1. 實驗前必須掌握與實驗相關的醫學微生物學、醫學寄生蟲學及醫學免疫學基礎理論。做好預習
，明確實驗目的與實驗內容。

2. 對於設計性實驗，在老師的指導下，注意發揮自身潛能，勤於思考，靈活掌握所學知識。

3. 在實驗過程中做到三嚴：嚴肅、嚴格、嚴謹。如實記錄實驗結果，按規定完成實驗報告。對於失敗實驗結果要分析原因，必要時重複實驗。

4. 嚴格遵守實驗室規則。

1.進實驗室穿工作服，離開時脫下，反折。

2.除必需教材、文具外，其他物品禁止帶入實驗室。

3.按規定位置就坐。保持實驗室安靜，不得隨意走動

、進出。

4.實驗室內禁止飲食、吸煙。謹防經口感染病原。

5.實驗操作應嚴格按實驗指導和教師的要求進行。

6.實驗過程中若不慎將傳染性標本汙染桌麵、手及其他物品時，應立即報告老師緊急處理，不得擅自處理。常見處理如下：

（1）皮膚破傷：先除盡異物，用無菌生理鹽水洗淨後

，塗以2%紅汞或2%碘酒，必要時進行包紮。

（2）灼傷：塗以凡士林油，5%鞣酸或2%苦味酸。

（3）化學藥品腐蝕傷：若為強酸
，先用大量清水衝洗，再以5%碳酸氫鈉或氫氧化銨溶液洗滌中和之；強堿腐蝕傷
，則先以大量清水衝洗後，再用5%醋酸或5%硼酸溶液洗滌中和之。若受傷部位是眼部
，經過上述步驟處理後，最後滴入橄欖油或液體石

臘1、2 滴，滋潤之。

（4）吸入病菌菌液：應立即吐入盛有消毒液的容器內消毒，並用1：1000高錳酸鉀漱口；根據菌類不同，必要時需服藥預防。

（5）細菌汙染衣物：應立即脫下，放入3%來蘇爾或3%氯胺液內浸泡半小時，或仔細包好經高壓蒸汽消毒後清洗。

（6）菌液汙染桌麵：傾倒適量2-3%來蘇爾或0.5% 84 消毒液於汙染處，浸泡半小時後抹去。若手上沾有活菌，應浸泡於上述消毒液10-20 分鍾後，再以肥皂水衝刷之。

7.看示教時
，未經允許，不得移動顯微鏡推進尺。

8.愛護實驗室器材及設備

，認真填寫實驗設備使用紀錄。不慎發生損壞時
，應立即報告老師，照章賠償。

9.實驗結束後，凡使用過的實驗器材必須放在指定地點
，如吸過菌液的吸管
，毛細吸管要投入含有2-3%來蘇爾或0.1%新潔爾滅的玻璃筒中，或置“待消毒”處，不得放在桌上，亦不可衝洗於水槽內。用過的波片也應放於含有消毒液的容器內。需要培養的實

驗材料集中後放入溫箱中培養。

10.實驗完畢，應及時清理實驗室（包括桌麵
，地麵
，試驗用具等），值日生打掃室內衛生，管好門窗
、水電。離開實驗室前，將雙手在消毒液內浸泡3-5分鍾，再用清水洗淨，方可離室。

（一）普通光學顯微鏡的基本結構

光學顯微鏡的基本結構包括光學和機械兩個部分。光學部分主要有目鏡
、物鏡、鏡筒
、內置光源（或反光鏡）、光闌等
；機械部分包括鏡座、鏡臂、調節螺栓、載物台、夾持器

、

轉換器
、粗調焦手輪及細調焦手輪等。（見圖1-1）

圖1 光學顯微鏡的基本結構示意圖

（二）顯微鏡（油鏡的使用）

 

顯微鏡的物鏡一般有低倍鏡、高倍鏡及油鏡。病原生物學實驗中最常用者為油鏡。

1.油鏡的原理 使用油鏡時需在玻片上滴加香柏油。由於從標本玻片上透過的光線，因介質密度不同，部分光線發生折射散失
，使射入物鏡光線減少（高倍鏡孔徑較大，影響不顯著），因油鏡的孔徑較小，進入的光線則不夠
，致使物象顯現不清。當在油鏡與標本片之間加香柏油後，香柏油折射率（n=1.515）和玻璃的折射率（n=1.52）,因此可增加進入透鏡的光線，使視野亮度加強。

2. 在油鏡頭上常有下列幾種標記：①放大倍數是90×或100/；若鏡筒的長度不變，顯微鏡的放大倍數=目鏡倍數乘以物鏡的倍數。②鏡頭下緣有一白色線圈或黑色線圈；③刻有

“油”或外文“HI”、“Oel”、“Oil”等字樣。④油鏡頭的長度大於低倍鏡和高倍鏡。

3. 使用方法

① 對光 轉動轉換器，將低倍鏡鏡頭（4 倍、10 倍）轉至載物台中央透光孔位置，打開透光光闌
，對光，直至目鏡中出現光線最明亮
、最均勻的視場為止。顯微鏡的光源可分為內置光源和外置照明。內置光源：接通電源
，按下底座的開關，電源打開即可。外置光源：將光圈放到最大位置，在用眼睛觀察目鏡的同時

，轉動反光鏡使其朝向光源（自然光或燈光）
，使視野中的光線最明、均(jun)勻(yun)。如(ru)靠(kao)近(jin)光(guang)源(yuan)，可(ke)用(yong)平(ping)麵(mian)反(fan)光(guang)鏡(jing)，如(ru)距(ju)光(guang)源(yuan)較(jiao)遠(yuan)
，可(ke)用(yong)凹(ao)麵(mian)反(fan)光(guang)鏡(jing)。根(gen)據(ju)所(suo)觀(guan)察(cha)的(de)標(biao)本(ben)
，升(sheng)降(jiang)集(ji)光(guang)器(qi)和(he)縮(suo)放(fang)光(guang)圈(quan)，以(yi)獲(huo)最(zui)佳(jia)光(guang)度(du)。一(yi)般(ban)染(ran)色(se)標(biao)本(ben)用(yong)油(you)鏡(jing)檢(jian)查(zha)時(shi)，光(guang)度(du)宜(yi)強(qiang)，可(ke)將(jiang)光(guang)圈(quan)開(kai)足(zu)，集(ji)光(guang)器(qi)上(shang)升(sheng)至(zhi)與(yu)載(zai)物(wu)台(tai)相(xiang)平(ping)；檢查未染色標本用低倍鏡或高

倍鏡觀察時，應適當縮小光圈，下降集光器，使光度減弱。

② 裝片 將標本片放置在工作台的夾持器中，用夾持起移動標本片至工作台開口中心（透光孔處）。

③ 調節焦距 通過旋轉粗調焦手輪，將載物台升到最高限定位置（製片不能觸到物鏡），此時已準備好調焦。使用4 倍或10 倍bei物wu鏡jing
，在zai目mu視shi目mu鏡jing的de同tong時shi，旋xuan轉zhuan粗cu調tiao手shou輪lun，使shi工gong作zuo台tai緩huan慢man下xia降jiang，在zai目mu視shi目mu鏡jing中zhong觀guan察cha到dao的de清qing晰xi的de圖tu像xiang時shi，再zai調tiao節jie光guang闌lan聚ju光guang鏡jing孔kong
，選xuan擇ze與yu物wu鏡jing相xiang匹pi配pei的de孔kong
，調tiao節jie微wei調tiao焦jiao手shou輪lun，使shi視shi野ye中zhong的de圖tu像xiang最zui清qing晰xi。用yong低di倍bei鏡jing找zhao出chu標biao本ben的de範fan圍wei，然ran後hou提ti高gao鏡jing筒tong，在zai標biao本ben的de待dai檢jian部bu位wei加jia一yi小xiao滴di香xiang柏bai油you
，慢man慢man將jiang油you鏡jing頭tou浸jin於yu油you中zhong
，但dan勿wu接jie觸chu玻bo片pian。然ran後hou
，自zi目mu鏡jing處chu一yi麵mian觀guan察cha
，一yi麵mian微wei轉zhuan動dong粗cu調tiao節jie器qi，使shi鏡jing筒tong徐xu徐xu上shang升sheng，待dai看kan到dao模mo糊hu物wu象xiang時shi，改gai用yong細xi調tiao節jie器qi調tiao至zhi物wu象xiang清qing晰xi。如ru果guo是shi滴di片pian標biao本ben，先xian滴di一yi滴di標biao本ben在zai玻bo片pian上shang，輕qing輕qing蓋gai上shang蓋gai玻bo片pian。加jia蓋gai玻bo片pian時shi，先xian將jiang蓋gai玻bo片pian的de一yi邊bian與yu在zai玻bo片pian上shang的de水shui滴di邊bian緣yuan接jie觸chu
，然ran後hou自zi一yi側ce輕qing輕qing放fang下xia，先xian在zai低di倍bei鏡jing下xia觀guan察cha，然ran後hou在zai高gao倍bei鏡jing下xia觀guan察cha，通tong過guo改gai變bian光guang圈quan的de大da小xiao或huo轉zhuan動dong細xi調tiao焦jiao手shou輪lun。

④ 還鏡 觀察完畢把鏡頭和載玻片上的油用3%乙醚擦淨。將低倍鏡轉成八字型.降下聚光器, 轉動粗調節器,使鏡台下移,以免接物鏡與集光器相碰受損。罩上鏡套，放回原處。