免疫印跡技術又稱Western印跡法,它將凝膠電泳與固相免疫結合,首先通過蛋白質電泳技術將需要區分的蛋白質轉移至固相載體如NC膜等上,再借助酶免疫、放射免疫等技術進行測定。該法能分離分子大小不同的蛋白質並確定其分子質量,常用於檢測多種病毒抗體或抗原。
免疫印跡技術又稱Western印跡法,它將凝膠電泳與固相免疫結合,首先通過蛋白質電泳技術將需要區分的蛋白質轉移至固相載體如NC膜等上,再借助酶免疫、放射免疫等技術進行測定。該法能分離分子大小不同的蛋白質並確定其分子質量,常用於檢測多種病毒抗體或抗原。
免疫斑點試驗(dotimmunobindingassay,DIBA)是利用硝酸纖維素膜(NC膜)或乙酸纖維素膜作為固相支持物,進行抗原—抗體反應的免疫學檢測方法。該法具有微量、快速、經濟、方便等特點,可用於檢測抗體或抗原。
免mian疫yi斑ban點dian技ji術shu的de原yuan理li是shi硝xiao酸suan纖xian維wei素su膜mo和he醋cu酸suan纖xian維wei素su膜mo具ju有you很hen強qiang的de靜jing電dian吸xi附fu力li,在zai中zhong性xing條tiao件jian下xia即ji可ke有you效xiao地di吸xi附fu蛋dan白bai質zhi等deng生sheng物wu大da分fen子zi,因yin而er將jiang抗kang原yuan吸xi附fu於yu纖xian維wei素su膜mo後hou,就jiu可ke利li用yong纖xian維wei素su膜mo作zuo為wei固gu相xiang載zai體ti進jin行xing抗kang原yuan—抗體反應。當加入抗體後(即ji可ke與yu膜mo上shang的de抗kang原yuan結jie合he,然ran後hou再zai加jia入ru帶dai有you標biao記ji物wu的de抗kang體ti,使shi標biao記ji通tong過guo抗kang抗kang體ti和he相xiang應ying抗kang體ti的de結jie合he間jian接jie地di交jiao聯lian於yu纖xian維wei素su膜mo上shang。加jia入ru標biao記ji物wu相xiang應ying的de底di物wu後hou,標biao記ji物wu即ji可ke與yu底di物wu作zuo用yong形xing成cheng不bu溶rong性xing產chan物wu,呈cheng現xian斑ban點dian狀zhuang著zhe色se,從cong而er判pan定ding結jie果guo。
根據所用的標記物不同,可分為辣根過氧化物酶免疫斑點試驗(使用辣根過氧化物酶作為抗抗體的標記物)、堿性磷酸酶免疫斑點試驗(使用堿性磷酸酶抗堿性磷酸酶複合物作為酶標記物)和金銀染色免疫斑點試驗(使用膠體金作為抗抗體的標記物)等。其中,最常用的是以辣根過氧化物酶標記係統為基礎的免疫斑點試驗。
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