在zai色se譜pu儀yi分fen析xi檢jian測ce過guo程cheng中zhong,分fen配pei係xi數shu和he容rong量liang因yin子zi一yi定ding程cheng度du上shang展zhan現xian色se譜pu柱zhu的de柱zhu效xiao,了le解jie影ying響xiang色se譜pu柱zhu分fen離li度du的de因yin素su,有you助zhu於yu有you效xiao地di使shi用yong和he保bao養yang色譜柱,提高色譜柱分離度和色譜儀檢測靈敏度。
分配係數是指在一定溫度下,待測樣品在兩相間達到分配平衡時,在固定相與流動相中的濃度之比。分配係數與組分、流動相和固定相的溫度、壓力有關。在液相色譜儀中,固定相確定後,分配係數主要受流動相的性質影響。在試驗中主要靠調整流動相的組成配比及pH值,以獲得組分間的分配係數差異及適宜的保留時間,達到分離的目的。
在流動相、固定相、溫wen度du和he壓ya力li一yi定ding條tiao件jian下xia,樣yang品pin濃nong度du很hen低di時shi,分fen配pei係xi數shu隻zhi取qu決jue於yu組zu分fen的de性xing質zhi,而er與yu濃nong度du無wu關guan。在zai大da多duo情qing況kuang下xia,分fen配pei係xi數shu隨sui著zhe濃nong度du的de增zeng大da而er減jian小xiao,這zhe時shi色se譜pu峰feng為wei拖tuo尾wei峰feng;而(er)有(you)時(shi)隨(sui)著(zhe)溶(rong)質(zhi)濃(nong)度(du)增(zeng)大(da),分(fen)配(pei)係(xi)數(shu)也(ye)增(zeng)大(da),這(zhe)時(shi)色(se)譜(pu)峰(feng)為(wei)前(qian)延(yan)峰(feng)。因(yin)此(ci),隻(zhi)有(you)盡(jin)可(ke)能(neng)減(jian)少(shao)進(jin)樣(yang)量(liang),使(shi)組(zu)分(fen)在(zai)柱(zhu)內(nei)濃(nong)度(du)降(jiang)低(di),分(fen)配(pei)係(xi)數(shu)恒(heng)定(ding)時(shi),才(cai)能(neng)獲(huo)得(de)正(zheng)常(chang)峰(feng)。在同一色譜條件下,樣品中分配係數值大的組分在固定相中滯留時間長,後流出色譜柱;fenpeixishuzhixiaodezufenzezhiliushijianduan,xianliuchusepuzhu。hunhewuzhonggezufendefenpeixishuxiangchayueda,yuerongyifenli,yincihunhewuzhonggezufendefenpeixishubutongshisepufenlideqianti。β為相比率,是反映各種色譜柱柱形特點的又一個參數,β=Vm/Vs,Vm為流動相的體積,即死時間(t0)與流動相流速的乘積,Vs為色譜柱中固定相的體積。對填充柱其β值一般為6~35,對毛細管其β值為60~600。容量因子是待測樣品在兩相間達到分配平衡時,在固定相與流動相中的量之比。因此容量因子也稱質量分配係數。容量因子的物理意義:表示一個組分在固定相中停留的時間是不保留組分保留時間的倍數。分配係數為0時,化合物全部存在於流動相中,在固定相中不保留,停留的時間為0;分配係數越大,說明固定相對此組分的容量越大,出柱慢,保留時間越長。分配係數K,容量因子k與保留時間之間有如下關係:k=t'R/t0,t'R=tR-t0上式說明容量因子的物理意義:表示一個組分在固定相中停留的時間(t'R)是不保留組分保留時間(t0)的幾倍。k=0時,化合物全部存在於流動相中,在固定相中不保留,t'R=0;k越大,說明固定相對此組分的容量越大,出柱慢,保留時間越長。容量因子與分配係數的不同點是:k取決於組分、流動相、固定相的性質及溫度,而與體積Vs、Vm無關;K除了與性質及溫度有關外,還與Vs、Vm有關。由於t'R、t0較Vs、Vm易於測定,所以容量因子比分配係數應用更廣泛。