免疫傳感器和基因傳感器,原理是利用DNA雜za交jiao和he抗kang原yuan抗kang體ti反fan應ying進jin行xing檢jian測ce,再zai將jiang其qi轉zhuan換huan為wei光guang信xin號hao或huo電dian信xin號hao並bing通tong過guo儀yi器qi放fang大da輸shu出chu。生sheng物wu傳chuan感gan器qi的de分fen子zi識shi別bie元yuan件jian的de載zai體ti可ke采cai用yong多duo種zhong材cai料liao,利li用yong較jiao多duo的de是shi光guang纖xian、熒光光度計等。殷湧光等人利用抗體免疫吸附反應,采用一次抗體――抗kang原yuan一yi二er次ci抗kang體ti的de夾jia心xin法fa將jiang膠jiao體ti金jin複fu合he抗kang體ti作zuo為wei二er次ci抗kang體ti大da幅fu度du增zeng加jia質zhi量liang,並bing延yan長chang膠jiao體ti金jin複fu合he抗kang體ti與yu微wei生sheng物wu的de結jie合he過guo程cheng,放fang大da和he穩wen定ding信xin號hao,從cong而er顯xian著zhu提ti高gao檢jian測ce精jing度du。
5 免疫磁珠技術(IMS)
mianyicizhujishushiyizhongdachangganjundefenlijishu。qiyuanlishiyicizhuweikangtizaiti,cizhuhedachangganjunjiehe,tongguocililaishixianlixueyidongjinerjiangdachangganjunjinxingfenli。yuqitadexijunfenlifangfaxiangbi,mianyicizhujishuzaihendachengdushangtigaoleyangbenzhongbingyuanxingfurongxuexinghujundejiancexiaolv。mianyicizhujishukeyikuaisudizaibutongjunzhongdeyangbenzhongchulibutongdeweishengwu,gaifangfakeyidafududitishengjiancexiaolv。
6 自動化儀器
自動免疫測定分析儀誕生於20世紀70年(nian)代(dai)。隨(sui)著(zhe)科(ke)技(ji)的(de)發(fa)展(zhan),自(zi)動(dong)免(mian)疫(yi)測(ce)定(ding)分(fen)析(xi)儀(yi)在(zai)各(ge)領(ling)域(yu)的(de)應(ying)用(yong)也(ye)越(yue)來(lai)越(yue)多(duo),該(gai)儀(yi)器(qi)使(shi)用(yong)簡(jian)單(dan),無(wu)太(tai)多(duo)操(cao)作(zuo)幹(gan)擾(rao),既(ji)省(sheng)時(shi)省(sheng)力(li),又(you)大(da)大(da)提(ti)高(gao)了(le)檢(jian)測(ce)的(de)精(jing)確(que)度(du)和(he)靈(ling)敏(min)度(du)。這(zhe)種(zhong)自(zi)動(dong)酶(mei)標(biao)免(mian)疫(yi)測(ce)試(shi)係(xi)統(tong)目(mu)前(qian)在(zai)國(guo)內(nei)外(wai)是(shi)酶(mei)免(mian)疫(yi)自(zi)動(dong)化(hua)係(xi)統(tong)中(zhong)應(ying)用(yong)最(zui)為(wei)廣(guang)泛(fan)的(de)一(yi)種(zhong)。但(dan)是(shi)由(you)於(yu)與(yu)其(qi)配(pei)套(tao)的(de)試(shi)劑(ji)昂(ang)貴(gui),從(cong)而(er)限(xian)製(zhi)了(le)其(qi)在(zai)基(ji)層(ceng)實(shi)驗(yan)室(shi)的(de)使(shi)用(yong)。
7 基因芯片技術
基因芯片技術(gene chip)是20世紀90年代興起的生物技術,也叫DNA微陣列(DNA mi―croarray)。采用原位合成(in situ synthesis)或顯微打印方法,將數以萬計的DNA探針固化在支持物表麵,產生二維DNA探針陣列,接著與標記的樣品進行雜交,通過檢測雜交信號來實現對生物樣品快速、並行、高gao效xiao地di檢jian測ce,由you於yu它ta常chang用yong矽gui芯xin片pian作zuo為wei固gu相xiang支zhi持chi物wu,而er且qie製zhi備bei中zhong運yun用yong了le計ji算suan機ji芯xin片pian的de製zhi備bei技ji術shu,所suo以yi稱cheng為wei基ji因yin芯xin片pian技ji術shu。基ji因yin芯xin片pian可ke以yi對dui食shi品pin中zhong的de致zhi病bing菌jun實shi行xing高gao通tong量liang和he平ping行xing檢jian測ce,一yi次ci實shi驗yan就jiu可ke以yi得de出chu全quan部bu檢jian測ce結jie果guo。另ling外wai整zheng個ge檢jian測ce在zai很hen短duan時shi間jian內nei即ji可ke得de出chu檢jian測ce結jie果guo,且qie敏min感gan性xing高gao,特te異yi性xing強qiang。但dan是shi也ye有you一yi些xie問wen題ti:目mu前qian的de基ji因yin芯xin片pian一yi般ban都dou采cai用yong熒ying光guang標biao記ji,因yin此ci需xu要yao昂ang貴gui的de芯xin片pian製zhi作zuo係xi統tong以yi及ji激ji光guang共gong聚ju焦jiao掃sao描miao儀yi,另ling外wai操cao作zuo過guo程cheng對dui工gong作zuo人ren員yuan要yao求qiu有you很hen高gao的de專zhuan業ye素su質zhi等deng等deng。所suo以yi基ji因yin芯xin片pian的de製zhi備bei技ji術shu限xian製zhi其qi應ying用yong而er且qie還hai需xu改gai進jin。
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