操作方法二:
1.根據標準要求或對汙染情況的估計,選擇2~3個適宜稀釋度,分別在製10倍遞增稀釋的同時,以吸取該稀釋度的吸管移取1ml稀釋液於滅菌平皿中,每個稀釋度做兩個平皿。將涼至46℃營養瓊脂培養基注入平皿約15ml,並轉動平皿,混合均勻。同時將營養瓊脂培養基傾入加有1ml稀釋液(不含樣品)的滅菌平皿內作空白對照。待瓊脂凝固後,翻轉平板,置36±1℃溫箱內培養48±2h,取出計算平板內菌落數目,乘以稀釋倍數,即得每克(每毫升)樣品所含菌落總數。
2.傾注用培養基應在46℃shuiyuneibaowen,wenduguogaohuiyingxiangxijunshengchang,guodiqiongzhiyiyuningyinerbunengyujunyechongfenhunyun。ruwushuiyu,yingyipifuganshoujiaoreerbutangweiyi。qingzhupeiyangjideliangguidingbuyi,cong12~20ml不等,一般以15ml較為適宜,平板過厚可影響觀察,太薄又易於幹裂。傾注時,培基底部如有沉澱物,應將底部棄去,以免與菌落混淆而影響計數觀察。
3.為(wei)使(shi)菌(jun)落(luo)能(neng)在(zai)平(ping)板(ban)上(shang)均(jun)勻(yun)分(fen)布(bu),檢(jian)液(ye)加(jia)入(ru)平(ping)皿(min)後(hou),應(ying)盡(jin)快(kuai)傾(qing)注(zhu)培(pei)養(yang)基(ji)並(bing)旋(xuan)轉(zhuan)混(hun)勻(yun),可(ke)正(zheng)反(fan)兩(liang)個(ge)方(fang)向(xiang)旋(xuan)轉(zhuan),檢(jian)樣(yang)從(cong)開(kai)始(shi)稀(xi)釋(shi)到(dao)傾(qing)注(zhu)最(zui)後(hou)一(yi)個(ge)平(ping)皿(min)所(suo)用(yong)時(shi)間(jian)不(bu)宜(yi)超(chao)過(guo)20min,以防止細菌有所死亡或繁殖。
4.培養溫度一般為37℃(水產品的培養溫度,由於其生活環境水溫較低,故多采用30℃)。培養時間一般為48h,有些方法隻要求24h的培養即可計數。培養箱應保持一定的濕度,瓊脂平板培養48h後,培養基失重不應超過15%。
5.為(wei)了(le)避(bi)免(mian)食(shi)品(pin)中(zhong)的(de)微(wei)小(xiao)顆(ke)粒(li)或(huo)培(pei)基(ji)中(zhong)的(de)雜(za)質(zhi)與(yu)細(xi)菌(jun)菌(jun)落(luo)發(fa)生(sheng)混(hun)淆(xiao),不(bu)易(yi)分(fen)辨(bian),可(ke)同(tong)時(shi)作(zuo)一(yi)稀(xi)釋(shi)液(ye)與(yu)瓊(qiong)脂(zhi)培(pei)基(ji)混(hun)合(he)的(de)平(ping)板(ban),不(bu)經(jing)培(pei)養(yang),而(er)於(yu)4℃環境中放置,以便計數時作對照觀察。在某些場合,為了防止食品顆粒與菌落混淆不清,可在營養瓊脂中加入氯化三苯四氮唑(TTC),培養後菌落呈紅色,易於分別。

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