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大腸埃希菌、金黃色葡萄球菌、乙型付傷寒沙門菌、銅綠假單胞菌的新鮮培養物至10mL營養肉湯培養基中，35～37℃培養18～24小時；
分別取培養液1mL加0.9%無菌氯化鈉溶液，采用10倍遞增稀釋法，稀釋至10-5~10-7，製成每1ml含菌數10～100CFU的菌懸液。
【大腸埃希菌】取相當於1g或1mL供試品的供試液至100mL膽鹽乳糖培養基中，陽性菌對照加入大腸埃希菌10～100CFU，陰性菌對照加入金黃色葡萄球菌 10～100CFU，35～37℃培養18～24小時，取此培養物按《微生物限度檢查SOP》大腸埃希菌項下規定檢查。
【大腸菌群】取含適量（不少於10ml）的膽鹽乳糖發酵培養基管3支，分別加入含供試品1g或1mL 、0.1g或0.1mL、含供試品0.001g或0.001mL的供試液，陽性菌對照加入大腸埃希菌10～100CFU，陰性菌對照加入金黃色葡萄球菌 10～100CFU，35～37℃培養18～24小時，按《微生物限度檢查SOP》大腸菌群項下規定檢查。
【沙門菌】 取供試品10g或10mL，直接或處理後接種至適量（不少於200mL）的營養肉湯培養基中，用勻漿儀或其他適宜方法混勻，陽性菌對照加入沙門菌 10～100CFU，陰性菌對照加入金黃色葡萄球菌10～100CFU，35～37℃培養18～24小時。按《微生物限度檢查SOP》沙門菌項下規定檢查。
【銅綠假單胞菌】取相當於1g或1mL供試品的供試液至100mL膽鹽乳糖培養基中，陽性菌對照加入銅綠假單胞菌10～100CFU，陰性菌對照加入大腸埃希菌10～100CFU，35～37℃培養18～24小時。按《微生物限度檢查SOP》沙門菌項下規定檢查。
【金黃色葡萄球菌】取相當於1g或1mL供試品的供試液至100mL膽鹽乳糖培養基中，陽性菌對照加入金黃色葡萄球菌10～100CFU，陰性菌對照加入大腸埃希菌 10～100CFU，35～37℃培養18～24小時。按《微生物限度檢查SOP》金黃色葡萄球菌項下規定檢查。
取規定量供試液，如供試液含許多藥渣，先以500轉/分鍾離心3~5分鍾，取全部上清液，再以3000轉/分離心20分鍾，取下麵1mL液體，並將適量的稀釋劑洗滌管底的洗滌液一並移入同瓶增菌液中，培養，本法適用於中度抑菌作用的樣品。
在供試品溶液中加入相應的中和劑，以(yi)減(jian)除(chu)供(gong)試(shi)品(pin)中(zhong)抑(yi)菌(jun)成(cheng)分(fen)的(de)作(zuo)用(yong)，中(zhong)和(he)劑(ji)應(ying)對(dui)微(wei)生(sheng)物(wu)無(wu)毒(du)性(xing)，與(yu)抑(yi)菌(jun)成(cheng)分(fen)結(jie)合(he)後(hou)的(de)產(chan)物(wu)應(ying)對(dui)微(wei)生(sheng)物(wu)亦(yi)無(wu)毒(du)性(xing)，或(huo)有(you)毒(du)性(xing)但(dan)不(bu)影(ying)響(xiang)待(dai)檢(jian)菌(jun)的(de)檢(jian)出(chu)。
