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一、目的
為證實在利用與串聯四級杆質譜儀聯用的 ACQUITY UPLC® I-Class係統進行超高效色譜生物分析時，能夠將分析物從複雜基質中分離出來。
二、背景
精確檢測生物分析樣品需要一種具高特異性且高靈敏度的方法。LC/MS/MS已經成為首選的方法；該方法的特異性是依賴於采用色譜分離來分離分析物與內源性基質組分，以及在質譜儀中采用多反應監測技術(MRM)進行檢測。
為實現分析的耐受性，應使待檢測的分析物與內源性基質峰(例如磷脂)分離，否則可能會導致離子抑製並由此導致結果不可重現。
通常會權衡生物分析的分析速度與分離度,以達到最佳的色譜分析效果。較長的分離時間會使分離度更佳，但會使通量減少。
raner，suizhexiangguanfaguirijianyange，yijiduifenxilingmindudeyaoqiuzhujiantigao，duisepuxingnengyetichulegenggaodeyaoqiu。liruganxuebanyijiweiliangcaiyangzheyangdecaiyangjishuyijingduidangqianfangfadejiancejixiantichuletiaozhan。
三、解決方案
ACQUITY UPLC I-Class係(xi)統(tong)專(zhuan)為(wei)進(jin)行(xing)超(chao)高(gao)效(xiao)色(se)譜(pu)分(fen)離(li)而(er)設(she)計(ji)。它(ta)的(de)先(xian)進(jin)技(ji)術(shu)可(ke)以(yi)使(shi)即(ji)使(shi)在(zai)較(jiao)高(gao)係(xi)統(tong)背(bei)景(jing)壓(ya)力(li)下(xia)工(gong)作(zuo)時(shi)，也(ye)能(neng)很(hen)好(hao)的(de)控(kong)製(zhi)擴(kuo)散(san)以(yi)及(ji)譜(pu)帶(dai)擴(kuo)展(zhan)。這(zhe)些(xie)因(yin)素(su)使(shi)得(de)在(zai)進(jin)行(xing)生(sheng)物(wu)分(fen)析(xi)時(shi)能(neng)夠(gou)采(cai)用(yong)更(geng)長(chang)的(de)分(fen)析(xi)色(se)譜(pu)柱(zhu)，同(tong)時(shi)也(ye)不(bu)會(hui)減(jian)少(shao)通(tong)量(liang)，還(hai)能(neng)夠(gou)產(chan)生(sheng)非(fei)常(chang)尖(jian)銳(rui)的(de)分(fen)析(xi)峰(feng)。
一超高效UPLC/MS/MS性能實例如圖1所示。從中我們可以觀察到氟替卡鬆丙酸酯及昔美酸沙美特羅已從幹血斑中分離出來。該次分析是在2.1 x 150 mm ACQUITY UPLC C 18 1.7-ìm色譜柱上進行，並用50:85甲醇/氫氧化銨水溶液梯度梯度洗脫10分鍾。橙色圖譜表示正離子全掃描MS數據；沙美特羅及氟替卡鬆丙酸酯的MRM譜圖已用藍色分別表示。
從中我們可以看出，幹血斑中含有大量幹擾物質，這些幹擾物質是來自於添加至板上的化學藥品。超高效ACQUITY UPLC I-Class係統可產生非常尖銳的峰形，可在無基質幹擾下定量兩種藥物分子。
進一步說明該係統的超高效，將氟替卡鬆丙酸酯及昔美酸沙美特羅添加至大鼠血漿，並利用乙腈使其沉澱(比例2:1)。於該實例中，經時5分鍾，利用5:95甲醇/甲酸水溶液梯度來洗脫分析物，如圖2
上述數據說明，如藍色所示的背景全掃描MS色譜的複雜程度比幹血斑更高。橙色線表示兩種藥物化合物的MRM信號，在2.58分鍾時洗脫出沙美特羅，且在2.65分鍾時洗脫出氟替卡鬆丙酸酯。自UPLC/MS/MS數據可以看出，ACQUITY UPLC I-Class係統可以超高效使已沉澱血漿樣品中的內源性物質與分析物分離，因此可準確且可靠地定量分析物。
四、小結
ACQUITY UPLC I-Class係統可提供最高水平的色譜性能，提供極佳的分布特性，以及由於增加的背壓能力因而可使用長度更長的色譜柱。使用超高效UPLCjinxingshengwufenxikechanshengjianruidefenxiwufeng，yinerkechanshengzuidadelingminduyijizuigaodefenlidu，bingshiyangpinzhongneiyuanxingwuzhidegongrongchuzuishao。gaixitongdegaobeiyayouliyushiyongjiaochangdechaogaoxiaosepuzhu，yunxingshijianjinwei5至及10分鍾。
