近年來中藥製劑的發展比較迅速，但在純中藥製劑中添加化學藥，嚴重違反了國家法規，威脅患者的健康。如治療男性性功能障礙的“純中藥”中加進“西地那非”；在減肥藥中加進西布曲明或能導致人出現甲亢症狀的甲狀腺激素等。因此必須建立快速、靈敏、可靠的分析檢測方法，為純中藥製劑驗明正身。液相色譜-質譜聯用(LC／MS)法以其高專屬性的上風廣泛應用於藥物的定性檢測中，本文建立了LC／MSfayongyujiancechunzhongyaojiangtangyaowuzhongshifoufeifachanrenhuaxuejiangtangyaowugeliebenniao。geliebenniaoweidierdaihuangxianniaoleiyaowu
，ruoyongliangbawobudang，jiyifashengdixuetangzheng。

 

1
、儀器與試藥

 

美國Finnigan公司LCQ型液相色譜(質譜聯用儀，包括電噴霧離子源(ESI)以及LCQ數據處理係統，並配有直接進樣用注射泵和250μL進樣器；日本島津公司HPLC係統(包括LC一10AD泵，Rheodyne7125進樣閥)。

 

格列本脲對照品(純度為99.5％，沈陽藥科大學藥劑教研室)；6種純中藥降糖藥物(遼寧省藥品檢驗所提供
，分別為不同廠家6個批次：20030108，200203O2，20020601，010401，20020621和20010313)；甲醇，乙腈(色譜純，天津市康科德科技有限公司)，甲酸(分析純，天津市博迪化工有限公司)
，水為二次重蒸水。

 

2、實驗方法

 

2.1 色譜條件色譜柱：ZorbaxEclipseXDB-C8柱(5μm粒徑，150×4.6mm，Agilent)
；活動相：乙腈-水-甲酸(70：30：1)；流速：O.5mL/min
；柱溫：室溫；進樣量5OμL。

 

2.2 質譜條件電噴霧離子源，正離子檢測，離子源噴射電壓：4.50kV；毛細管溫度：200℃
；毛細管電壓：6.25V；鞘氣流速：1.05L/min
；輔助氣流速：O.15L/min
；檢測方式：一級全掃描方式
、二級全掃描方式、三級全掃描方式和選擇離子監測方式(SIM)。

 

2.3 格列本脲標準溶液的配製精密稱取一定量的對照品置容量瓶中加人活動相溶解並稀釋至刻度，使濃度為400μg/mL。

 

2.4 受試溶液的配製取不同批號的被試膠囊各10粒
，取出內容物分別混勻
，將相當於1粒膠囊內容物重量的樣品分別置10mL具塞玻璃試管中，加進3mL甲醇，渦流2min，超聲20min
，離心10min，取上清液用於分析測定。

 

3
、實驗結果

 

3.1 格列本脲的色譜和質譜行為采用正離子檢測方式對格列本脲對照品進行LC／MS分析
，其保存時間為6.4min
；多級質譜分析結果，在一級全掃描質譜分析中產生的準分子離子[M H] 峰為m／z494，[M Na] 峰為m／z516，[2M H] 峰為m／z987，[2M Ma] 峰為m／zlO09
，在二級全掃描質譜分析中
，分子中胍基左側的酰胺鍵斷裂產生m／z369的碎片離子
，進一步對m／z369進行三級全掃描質譜分析
，主要產生左側酰胺鍵斷裂天生的碎片離子m／z169，總結其裂解途徑，為實際樣品中化合物的鑒定提供了可靠的依據。

 

3.2 待測樣品的檢測結果在相同的色譜及質譜條件下對6種純中藥製劑的甲醇提取液進行LC／MS分析，均檢測到色譜行為與格列本脲對照品相同的化合物
，而且在相應的一級全掃描質譜分析中檢測到與格列本脲相同的準分子離子m／z494；為wei進jin一yi步bu確que定ding所suo檢jian測ce到dao化hua合he物wu的de結jie構gou，對dui其qi進jin行xing多duo級ji質zhi譜pu分fen析xi
，該gai化hua合he物wu的de二er級ji及ji三san級ji全quan掃sao描miao質zhi譜pu與yu格ge列lie本ben脲niao對dui照zhao品pin完wan全quan相xiang同tong
，由you此ci可ke以yi證zheng實shi在zai6種被試中藥降糖藥物中所檢測到的化合物為化學藥格列本脲。

 

4、討論

 

文獻中對格列本脲的檢測方法有紫外檢測法、熒(ying)光(guang)檢(jian)測(ce)法(fa)和(he)質(zhi)譜(pu)檢(jian)測(ce)法(fa)。中(zhong)藥(yao)製(zhi)劑(ji)中(zhong)通(tong)常(chang)都(dou)含(han)有(you)多(duo)種(zhong)中(zhong)藥(yao)材(cai)，每(mei)種(zhong)藥(yao)材(cai)中(zhong)均(jun)含(han)有(you)多(duo)種(zhong)組(zu)分(fen)
，采(cai)用(yong)紫(zi)外(wai)檢(jian)測(ce)法(fa)或(huo)熒(ying)光(guang)檢(jian)測(ce)法(fa)對(dui)中(zhong)藥(yao)提(ti)取(qu)液(ye)進(jin)行(xing)檢(jian)測(ce)時(shi)，由(you)於(yu)選(xuan)擇(ze)性(xing)不(bu)強(qiang)，在(zai)幹(gan)擾(rao)組(zu)分(fen)多(duo)的(de)情(qing)況(kuang)下(xia)，對(dui)待(dai)測(ce)物(wu)的(de)色(se)譜(pu)分(fen)離(li)提(ti)出(chu)了(le)更(geng)高(gao)的(de)要(yao)求(qiu)，因(yin)此(ci)可(ke)能(neng)會(hui)產(chan)生(sheng)假(jia)陽(yang)性(xing)結(jie)果(guo)。本(ben)文(wen)采(cai)用(yong)LC／MS技(ji)術(shu)
，將(jiang)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)的(de)高(gao)分(fen)離(li)能(neng)力(li)與(yu)質(zhi)譜(pu)分(fen)析(xi)的(de)高(gao)選(xuan)擇(ze)性(xing)相(xiang)結(jie)合(he)，對(dui)純(chun)中(zhong)藥(yao)製(zhi)劑(ji)中(zhong)非(fei)法(fa)摻(chan)進(jin)的(de)化(hua)學(xue)降(jiang)糖(tang)藥(yao)格(ge)列(lie)本(ben)脲(niao)進(jin)行(xing)多(duo)級(ji)質(zhi)譜(pu)分(fen)析(xi)

，對(dui)其(qi)進(jin)行(xing)了(le)結(jie)構(gou)確(que)證(zheng)

，增(zeng)強(qiang)了(le)檢(jian)測(ce)結(jie)果(guo)的(de)可(ke)信(xin)度(du)。該(gai)法(fa)靈(ling)敏(min)度(du)高(gao)
，選(xuan)擇(ze)性(xing)強(qiang)
，對(dui)該(gai)中(zhong)藥(yao)製(zhi)劑(ji)的(de)質(zhi)量(liang)控(kong)製(zhi)具(ju)有(you)現(xian)實(shi)意(yi)義(yi)。