革蘭氏染色法是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,1884年由丹麥醫師Gram創立。
xijunxianjingjianxingranliaojiejingranse,erjingdianyemeiranhou,yongjiujingtuose,zaiyidingtiaojianxiayoudexijuncisebubeituoqu,youdekebeituoqu,yincikebaxijunfenweiliangdalei,qianzhejiaozuogelanshiyangxingjun(G+),後者為革蘭氏陰性菌(G―)。weiguanchafangbian,tuosehouzaiyongyizhonghongseranliaorujianxingbohongdengjinxingfuran。yangxingjunrengdaizise,yinxingjunzebeiranshanghongse。youyabaodeganjunhejuedaduoshuheqiujun,yijisuoyoudefangxianjunhezhenjundouchenggelanshizhengfanying;弧菌,螺旋體和大多數致病性的無芽胞杆菌都呈現負反應。
革(ge)蘭(lan)氏(shi)陽(yang)性(xing)菌(jun)和(he)革(ge)蘭(lan)氏(shi)陰(yin)性(xing)菌(jun)在(zai)化(hua)學(xue)組(zu)成(cheng)和(he)生(sheng)理(li)性(xing)質(zhi)上(shang)有(you)很(hen)多(duo)差(cha)別(bie),染(ran)色(se)反(fan)應(ying)不(bu)一(yi)樣(yang)。現(xian)在(zai)一(yi)般(ban)認(ren)為(wei)革(ge)蘭(lan)氏(shi)陽(yang)性(xing)菌(jun)體(ti)內(nei)含(han)有(you)特(te)殊(shu)的(de)核(he)蛋(dan)白(bai)質(zhi)鎂(mei)鹽(yan)與(yu)多(duo)糖(tang)的(de)複(fu)合(he)物(wu),它(ta)與(yu)碘(dian)和(he)結(jie)晶(jing)紫(zi)的(de)複(fu)合(he)物(wu)結(jie)合(he)很(hen)牢(lao),不(bu)易(yi)脫(tuo)色(se),陰(yin)性(xing)菌(jun)複(fu)合(he)物(wu)結(jie)合(he)程(cheng)度(du)底(di),吸(xi)附(fu)染(ran)料(liao)差(cha),易(yi)脫(tuo)色(se),這(zhe)是(shi)染(ran)色(se)反(fan)應(ying)的(de)主(zhu)要(yao)依(yi)據(ju)。 另外,陽性菌菌體等電點較陰性菌為低,在相同PH條(tiao)件(jian)下(xia)進(jin)行(xing)染(ran)色(se),陽(yang)性(xing)菌(jun)吸(xi)附(fu)堿(jian)性(xing)染(ran)料(liao)很(hen)多(duo),因(yin)此(ci)不(bu)易(yi)脫(tuo)去(qu),陰(yin)性(xing)菌(jun)則(ze)相(xiang)反(fan)。所(suo)以(yi)染(ran)色(se)時(shi)的(de)條(tiao)件(jian)要(yao)嚴(yan)格(ge)控(kong)製(zhi)。例(li)如(ru),在(zai)強(qiang)堿(jian)的(de)條(tiao)件(jian)下(xia)進(jin)行(xing)染(ran)色(se),兩(liang)類(lei)菌(jun)吸(xi)附(fu)堿(jian)性(xing)染(ran)料(liao)都(dou)多(duo),都(dou)可(ke)呈(cheng)正(zheng)反(fan)應(ying);PH很低時,則可都呈負反應。此外,兩類菌的細胞壁等對結晶紫―碘複合物的通透性也不一致,陽性菌透性小,故不易被脫色,陰性菌透性大,易脫色。所以脫色時間,脫色方法也應嚴格控製。 革蘭氏染色法一般包括初染、媒染、脫色、複染等四個步驟,具體操作方法是:
1)塗片固定。
2)草酸銨結晶紫染1分鍾。
3)自來水衝洗。
4)加碘液覆蓋塗麵染1分鍾。
5)水洗,用吸水紙吸去水分。
6)加95%酒精數滴,並輕輕搖動進行脫色,30秒後水洗,吸去水分。
7)蕃紅梁色液(稀)染10秒鍾後,自來水衝洗。幹燥,鏡檢。
染色的結果,革蘭氏正反應菌體都呈紫色,負反應菌體都呈紅色。
下麵是革蘭氏陰性杆菌和革蘭氏陽性杆菌。


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