1、培養基的傾注適宜溫度約45℃。培養基放置於手心感覺不燙,但是放置於手背感覺燙時,培養基溫度大約就是45℃。peiyangjiqingzhushiwendutaigaodehua,ninggushijianjiaochang,lingwaimingaishanghuiyoudalianglengningshui,buliyuhouxushiyan。wendutaidizerongyichuxiandaobanguochengzhongpingzhongpeiyangjibufenninggudexianxiang。
2、有些培養基需要加入添加成分,這些添加成分在加入前應先放置到室溫,避免冷的液體造成瓊脂凝結或形成片狀物。
3、目(mu)前(qian)多(duo)數(shu)實(shi)驗(yan)室(shi)培(pei)養(yang)基(ji)滅(mie)菌(jun)後(hou)會(hui)放(fang)置(zhi)水(shui)浴(yu)或(huo)者(zhe)烘(hong)箱(xiang)中(zhong),需(xu)使(shi)用(yong)的(de)時(shi)候(hou)拿(na)出(chu)來(lai)直(zhi)接(jie)倒(dao)板(ban)。但(dan)培(pei)養(yang)基(ji)靜(jing)置(zhi)時(shi)間(jian)不(bu)宜(yi)過(guo)長(chang),靜(jing)置(zhi)時(shi)間(jian)一(yi)般(ban)不(bu)超(chao)過(guo)4小時。靜置時間過長,培養基中瓊脂可能會少量凝固,形成類似絮狀析出。
4、在(zai)實(shi)驗(yan)過(guo)程(cheng)中(zhong)不(bu)可(ke)避(bi)免(mian)因(yin)特(te)殊(shu)情(qing)況(kuang)而(er)導(dao)致(zhi)未(wei)倒(dao)板(ban)培(pei)養(yang)基(ji)已(yi)凝(ning)固(gu),凝(ning)固(gu)後(hou)培(pei)養(yang)基(ji)可(ke)重(zhong)新(xin)加(jia)熱(re)溶(rong)解(jie)。一(yi)般(ban)來(lai)說(shuo)沸(fei)水(shui)浴(yu)或(huo)者(zhe)電(dian)磁(ci)爐(lu)加(jia)熱(re),不(bu)能(neng)重(zhong)新(xin)再(zai)滅(mie)一(yi)次(ci)菌(jun)。
培養基的傾倒方法主要涉及以下幾個步驟:
1.溫度調節。培養基傾注的適宜溫度大約為45℃。ruguowenduguogao,huidaozhininggushijianyanchang,qiemingaishanghuiyoudalianglengningshui,buliyuhouxushiyan。ruguowenduguodi,zekenengdaozhidaobanguochengzhongpingzhongpeiyangjibufenninggu。
2.添加成分。如果培養基需要加入添加成分,這些成分在加入前應先放置到室溫,以避免冷的液體造成瓊脂凝結或形成片狀物。
3.靜置時間。培養基滅菌後應放置在水浴或烘箱中,使用前拿出直接倒板。培養基的靜置時間不宜過長,一般不超過4小時,以避免瓊脂少量凝固。
4.平板準備。倒皿前,平皿應保持在35℃~40℃的(de)溫(wen)度(du)。如(ru)果(guo)需(xu)要(yao)表(biao)麵(mian)接(jie)種(zhong),有(you)冷(leng)凝(ning)水(shui)的(de)平(ping)板(ban)表(biao)麵(mian)容(rong)易(yi)產(chan)生(sheng)蔓(man)延(yan)菌(jun)落(luo)。這(zhe)時(shi)可(ke)放(fang)在(zai)有(you)對(dui)流(liu)的(de)無(wu)菌(jun)淨(jing)化(hua)台(tai)中(zhong)吹(chui)幹(gan)培(pei)養(yang)基(ji)表(biao)麵(mian),但(dan)不(bu)能(neng)過(guo)度(du)幹(gan)燥(zao),否(fou)則(ze)培(pei)養(yang)過(guo)程(cheng)中(zhong)平(ping)板(ban)容(rong)易(yi)開(kai)裂(lie)。
5.傾注量。平板傾注量一般在18~20mL左右,如果培養時間超過48小時或培養溫度高於40℃,為防止水分過量蒸發導致平板開裂,傾注量一般為25mL左右。
6.bimianqipao。daopingbanshijinliangtiezhepingminbihuanmandaoru,jiangqipaoliuzaipingzidibu。ruguopingbanzhongyoushaoliangqipaodehua,keyibaqipaoqingyaodaopingbanbishang,zheyangbuhuiyingxiangjieguoguancha。
7.混合均勻。每個平板中加入10mL融化的瓊脂培養基並迅速往複搖動和轉圈晃動5~15次使培養基與接種物充分混合。
8.培養。待平板冷卻後翻轉並置於適當的溫度下培養。
在(zai)整(zheng)個(ge)操(cao)作(zuo)過(guo)程(cheng)中(zhong),需(xu)要(yao)注(zhu)意(yi)避(bi)免(mian)汙(wu)染(ran),使(shi)用(yong)前(qian)需(xu)將(jiang)裝(zhuang)有(you)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)瓶(ping)子(zi)或(huo)試(shi)管(guan)弄(nong)鬆(song),然(ran)後(hou)放(fang)在(zai)滾(gun)水(shui)或(huo)蒸(zheng)汽(qi)浴(yu)裏(li)進(jin)行(xing)溶(rong)解(jie),要(yao)小(xiao)心(xin)避(bi)免(mian)培(pei)養(yang)基(ji)過(guo)熱(re)變(bian)質(zhi)。已(yi)消(xiao)毒(du)培(pei)養(yang)皿(min)的(de)數(shu)量(liang)要(yao)比(bi)所(suo)測(ce)樣(yang)品(pin)的(de)數(shu)量(liang)多(duo)一(yi)個(ge)做(zuo)空(kong)白(bai)對(dui)照(zhao)。
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