培養基是是發酵過程或動植物細胞大量培養中供微生物或動、植物細胞的生長、繁殖或積累代謝產物,yihechengshengwuhuagongchanpinsuobixudeyingyangjizhi。peiyangjidezhibeiheshiyongshiweishengwushiyanshijiancegongzuodezhongyaohuanjie。jinxienianlaishangpinhuadeganzaopeiyangjichengpinpeiyangjifazhanxunsu，danyouyugaixingyedeshengchangongyishebeihaixiangduibijiaoluohou,質控手段也不夠健全,市場監管又比較薄弱,這些都影響培養基的質量本文對微生物實驗室在培養基購置貯存
、製備
、使用等方麵應采取的質量控製措施進行討論,以便微生物實驗室不斷完善和提高培養基的質控水平。

1 培養基的購置與驗收

1.1 購置

微生物檢驗用的各種藥品、試劑和幹粉培養基必須是專業廠家生產的產品,質量必須符合有關的質量標準,並且生產商應提供培養基的名稱
、產品編號、批號
、各種成分和任何補充成分
、培養基使用前的pH值貯存資料及有效期等信息,以利於使用者對產品進行記錄和比較。應選擇產品市場信譽度高、有質量保證能力和服務保證能力的企業
；企業是否通過了質量管理體係的認證是較為客觀的評價指標。

1.2 驗收

購買的培養基到貨後，應有專人做好接受和驗收工作，應仔細核對生產企業提供的資料、培養基名稱、規格數量、外觀特征
、批號
、保質期是否符合要求。每批培養基到貨物後都應對培養基的質量進行檢測，滿足檢測方法規定的要求後方可投入使用。

2 培養基的儲存

幹粉培養基應保存在陰涼幹燥處，要避免陽光直射；未wei開kai瓶ping的de培pei養yang基ji保bao存cun期qi限xian應ying按an照zhao生sheng產chan廠chang家jia提ti供gong的de信xin息xi執zhi行xing
，開kai瓶ping後hou的de幹gan粉fen培pei養yang基ji易yi吸xi濕shi，應ying注zhu意yi防fang潮chao並bing盡jin快kuai用yong完wan。應ying定ding期qi對dui儲chu存cun中zhong的de培pei養yang基ji進jin行xing常chang規gui檢jian查zha，如ru容rong器qi密mi閉bi性xing複fu查zha
、首次開封日期、內容物的感官檢查，如果培養基發生結塊
、顏色異常和其他變質跡象就不能再使用。

3 培養基的製備

3.1 培養基用水

培養基製備用水應使用電阻率不小於30萬Ωcm的蒸餾水或與其同質的水，最好不使用離子交換器生產的去離子水。

3.2 稱量

稱量時要用專用的角匙，避免交叉汙染而影響檢驗結果；幹粉培養基易吸潮，如有條件，盡量在濕度較低的房間稱取培養基。幹粉培養基應嚴格按照生產商提供的有關說明準確配製。

3.3 複水

複水時不得用銅鍋或鐵鍋，以防有離子混入培養基中
，影響微生物的生長
；容器的大小需大於複水後培養基總體積的2倍以上
，避免在加熱溶解過程中，培養基溢出
；含有瓊脂粉的培養基，在加熱溶解之前可以浸泡數分鍾；加(jia)熱(re)培(pei)養(yang)基(ji)時(shi)一(yi)定(ding)要(yao)進(jin)行(xing)攪(jiao)拌(ban)
，特(te)別(bie)是(shi)瓊(qiong)脂(zhi)類(lei)培(pei)養(yang)基(ji)。為(wei)避(bi)免(mian)燒(shao)焦(jiao)和(he)沸(fei)騰(teng)溢(yi)出(chu)，對(dui)於(yu)少(shao)量(liang)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)最(zui)好(hao)使(shi)用(yong)沸(fei)水(shui)浴(yu)進(jin)行(xing)加(jia)熱(re)。燒(shao)糊(hu)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)營(ying)養(yang)物(wu)質(zhi)被(bei)破(po)壞(huai)，並(bing)可(ke)產(chan)生(sheng)有(you)毒(du)物(wu)質(zhi)，如(ru)發(fa)現(xian)焦(jiao)化(hua)

，或(huo)未(wei)溶(rong)解(jie)均(jun)勻(yun)前(qian)培(pei)養(yang)基(ji)有(you)溢(yi)出(chu)，該(gai)培(pei)養(yang)基(ji)即(ji)不(bu)能(neng)使(shi)用(yong)，應(ying)重(zhong)新(xin)製(zhi)備(bei)。對(dui)於(yu)瓊(qiong)脂(zhi)類(lei)培(pei)養(yang)基(ji)進(jin)行(xing)再(zai)融(rong)化(hua)時(shi)應(ying)使(shi)用(yong)沸(fei)水(shui)浴(yu)或(huo)流(liu)動(dong)蒸(zheng)汽(qi)進(jin)行(xing)加(jia)熱(re),最多隻能加熱兩次,第二次再融化後仍未用完的培養基應棄去。

3.4 滅菌

培養基應按培養基配方中 規定的條件及時進行滅菌，通常是121℃ 15 min
，以yi保bao證zheng滅mie菌jun效xiao果guo和he不bu損sun傷shang培pei養yang基ji的de有you效xiao成cheng份fen
，含han糖tang或huo特te殊shu培pei養yang基ji，按an照zhao國guo家jia標biao準zhun或huo生sheng產chan商shang提ti供gong的de說shuo明ming滅mie菌jun。已yi配pei製zhi好hao的de培pei養yang基ji必bi須xu立li即ji滅mie菌jun
，避bi免mian微wei生sheng物wu生sheng長chang繁fan殖zhi而er消xiao耗hao養yang分fen
，改gai變bian培pei養yang基ji的de酸suan堿jian度du。高gao溫wen可ke破po壞huai培pei養yang基ji的de營ying養yang成cheng分fen
，還hai會hui使shi瓊qiong脂zhi的de凝ning膠jiao強qiang度du下xia降jiang，因yin此ci必bi須xu嚴yan格ge控kong製zhi滅mie菌jun溫wen度du和he時shi間jian
，並bing且qie不bu可ke重zhong複fu滅mie菌jun。高gao壓ya蒸zheng汽qi滅mie菌jun鍋guo的de壓ya力li表biao等deng要yao定ding期qi進jin行xing檢jian定ding
，並bing定ding期qi采cai用yong生sheng物wu指zhi示shi菌jun法fa或huo化hua學xue變bian色se紙zhi片pian對dui滅mie菌jun效xiao果guo進jin行xing驗yan證zheng。

3.5 pH測定

微生物必須在適宜的pH範圍內才能正常生長繁殖或體現其生物特性。滅菌前後PH會有所變化
，所以滅菌前就要準備好，可以用1mol/L Na0H或 lmol/L HCL調整，注意不可反複調pH，否則會影響培養基的滲透壓。

3.6 配製好的培養基保存

滅mie菌jun以yi後hou培pei養yang基ji應ying該gai迅xun速su冷leng卻que至zhi所suo需xu溫wen度du，避bi免mian長chang時shi間jian保bao存cun在zai滅mie菌jun鍋guo內nei，造zao成cheng過guo度du滅mie菌jun，影ying響xiang培pei養yang基ji的de營ying養yang成cheng分fen或huo選xuan擇ze性xing效xiao果guo。所suo以yi建jian議yi平ping板ban傾qing注zhu後hou立li即ji使shi用yong。保bao存cun時shi,盡可能貯存在不會改變其成分的條件下，即避光或在4 ℃ ~ 12℃冰箱密閉保存。如果保存時間超過2d,應將其放人密封的塑料袋中保存;配好的肉湯類培養基如果保存時間超過2個星期,應將其放在帶有螺旋蓋的試管或其他密閉的試管或容器中防止蒸發。

4 培養基的性能測試

4.1 外觀控製

製備好的培養基應有相應的顏色，一般的培養基應澄清、無渾濁、無沉澱。使用前應檢查培養基的顏色是否發生變化，是否蒸發/脫水。

4.2 汙染控製

從每批製備好的培養基中選取部分進行汙染測試（無菌試驗），確定無微生物生長方可使用。

4.3 性能測試

4.3.1 測試菌株選擇 

測試菌株是具有其代表種的穩定特性並能有效證明實驗室特定培養基最佳性能的一套菌株，應來自國際/國家標準菌種保藏中心ATCC標準菌株，菌株的選擇參考衛生行業標準WS/T232-2002《商業性微生物培養基質量檢驗規程》。

4.3.2 定量測試方法 

改良Miles-Misra法：測試菌株過夜培養物10倍遞增稀釋；測試平板和參照平板劃分為4個區域並標記；從最高稀釋度開始
，分別滴一滴稀釋液於試驗平板和對照平板標記好的區域；將稀釋液塗滿整個1/4區域，37°C培養18小時；對易計數的區域計數，按公式計算生長率（生長率=待測培養基平板上得到的菌落總數/參考培養基平板上獲得的菌落總數）。非選擇性培養基上目標菌的生長率應不低於0.7，該類培養基應易於目標菌生長
；選擇性培養基上目標菌的生長率應不低於0.1 。

4.3.3 半定量測試方法 

改進的劃線法接種法：平板分ABCD四區，共劃16條線
，平行線大概相隔0.5cm，每條有菌落生長的劃線記作1分，每個僅一半的線有菌落生長記作0.5分，沒有菌落生長或生長量少於劃線的一半記作0分，分數加起來得到生長指數G。目標菌在培養基上應呈現典型的生長
，而非目標菌的生長應部分或完全被抑製，目標菌的生長指數G大於6時

，培養基可接受 。

4.3.4 定性測試方法 

平板接種觀察法：用(yong)接(jie)種(zhong)環(huan)取(qu)測(ce)試(shi)菌(jun)培(pei)養(yang)物(wu)
，在(zai)測(ce)試(shi)培(pei)養(yang)基(ji)表(biao)麵(mian)劃(hua)平(ping)行(xing)直(zhi)線(xian)。按(an)標(biao)準(zhun)中(zhong)規(gui)定(ding)的(de)培(pei)養(yang)時(shi)間(jian)和(he)溫(wen)度(du)對(dui)接(jie)種(zhong)後(hou)的(de)平(ping)板(ban)進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)
，目(mu)標(biao)菌(jun)應(ying)呈(cheng)現(xian)良(liang)好(hao)生(sheng)長(chang)，並(bing)有(you)典(dian)型(xing)的(de)菌(jun)落(luo)外(wai)觀(guan)
、大小和形態
，非目標菌應是微弱生長或無生長 。

5 討論

培養基的質量是微生物實驗室檢測工作的基礎

，事關檢測工作的準確性、可靠性
，在微生物實驗室檢測工作中舉足輕重。如果在工作中忽視任何一個環節的質量問題，都將導致檢驗結果科學性、客(ke)觀(guan)性(xing)的(de)偏(pian)離(li)。因(yin)此(ci)，加(jia)強(qiang)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)實(shi)驗(yan)室(shi)質(zhi)量(liang)控(kong)製(zhi)，認(ren)真(zhen)地(di)做(zuo)好(hao)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)質(zhi)控(kong)工(gong)作(zuo)，不(bu)斷(duan)完(wan)善(shan)和(he)提(ti)高(gao)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)質(zhi)控(kong)水(shui)平(ping)
，才(cai)能(neng)為(wei)微(wei)生(sheng)物(wu)檢(jian)測(ce)實(shi)驗(yan)室(shi)提(ti)供(gong)高(gao)質(zhi)量(liang)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)。