由於氣泡的存在,會造成色譜圖上出現尖銳的噪聲峰,嚴重時會造成分析靈敏度下降;氣泡變大進入流路或色譜柱時會使流動相的流速變慢或不穩定,使基線起伏。
造成上述現象的主要原因有三條:一是流動相溶液中往往因溶解有氧氣或混入了空氣而形成氣泡;二是係統開始工作時未能將流路中的空氣驅趕幹淨;三是在注入樣品時不注意混入了空氣。
為了避免這類問題的出現,液相色譜實際分析過程中必須重視對流動相進行脫氣處理。
常用的脫氣方法有以下幾種:
1. 吹氦脫氣法 使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣,在0.1Mpa壓力下,以約60ml/min流速通入流動相10-15min以驅除溶解的氣體。此法使用於所有的溶劑,脫氣效果較好,但在國內因氦氣價格較貴,本法使用較少;
2. 加熱回流法 此法的脫氣效果較好;
3. 抽真空脫氣法 此時可使用微型真空泵,降壓至0.05-0.07MPa即可除區溶解的氣體。顯然使用水泵連接抽濾瓶和G4微(wei)孔(kong)玻(bo)璃(li)漏(lou)鬥(dou)可(ke)一(yi)起(qi)完(wan)成(cheng)過(guo)濾(lv)機(ji)械(xie)雜(za)質(zhi)和(he)脫(tuo)氣(qi)的(de)雙(shuang)重(zhong)任(ren)務(wu)。由(you)於(yu)抽(chou)真(zhen)空(kong)會(hui)引(yin)起(qi)混(hun)合(he)溶(rong)劑(ji)組(zu)成(cheng)的(de)變(bian)化(hua),故(gu)此(ci)法(fa)適(shi)用(yong)於(yu)單(dan)一(yi)溶(rong)劑(ji)體(ti)係(xi)脫(tuo)氣(qi)。對(dui)多(duo)元(yuan)溶(rong)劑(ji)體(ti)係(xi)應(ying)預(yu)先(xian)脫(tuo)氣(qi)後(hou)再(zai)進(jin)行(xing)混(hun)合(he),以(yi)保(bao)證(zheng)混(hun)合(he)後(hou)的(de)比(bi)例(li)不(bu)變(bian)。
4. 超聲波脫氣法 它是目前實驗室使用最廣泛的脫氣方法,將配製好的流動相連同容器一起放入超聲波水漕中脫氣10-20min即可。該方法操作簡便,基本能滿足日常分析的要求。
5. 在線真空脫氣法 把ba真zhen空kong脫tuo氣qi裝zhuang置zhi串chuan聯lian到dao儲chu液ye係xi統tong中zhong,並bing結jie合he膜mo過guo濾lv器qi,實shi現xian了le流liu動dong相xiang在zai進jin入ru輸shu液ye泵beng前qian的de連lian續xu真zhen空kong脫tuo氣qi。此ci法fa的de脫tuo氣qi效xiao果guo明ming顯xian優you於yu上shang述shu幾ji種zhong方fang法fa,並bing適shi用yong於yu多duo元yuan溶rong劑ji體ti係xi。
其二,在液相色譜係統開始工作前,可以用注射器連接恒流泵的排空閥,抽入流動相,將流路中的空氣驅趕幹淨。
其三,在注入樣品前注意排出樣品注射器中的空氣。
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