為什麼要進行微生物限度檢測方法的驗證?是為了確認所采用方法適合食品、藥品細菌
、黴菌、酵母菌數測定。照驗證過的檢查法和檢驗條件進行供試品細菌
、黴菌
、酵母菌數檢查能保證檢驗結果的準確、可靠。

 

驗證過程中你將會遇到的難點問題

1、食品、藥品中汙染的微生物處於不穩定狀態，微生物種類具有不確定性；

2、在食品、藥品生產各個環節中, 微生物汙染存在著不均勻性；

3、無(wu)論(lun)是(shi)無(wu)抑(yi)菌(jun)性(xing)藥(yao)物(wu)還(hai)是(shi)抑(yi)菌(jun)性(xing)藥(yao)物(wu)都(dou)要(yao)進(jin)行(xing)微(wei)生(sheng)物(wu)限(xian)度(du)檢(jian)查(zha)，特(te)別(bie)是(shi)汙(wu)染(ran)於(yu)抑(yi)菌(jun)藥(yao)物(wu)中(zhong)的(de)微(wei)生(sheng)物(wu)在(zai)一(yi)定(ding)條(tiao)件(jian)下(xia)可(ke)以(yi)穩(wen)定(ding)存(cun)在(zai)一(yi)段(duan)時(shi)間(jian)
，雖(sui)然(ran)它(ta)們(men)可(ke)能(neng)受(shou)到(dao)損(sun)傷(shang)，但(dan)未(wei)死(si)亡(wang)，如(ru)服(fu)用(yong)至(zhi)人(ren)體(ti)內(nei), 當條件適宜時仍可生長繁殖。

4、某些藥物在試驗條件下呈現抑菌作用並幹擾待檢菌的檢出或計數, 但當服用後受到胃液及腸液的稀釋, 抑菌作用減弱或直接靜脈注射入血液, 細菌便可複蘇並繁殖, 對人體造成危害。

5
、任何一種抑菌藥物均有一定的抑菌範圍，即抗菌譜。相當多的抗細菌藥物對真菌毫無作用。對所有菌類均敏感的藥物幾乎不存在。

6、細xi菌jun對dui抑yi菌jun藥yao物wu有you適shi應ying性xing
，耐nai藥yao性xing致zhi病bing菌jun株zhu在zai臨lin床chuang上shang屢lv見jian不bu鮮xian
，所suo以yi抑yi菌jun藥yao物wu內nei是shi可ke能neng存cun在zai微wei生sheng物wu並bing可ke對dui人ren體ti健jian康kang造zao成cheng危wei害hai的de
，因yin此ci對dui抑yi菌jun性xing藥yao物wu也ye有you必bi要yao進jin行xing微wei生sheng物wu限xian度du檢jian查zha，但dan抑yi菌jun性xing藥yao物wu在zai檢jian查zha過guo程cheng中zhong會hui有you明ming顯xian的de抑yi菌jun作zuo用yong，這zhe在zai很hen大da程cheng度du上shang影ying響xiang了le微wei生sheng物wu的de檢jian出chu。

具備這些驗證條件
，你就可以進行驗證試驗了

1
、驗證實驗的設施、設備、器具和材料

2
、驗證試驗用的稀釋劑( 液) 、衝洗液

3、具抑菌性樣品處理方法

培養基稀釋法：該法一般適合於抑菌作用不是很強的供試品。

化學試劑中和法

薄膜過濾法該法：常見的檢查方法，適合於可濾過的供試品，特別是無菌檢查。

離心沉澱法：常用於抑菌活性較強而又無法直接過濾的供試品
，特別是不溶於水的固體中藥製劑。

 

驗證步驟 

1、根據樣品特性，製定檢驗方法和檢驗條件
；

2
、保證驗證試驗所用的儀器

、培養基和試劑等均符合試驗要求；

3、按製定的方法進行試驗
；

4
、根據驗證結果，判斷是否符合驗證的標準。若符合，按驗證的方法和條件進行藥品的微生物限度檢查；若不符合，應重新設立驗證方案，再進行驗證，直至驗證結果符合設立的驗證標準。

Tips：驗證時，按供試液的製備和細菌
、黴菌及酵母菌計數所規定的方法及要求進行。對各試驗菌的回收率應逐一進行驗證。驗證試驗至少應進行3次獨立的平行試驗
，並分別計算各試驗菌每次試驗的回收率。

驗證用菌株

細菌計數驗證用菌株：大腸杆菌、金黃色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌

黴菌、酵母菌計數驗證用菌株：白色念珠菌、黑曲黴

菌株選擇原則：代表性、普遍性、低或非致病性，標準菌株（或該藥品中常見汙染菌）

菌株的要求：不得超過5代、采用適宜的方法保存、加菌量：50-100cfu。     
                   

總結 

微生物學檢查是食品、藥品常規安全性檢查的重要組成部分，驗證工作十分繁瑣，對準確檢測出食品、藥品中微生物的真實含量具有一定的指導意義和實用價值，是食品、藥品檢測環節不可或缺的步驟。