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51.通常我們在分析天然藥物成分的時候結構複雜，無法考察組分的PKa值，哪我們如何去選擇最合適的流動相或者是拖尾該怎麼改善呢？
答：如果天然產物中沒有易電離的極性基團，就不需要用緩衝鹽調節pH。如果，天然產物中既有酸性基團，也有堿性基團，譬如，有pKa=6.2的羧基和pKa=9.0的氨基的兩性物質，建議將pH用磷酸鹽緩衝鹽控製在2.4（如果是，諸如月旭的Ultimate LP-C18這樣的耐酸色譜柱，還可以調得更低）。
如果pH控製在6.2～9.0之間，兩個基團都處於離子態，保留能力最差，是最不可取的。如果不清楚複雜物質中含有什麼基團，也請將pH調到2.4或更低。因為pH調低，起碼抑製了酸性基團的電離而處於中性分子狀態，而增加酸性基團這個部分在反相色譜中的保留能力；另外，低pH還抑製了矽醇基的活性，有利於獲取對稱的峰形。
情況不明時候，為什麼不建議調高pH呢？一方麵一般色譜柱都不能承受pH=9以上的條件；即使是像月旭的X-timate係列一樣能耐12.5的柱子，調高pH和調低pH相比，還有一個矽醇基活性大的劣勢。
52.記得以前拿到C18柱zhu，會hui用yong甲jia醇chun從cong小xiao流liu量liang到dao大da流liu量liang慢man慢man活huo化hua，這zhe樣yang做zuo的de目mu的de是shi什shen麼me呢ne？是shi先xian用yong溶rong劑ji活huo化hua嗎ma？然ran後hou再zai用yong樣yang品pin？還hai有you測ce定ding短duan肽tai總zong是shi衝chong出chu來lai，該gai怎zen麼me解jie決jue呢ne？就jiu是shi和he溶rong劑ji峰feng出chu在zai一yi起qi，或huo者zhe出chu在zai溶rong劑ji峰feng之zhi前qian。
答：C18柱zhu，會hui用yong甲jia醇chun從cong小xiao流liu量liang到dao大da流liu量liang慢man慢man活huo化hua，因yin為wei，色se譜pu柱zhu到dao達da用yong戶hu手shou中zhong時shi，時shi間jian長chang短duan不bu一yi，在zai存cun儲chu和he運yun輸shu的de過guo程cheng中zhong，可ke能neng存cun儲chu液ye有you些xie揮hui發fa，低di流liu速su的de甲jia醇chun可ke以yi很hen好hao的de浸jin潤run固gu定ding相xiang，使shi鍵jian合he相xiang很hen好hao的de伸shen展zhan，用yong溶rong劑ji平ping衡heng好hao係xi統tong後hou，可ke以yi采cai取qu多duo次ci進jin樣yang或huo者zhe加jia大da進jin樣yang量liang的de方fang式shi以yi更geng快kuai的de獲huo得de重zhong現xian的de色se譜pu圖tu，這zhe樣yang用yong樣yang品pin將jiang色se譜pu柱zhu中zhong的de活huo化hua點dian飽bao和he，就jiu不bu會hui出chu現xian異yi常chang色se譜pu現xian象xiang的de情qing況kuang。
53.C18柱如果之前曾有些天一直保存在酸性環境中，會對柱子有什麼損壞嗎？pH在2左右。
答：pH=2左右容易使鍵合在矽膠基質上的固定相水解流失，包括：C18和he封feng尾wei試shi劑ji的de水shui解jie，封feng尾wei試shi劑ji相xiang對dui更geng容rong易yi水shui解jie。不bu知zhi道dao你ni保bao存cun的de酸suan性xing環huan境jing是shi不bu是shi含han有you緩huan衝chong鹽yan，如ru果guo，不bu含han緩huan衝chong鹽yan，隻zhi是shi短duan期qi幾ji天tian保bao存cun在zai酸suan性xing流liu動dong相xiang中zhong，也ye不bu必bi過guo份fen擔dan心xin，最zui多duo相xiang當dang於yu這zhe幾ji天tian一yi直zhi在zai使shi用yong這zhe根gen色se譜pu柱zhu，因yin此ci減jian少shao幾ji天tian的de使shi用yong壽shou命ming吧ba；有緩衝鹽就麻煩一點，保存期間水分揮發可能會導致緩衝鹽結晶在柱內析出，對柱子損傷很大。
54.色譜柱的安裝有什麼技巧嗎？隻要保證不漏就行了嗎？還有所謂的死體積怎麼測定呢？
答：sepuzhuanzhuangjiqiaobuduo，zhiyaojietouhezhutoupipei，queshiningjinbuloujiukeyile，danyeyaozhuyibuyaoningdetaijinyizhiyusunshangluowen。suoweisitijijiushiwanquanbubaoliudewuzhichufengshicongjinyangdaoliuguosepuzhudezongtiji，yibanyongjixingfeichangqiangdeniaomidingdechufenglaiceding。sitijibaokuozhutiji（色譜柱內溶劑能占據的空腔體積）和柱外體積兩部分。
你從廠商這裏買到色譜柱，柱體積已經是固定了，你能盡量避免減少的是柱外體積。進樣器內死體積、毛細管長度、毛(mao)細(xi)管(guan)和(he)色(se)譜(pu)柱(zhu)連(lian)接(jie)緊(jin)湊(cou)與(yu)否(fou)，保(bao)護(hu)柱(zhu)或(huo)在(zai)線(xian)濾(lv)器(qi)產(chan)生(sheng)的(de)死(si)體(ti)積(ji)大(da)小(xiao)，都(dou)對(dui)這(zhe)個(ge)有(you)影(ying)響(xiang)。樣(yang)品(pin)在(zai)柱(zhu)內(nei)，除(chu)擴(kuo)散(san)外(wai)，還(hai)有(you)和(he)填(tian)料(liao)作(zuo)用(yong)引(yin)起(qi)的(de)組(zu)分(fen)分(fen)離(li)；但樣品在柱外，那就隻有擴散這個使柱效下降的因素了。所以，要取得好的分離效率，柱外體積應該是越小越好。
峰feng有you時shi候hou前qian延yan，有you時shi候hou拖tuo尾wei，一yi般ban不bu是shi色se譜pu柱zhu的de問wen題ti，應ying該gai是shi樣yang品pin和he色se譜pu柱zhu填tian料liao的de作zuo用yong問wen題ti，可ke以yi說shuo如ru果guo色se譜pu柱zhu類lei型xing選xuan擇ze沒mei問wen題ti，關guan鍵jian就jiu是shi色se譜pu條tiao件jian的de選xuan擇ze。包bao括kuo進jin樣yang量liang、樣品溶劑、流動相組成（包括：添加劑）、流動相pH以yi及ji柱zhu溫wen，都dou對dui峰feng形xing有you影ying響xiang。另ling外wai，測ce定ding分fen子zi量liang較jiao大da的de多duo肽tai，用yong樣yang品pin老lao化hua平ping衡heng色se譜pu柱zhu很hen重zhong要yao，分fen子zi量liang越yue大da的de物wu質zhi，需xu要yao平ping衡heng時shi間jian越yue長chang。如ru果guo柱zhu子zi沒mei平ping衡heng好hao，峰feng形xing也ye可ke能neng會hui不bu正zheng常chang。所suo以yi最zui好hao把ba你ni具ju體ti的de測ce定ding條tiao件jian也ye列lie一yi下xia，也ye便bian於yu有you針zhen對dui性xing的de分fen析xi原yuan因yin。
55.cedingduotaiyangpinshi，shijitaihuozheershijitaishi，youshifengqianyandebijiaolihai，youshifengtuoweibijiaolihai，zheshishenmeyuanyinne？shiyangpindewentihaishizhuzidewenti？
答：fengyoushihouqianyan，youshihoutuowei，yibanbushisepuzhudewenti，yinggaishiyangpinhesepuzhutianliaodezuoyongwenti，keyishuoruguosepuzhuleixingxuanzemeiwenti，guanjianjiushiseputiaojiandexuanze，baokuo：進樣量、樣品溶劑、流動相組成（包括：添加劑）、流動相pHyijizhuwen，douduifengxingyouyingxiang，lingwai，cedingfenziliangjiaodadeduotai，yongyangpinlaohuapinghengsepuzhuhenzhongyao，fenziliangyuedadewuzhi，xuyaopinghengshijianyuechang。ruguozhuzimeipinghenghao，fengxingyekenenghuibuzhengchang。suoyizuihaobanijutidecedingtiaojianyelieyixia，yebianyuyouzhenduixingdefenxiyuanyin。
56.柱子的平衡時間跟填料關係大嗎？哪種最快，哪種最慢？因為我在做離子交換柱的時候平衡是相當的慢!
答：根據色譜速率理論，粒徑越小，柱效越高，而且當粒徑小到亞2微米左右時，線速度的提高，其分離度就不再降低，從而，改變了許久以來人們不得不在 “速度和分離度之間取舍”的局麵。
57.關於配置流動相，有機相我們可以甲醇乙腈同時用，這個是基於什麼考慮的？是不是根據甲醇乙腈選擇性不同、樣品在這個兩者的溶解度的差異以及調節洗流動相脫能力來考慮的？
答：甲醇和乙腈同時用，可以獲得單純的甲醇或者乙腈不一樣的選擇性，而且洗脫能力也會改變，根據多元流動相的強度因素Sab.....=Saψa+Sbψb=...Sa和Sb純溶劑a和b的溶劑強度因素；ψa、ψb分別為a和b的體積分數，所以，在藥典中有很多體係都使用甲醇乙腈體係。
58.三乙胺磷酸鹽緩衝液作流動相，柱壓一天比一天高，該怎麼樣解決？
答：把柱子再生下，再生的方法搜一下有很多反衝對絕大部分色譜柱都是可行的，效果不錯。
59.新出廠液相色譜柱，保護溶劑一般是什麼？怎樣進行平衡清洗比較好，一般要平衡多長時間比較好？
答：柱子類型不同，保存溶劑也會不一樣吧，具體要看說明書的說明。對於反相柱，一般用甲醇（乙腈）保存，也有用80%左右甲醇濃度的甲醇/水保存的。一般用流動相平衡衝洗10～20個柱體積即可。（注意：柱體積不等於空柱管體積，4.6×250mm的色譜柱空柱管體積是4.15mL，而柱體積隻有約2.5mL）
60.據說液相色譜柱柱壓達到一定高度就不能使用了，請問一般達到多高，用甲醇和乙腈是不是不一樣？
答：柱壓不是色譜柱不能使用的唯一因素，分離度才是最重要的。柱壓隻要沒高到儀器不能承受的地步，例如，超過300bar，就jiu可ke以yi一yi直zhi使shi用yong。甲jia醇chun的de粘zhan度du比bi乙yi腈jing高gao，同tong樣yang狀zhuang況kuang的de柱zhu子zi，如ru果guo用yong甲jia醇chun做zuo流liu動dong相xiang，柱zhu壓ya可ke能neng超chao了le，換huan用yong乙yi腈jing會hui使shi柱zhu壓ya下xia降jiang不bu少shao，儀yi器qi還hai能neng承cheng受shou。不bu過guo盡jin管guan柱zhu壓ya還hai沒mei上shang升sheng到dao接jie近jin400Bar的限定，如果，發現柱壓上升速度較快，也需要及早對柱子進行清洗維護，從根本上排除導致柱壓上升的源頭。
61.柱塞板可不可拆下用超聲波清洗，會有什麼不良後果？
答：不bu建jian議yi將jiang柱zhu篩shai板ban拆chai下xia清qing洗xi，因yin為wei，拆chai下xia承cheng壓ya的de柱zhu篩shai板ban會hui導dao致zhi柱zhu床chuang發fa生sheng變bian化hua，影ying響xiang色se譜pu性xing能neng。應ying該gai對dui汙wu染ran的de色se譜pu柱zhu先xian進jin行xing清qing洗xi維wei護hu，維wei護hu沒mei有you效xiao果guo，再zai把ba拆chai洗xi柱zhu篩shai板ban作zuo為wei最zui後hou的de手shou段duan。
62.一般正常使用一個C18柱能用多長時間？
答：柱壽命一般不按時間計算，按持續進樣針數比較科學。一般正常使用維護，不超過pH和溫度等範圍，C18柱能達到500～2000針進樣的壽命，視樣品幹淨程度的不同而不同。
63.超高壓快速高分離度色譜柱是不是未來液相色譜柱普及應用的一個發展趨勢？
答：這zhe是shi個ge大da話hua題ti，今jin後hou使shi用yong，會hui越yue來lai越yue多duo是shi肯ken定ding的de，但dan是shi否fou會hui替ti代dai普pu通tong壓ya力li的de液ye相xiang還hai有you爭zheng議yi。超chao高gao壓ya也ye有you使shi用yong上shang的de不bu便bian，譬pi如ru容rong易yi堵du，對dui設she備bei硬ying件jian要yao求qiu高gao等deng。有you機ji會hui我wo再zai談tan談tan超chao高gao壓ya液ye相xiang色se譜pu方fang麵mian詳xiang細xi的de一yi些xie情qing況kuang。
64.如果液相色譜譜圖基線漂移很大是不是柱子的問題？波長越小的越大，270nm的還不怎麼能看出來，230nm的就非常厲害了，有可能是什麼原因造成的？
答：有可能是你的流動相的問題，230可能已經快到你流動相的截止波長了，當然，紫外吸收強，基線漂移厲害。
65.我們有一台waters1525色(se)譜(pu)儀(yi)，最(zui)近(jin)基(ji)線(xian)總(zong)是(shi)呈(cheng)現(xian)波(bo)浪(lang)形(xing)很(hen)有(you)規(gui)律(lv)，波(bo)長(chang)越(yue)小(xiao)越(yue)明(ming)顯(xian)，梯(ti)度(du)洗(xi)脫(tuo)時(shi)向(xiang)上(shang)飄(piao)逸(yi)而(er)且(qie)後(hou)一(yi)段(duan)時(shi)間(jian)呈(cheng)現(xian)波(bo)浪(lang)形(xing)，很(hen)影(ying)響(xiang)分(fen)析(xi)，我(wo)想(xiang)問(wen)一(yi)下(xia)，是(shi)不(bu)是(shi)柱(zhu)子(zi)的(de)原(yuan)因(yin)，用(yong)的(de)是(shi)C18上海安普的？
答：應該是流動相組成變引起吸收本底變化造成的，特別是在波長小的時候，乙腈的截止波長低於200nm，但dan甲jia醇chun和he水shui相xiang對dui比bi較jiao高gao，在zai低di波bo長chang時shi，甲jia醇chun和he水shui有you一yi定ding的de本ben底di吸xi收shou。梯ti度du進jin行xing時shi，隨sui著zhe不bu同tong本ben底di的de組zu分fen含han量liang的de變bian化hua，基ji線xian也ye會hui有you相xiang應ying的de波bo動dong。
66.我是做農藥殘留分析的，用的是UV2487檢測器，想問一下，C18色譜柱用什麼緩衝液比較好，我以前做三聚氰胺是用檸檬酸，辛烷磺酸鈉，也用農藥檢測行不行？還有用HLB柱能不能去除蔬菜和水果中的雜質？
答：C18色譜柱用用磷酸鹽，醋酸鹽就比較好啊，離子對試劑不是個好東東，你要慎用。我們做三聚氰胺用三氯乙酸。
67.液相色譜柱一般使用壽命多長？不同類型的色譜柱是否壽命也不一樣？液相色譜柱與氣相的柱子有何區別呢？
答：液相色譜柱一般使用壽命多長！我有一根柱子，用了大約1年(nian)半(ban)左(zuo)右(you)，發(fa)現(xian)同(tong)樣(yang)濃(nong)度(du)的(de)樣(yang)品(pin)它(ta)的(de)峰(feng)展(zhan)寬(kuan)了(le)。說(shuo)明(ming)柱(zhu)效(xiao)下(xia)降(jiang)。但(dan)是(shi)不(bu)影(ying)響(xiang)結(jie)果(guo)。因(yin)為(wei)峰(feng)麵(mian)積(ji)還(hai)是(shi)接(jie)近(jin)。所(suo)以(yi)做(zuo)色(se)譜(pu)之(zhi)前(qian)先(xian)做(zuo)下(xia)柱(zhu)子(zi)性(xing)能(neng)測(ce)試(shi)。第(di)一(yi)次(ci)的(de)圖(tu)譜(pu)要(yao)保(bao)留(liu)。 測試C18RP柱，一般用到萘作為柱子的柱效判斷。一般是18000片，對稱性（usp）0.95～1.05間。
68.①“水相”指的是什麼？純水？②我們實驗室的CN基柱保存在40%的乙腈裏麵，這個有不良後果嗎？
答：水相就是純水。CN基不適合保存在中等極性的溶劑中，除了可以低溫保存在極性較大的純水中外，還有可以保存在非極性溶劑如正己烷中。40%乙腈水，屬於中等極性溶劑，短期過夜保存可能問題不大，長期保存不太好，後果就是可能會發生柱床坍塌。
69.CN基柱應該怎樣維護才好呢？比如，做完實驗用什麼流動相衝柱子、短期用什麼溶劑保存、長期用什麼溶劑保存等。
答：CN可作正相柱，也可作反相柱用，除了保存溶劑有特殊要求外，其它維護辦法和一般正相和反相柱沒有多大區別。
70.我們是waters的分析儀，用其他家的柱子可不可以？
答：你用Waters的儀器，而開始也用的是Waters柱zhu子zi，如ru果guo是shi用yong不bu鏽xiu鋼gang接jie頭tou，匝za扣kou的de位wei置zhi就jiu固gu定ding了le。如ru果guo用yong其qi他ta家jia的de柱zhu子zi，可ke以yi把ba固gu定ding匝za扣kou位wei置zhi的de那na段duan剪jian掉diao，換huan一yi個ge新xin的de匝za扣kou就jiu可ke以yi重zhong新xin固gu定ding匝za扣kou位wei置zhi。當dang然ran，如ru果guo你ni已yi換huan成chengpeek接頭，問題就不會很大。
71.色譜柱的接頭，出口處用的是peek接頭，請問都用peek接頭不行麼，為什麼？
答：都用peek接頭我認為都可以的，當然，peek接頭的質量要過關。有人認為peek接頭不耐壓，估計是針對品質不好的產品說的。
72.我們的液相，為了節約成本我們自己填保護柱，用廢的同型號柱子填。但填完以後做標樣定量分析有所改變。請問其原因。
答：不bu建jian議yi自zi己ji填tian保bao護hu柱zhu柱zhu芯xin，填tian得de不bu好hao的de柱zhu芯xin會hui影ying響xiang分fen離li效xiao果guo，也ye會hui影ying響xiang定ding量liang分fen析xi結jie果guo。你ni不bu知zhi道dao廢fei柱zhu子zi裏li的de填tian料liao是shi不bu是shi受shou了le汙wu染ran，另ling外wai你ni填tian的de柱zhu芯xin肯ken定ding沒mei有you廠chang商shang填tian得de好hao，如ru果guo影ying響xiang到dao峰feng形xing，峰feng麵mian積ji積ji分fen結jie果guo有you所suo改gai變bian是shi可ke能neng的de。
73.請問怎麼測柱效？（柱子填料是Sino Chrom ODS-BP 5μm，規格4.6mm×200mm）
答：測定柱效不同公司不一樣，有用甲苯，也有用萘的。一般柱子裏麵有檢測報告，你按照報告裏的方法做一遍就可以。
74.我(wo)用(yong)苯(ben)試(shi)了(le)一(yi)下(xia)，峰(feng)性(xing)大(da)大(da)好(hao)，但(dan)是(shi)，不(bu)知(zhi)道(dao)理(li)論(lun)塔(ta)板(ban)數(shu)，不(bu)知(zhi)道(dao)怎(zen)麼(me)評(ping)價(jia)，感(gan)覺(jiao)不(bu)大(da)好(hao)，對(dui)稱(cheng)性(xing)不(bu)好(hao)，有(you)點(dian)前(qian)延(yan)，柱(zhu)子(zi)才(cai)用(yong)了(le)四(si)個(ge)月(yue)，是(shi)什(shen)麼(me)原(yuan)因(yin)呢(ne)？是(shi)不(bu)是(shi)塌(ta)陷(xian)了(le)呢(ne)？有(you)什(shen)麼(me)補(bu)救(jiu)的(de)辦(ban)法(fa)嗎(ma)？
答：yonglesigeyuefengxingtuoweishihenzhengchangde，xuyaoweihuqingxiyixiasepuzhuyiqingchuyinqituoweidezhutouwuran。ruguozhutoutaxian，zebuhaoban，congqitafeizhuziliqudiantianliaotianbutaxian，keyiyishi，danxiaoguobuyidinghao。sepuzhushihaocai，cedingjinyangzhenshuruguodadao500以上了，也算是物有所值，物盡其用了，報廢了也不可惜。
75.liudongxianglizhiqianyousuande，zuowanhoudanchunyongyijingchongxi，nengbasuanchongxiganjingma？zhiqian，tamenshizheyangchongde，xianzaihuaiyizhuzitaxianle，huibuhuishichangshijianzaisuanxinghuanjingzhongzaochengdene？
答：流動相裏有酸，應該先用純水或80：20的水/乙腈溶劑衝洗吧。如果，一直在酸性環境，固定相容易流失，造成保留時間前移和其它色譜性能下降。
76.我前一段時間做三聚氰胺用C18色譜響應值很小，幾乎無法檢測，可是檢測標準就是用的C18，後來我用RP18結果響應值很好，不知道什麼原因，請問這兩個柱子不都是反相色譜柱麼？他倆之間有什麼不同？
答：RP18就是C18吧，不過C18柱之間也有區別，測定三聚氰胺一般要用極性比較大的水性C18柱。
77.磺化交聯的苯乙烯-二乙烯基共聚物為填充劑的色譜柱在儲存過程未注意放在冰箱中，導致發黴後，柱效急劇下降，能何種方法將此色譜柱修複好？
答：聚合物柱子因為不怕酸堿，就直接用強酸強堿清洗。如果是H型，用1M硫酸衝洗；如果是Ca型，可以先用1M硫酸衝洗，再用EDTA鈣鹽轉換回Ca型柱；如果是中性的聚合物反相柱，直接用1M的NaOH衝洗。
78.我有一個標準的穩定性檢測分析方法它是建立在某一供應商的碳18柱上我知道有另一個廠家生產同樣的碳18柱但價錢是它的一半如果我更換柱子會不會影響到分析方法。。。
答：要看這一分析方法的具體要求。如果方法中有說明“使用某一色譜柱或與其同樣的柱子，”那麼，就可以使用別的柱子來替換。但要注意，不能光看一個柱子標為碳18柱，或是其宣傳等價於某某柱，就認為該柱適用於所有方法。必須要驗證色譜柱的等價性。
我wo們men需xu要yao考kao查zha使shi用yong新xin柱zhu子zi時shi，係xi統tong適shi應ying性xing是shi否fou可ke以yi通tong過guo驗yan證zheng。如ru果guo可ke以yi獲huo得de係xi統tong適shi用yong性xing測ce試shi中zhong所suo要yao求qiu的de保bao留liu值zhi，分fen離li度du以yi及ji其qi它ta參can數shu等deng，就jiu可ke以yi使shi用yong該gai柱zhu。推tui薦jian使shi用yong係xi統tong適shi用yong性xing測ce試shi樣yang品pin以yi及ji其qi它ta的de典dian型xing樣yang品pin來lai進jin行xing考kao查zha，以yi保bao證zheng雜za質zhi和he降jiang解jie物wu在zai正zheng確que的de保bao留liu時shi間jian出chu峰feng並bing給gei出chu正zheng確que的de濃nong度du響xiang應ying；並且在新柱子上獲得的分析結果要等價於在原柱子上的結果。
79.請問我做一種藥的分析查美國藥典規定使用100mm×40mm，8μm的色譜柱流速3mL/min可現在市場上已不容易找到這種規格的產品於是我按USP中色譜柱比較的數據庫的指引選了一款選擇性一致的等價色譜柱其規格是100mm×46mm，3μm的色譜柱當選用3mL/min的流速時發現柱壓超高請問我如何對方法進行調整以滿足USP的要求？
答：流速調整原則是流動相通過柱子的線速度一致，等價柱的截麵積大了，流速也應增加才能保持相同的線速度。新流速計算結果是：（4.6/4.0）2×3.0=4.0mL/min。但3mL/min流速都已導致柱壓太高，4.0mL/min明顯不行。好在USP還有個允許±50%的流速調整指導原則，這樣將流速調至2.0mL/min既符合USP規定，又能使柱壓降到可接受的範圍，但這種改變不能引起其它不好後果。
這個例子中，等度分析中，流速改變會引起塔板數和峰寬的改變，但不會影響峰的選擇性。3μm粒徑色譜柱柱效比8μm的高很多，可考慮縮短柱長以補償或部分補償流速降低造成的測定時間增加。所以，更佳選擇是50mm×4.6mm，3μm的柱子，2.0ml/min的流速運行，可以在符合USP規定的情況下，又得到更快速的測定分離。
80.最近我非常的沮喪，按照藥典上的色譜條件和方法做某藥物的分析，卻始終得不到滿意的結果。有人建議我對色譜條件，如進樣量、流動相pH和溫度等，進行微調以得到良好的峰形和分離效果，可按公司規定我不能這樣做，怎麼辦？
答：如果你心裏老有這個思維定勢“按規定，我不能......”，然後什麼也不敢做，那真是不好辦！隻zhi有you去qu做zuo了le，去qu試shi著zhe改gai變bian條tiao件jian看kan看kan得de到dao什shen麼me結jie果guo，你ni才cai能neng發fa現xian問wen題ti所suo在zai。如ru果guo改gai變bian條tiao件jian後hou，仍reng得de不bu到dao好hao結jie果guo，就jiu要yao去qu找zhao色se譜pu條tiao件jian以yi外wai的de原yuan因yin，如ru，色se譜pu柱zhu、色譜儀器以及樣品和製樣過程中的是否存在問題？不管通過微調你是否取得了好結果，你也有了向領導彙報問題和解決方案的依據。
而且，絕對不能調整藥典規定色譜條件的說法通常是不對的。美國藥典USPshuodeshiruguogaibianyaodianfangfaxuyaozhongxinzuofangfayanzheng，danfangfatiaozhenghuozhechengweitiaoyifuhexitongshiyingxingdeyaoqiushiyunxude，shibuxuyaozhongxinzuofangfayanzhengde。USP列了調整的幾條指導原則，如，±50%的流速調整，±10°C的溫度調節等等（詳見"Chapter621，Chromatography，”，UnitedStates Pharmacopeia No.31-NF 26，(2008).）。當然既然是指導原則，這些規定都不是絕對的，如溫度調整±10°C，對有些方法適用，對另外的方法則±5°C的調整都會有問題，我們應該依據具體情況作出明智的科學判斷。
81.請問下HibarRT250-4這個柱子很特殊麼？為什麼很多藥典中的藥物分離都用它做柱子，因為才開始做藥，不知道hi，bar的柱子特點是什麼？
答：HibarRT250-4是Merk的一個品牌，不是很了解。大概是共用柱頭，可更換的柱管。
82.在堿性條件下矽膠溶解，又生成矽羥基的機理是什麼？反應方程式如何寫？
答：二氧化矽溶解的反應式是：
SiO2+2OH-=Si032-+H2O或者表示成水解的形式：SiO2+H2O=Si032-+2H+
這(zhe)說(shuo)明(ming)矽(gui)膠(jiao)會(hui)在(zai)堿(jian)性(xing)條(tiao)件(jian)下(xia)溶(rong)解(jie)而(er)生(sheng)成(cheng)矽(gui)酸(suan)根(gen)，但(dan)，我(wo)們(men)這(zhe)裏(li)說(shuo)的(de)是(shi)矽(gui)膠(jiao)顆(ke)粒(li)表(biao)麵(mian)的(de)部(bu)分(fen)溶(rong)解(jie)，含(han)有(you)鍵(jian)合(he)固(gu)定(ding)相(xiang)的(de)矽(gui)膠(jiao)原(yuan)表(biao)麵(mian)溶(rong)解(jie)脫(tuo)落(luo)後(hou)，自(zi)然(ran)會(hui)生(sheng)成(cheng)新(xin)鮮(xian)的(de)矽(gui)膠(jiao)表(biao)麵(mian)，而(er)新(xin)鮮(xian)的(de)矽(gui)膠(jiao)表(biao)麵(mian)結(jie)構(gou)一(yi)般(ban)都(dou)是(shi)含(han)有(you)矽(gui)羥(qiang)基(ji)的(de)。矽(gui)膠(jiao)基(ji)本(ben)結(jie)構(gou)單(dan)元(yuan)是(shi)Si-O-Si鍵，在OH-離子的作用下，Si-O鍵斷裂，在表麵形成Si-O-H矽羥基的結構單元。
必須指出的是，在氨基柱的孔內，並沒有單獨加入OH-離子，偏堿小環境的形成是由於氨基易和水電離生成的氫陽離子結合造成的遊離OH-離子的過剩。從第一個方程式角度解釋，遊離的OH-離子用完，矽膠就不再繼續溶解；從第二個水解形式方程式角度解釋：當矽膠水解生成的H+離子足夠用來和氨基結合時，水解過程就會變慢或停止。
83.同樣都是C18柱子，液相色譜柱和SPE他們之間有什麼區別，能具體講一下麼？
答：HPLC柱子和SPE小柱的對比：
對比項目 HPLC SPE
柱管 不鏽鋼管 塑料管
粒徑（um） 3，5，10 40-300
顆粒形狀 球形 一般為無定形
柱效（塔板數） 20-25000 <100
分離機理 連續洗脫 數字式開關洗脫
售價（元） 1000-4000 10-40
使用方式 可重複使用 一次性使用
操作成本 較高 低
設備成本 高 低
※對於C18固定相，為了提高回收率，SPE裏用的C18填料一般載碳量相對更高。
84.我從上麵了解到RP18和C18的區別是極性強一些，能問一下他們在分析農藥是可不可以通用？C18適用於那些農藥的分析？我查材料看到苯醚甲環唑都是用C18分析的，可我用C18分析發現響應值很小，沒法分析能幫忙分析一下原因麼？
答：RP18和普通C18，肯定有其不同的適應性，農藥種類這麼多，可能大部分農藥兩者都能用，有些就不一定。你問的C18適shi用yong於yu哪na些xie農nong藥yao，應ying該gai從cong相xiang關guan農nong藥yao分fen析xi方fang麵mian的de書shu籍ji手shou冊ce中zhong可ke以yi查zha到dao具ju體ti什shen麼me農nong藥yao用yong什shen麼me色se譜pu條tiao件jian合he適shi，其qi中zhong裏li麵mian肯ken定ding有you選xuan擇ze什shen麼me類lei型xing柱zhu子zi，我wo這zhe邊bian沒mei辦ban法fa一yi一yi列lie舉ju。液ye相xiang色se譜pu中zhong，60%以上的分析物可以用C18柱，我想也應該有60%以上的農藥可以用C18柱。
ruguoshoucehuowenxianzhongzhabudao，nibanongyaozuoweiputongfenxiwulaiduidai，ranhouanzhaoyibandesepuzhuxuanzehefangfajianliyuanzelaizuojiukeyi，xuanzejuedingyinsuyinggaiyeshinongyaofenzidejiegou。benmijiahuanzuo，yinggaihanyoujixingjituan，keyishishijixingqiangdeC18柱。
85.我在用乙腈作流動相時，隻要那個乙腈比例稍高一點，比如，20%，即使，測量波長高於乙腈截止波長比較多，也會產生比較大的溶劑峰，這怎麼回事？
答：如ru果guo出chu現xian溶rong劑ji峰feng，對dui你ni的de分fen析xi結jie果guo沒mei任ren何he影ying響xiang，那na就jiu讓rang溶rong劑ji峰feng在zai那na兒er好hao了le，或huo者zhe你ni用yong規gui定ding的de溶rong劑ji溶rong解jie提ti取qu樣yang品pin後hou，再zai用yong流liu動dong相xiang稀xi釋shi一yi下xia樣yang品pin，如ru果guo，稀xi釋shi後hou檢jian測ce限xian能neng達da到dao的de話hua。
86.我在做一個模擬胃內容物中藥物反應試驗，需要動態測定某藥品含量變化。分析時碰到一個棘手問題，進樣量同樣用20μL，用對照品(pin)進(jin)樣(yang)時(shi)色(se)譜(pu)峰(feng)形(xing)不(bu)錯(cuo)，進(jin)樣(yang)品(pin)時(shi)卻(que)一(yi)直(zhi)不(bu)能(neng)得(de)到(dao)好(hao)的(de)峰(feng)形(xing)。後(hou)來(lai)分(fen)析(xi)是(shi)模(mo)擬(ni)胃(wei)內(nei)容(rong)物(wu)樣(yang)品(pin)的(de)酸(suan)度(du)過(guo)高(gao)的(de)因(yin)素(su)，可(ke)我(wo)通(tong)過(guo)稀(xi)釋(shi)的(de)方(fang)法(fa)讓(rang)樣(yang)品(pin)酸(suan)度(du)和(he)流(liu)動(dong)相(xiang)接(jie)近(jin)，雖(sui)然(ran)峰(feng)形(xing)沒(mei)問(wen)題(ti)了(le)，卻(que)發(fa)現(xian)因(yin)稀(xi)釋(shi)導(dao)致(zhi)分(fen)析(xi)物(wu)在(zai)樣(yang)品(pin)中(zhong)含(han)量(liang)下(xia)降(jiang)，低(di)於(yu)最(zui)低(di)檢(jian)測(ce)限(xian)了(le)，如(ru)何(he)是(shi)好(hao)呢(ne)？
答：稀xi釋shi很hen方fang便bian，但dan靈ling敏min度du更geng高gao的de檢jian測ce器qi不bu容rong易yi找zhao，不bu過guo還hai是shi有you個ge簡jian單dan的de解jie決jue方fang案an。當dang用yong流liu動dong相xiang稀xi釋shi樣yang品pin時shi，隻zhi要yao稀xi釋shi後hou樣yang品pin中zhong有you機ji相xiang含han量liang比bi流liu動dong相xiang中zhong的de有you機ji相xiang比bi例li低di10個百分點以上（如，流動相中甲醇含量是40%，則樣品中甲醇含量一定要低於30%），樣品流動會被色譜柱進口端延緩或阻擋，稱為“柱上富集”。由於“柱上富集”作用的存在，這種情況下進行大體積樣品進樣，可避免樣品溶劑組成和流動相一樣時進樣量過大產生的“峰展寬”。針對你提的這個實例，可用稀的NaOH溶液調節樣品pH和流動相匹配，並將樣品最終稀釋一倍。將進樣量提高一倍到40μL，就可達到最低檢測限的要求。
87.峰形後拖尾是什麼原因造成的？
答：
[柱物理損壞]
色譜柱有物理損壞是造成峰形拖尾的根源。唯一的解決方法就是更換新柱。
[柱內填料汙染]
流動相和樣品中的雜質是色譜柱主要汙染源。
流動相所用的各種溶劑至少是分析純，盡量使用色譜純試劑。流動相所用的水最好是超純水或全玻璃器皿雙蒸水。用前先用0.45μm溶劑微孔過濾（器）過(guo)濾(lv)，除(chu)去(qu)可(ke)能(neng)存(cun)在(zai)的(de)微(wei)粒(li)。流(liu)動(dong)相(xiang)建(jian)議(yi)現(xian)用(yong)現(xian)配(pei)，對(dui)於(yu)含(han)鹽(yan)的(de)溶(rong)液(ye)尤(you)其(qi)注(zhu)意(yi)長(chang)置(zhi)會(hui)產(chan)生(sheng)細(xi)菌(jun)或(huo)出(chu)現(xian)沉(chen)澱(dian)。此(ci)外(wai)還(hai)得(de)保(bao)證(zheng)儲(chu)存(cun)流(liu)動(dong)相(xiang)的(de)容(rong)器(qi)清(qing)潔(jie)。
複雜樣品可選用0.45μm溶劑微孔過濾（器）或(huo)樣(yang)品(pin)預(yu)處(chu)理(li)柱(zhu)對(dui)樣(yang)品(pin)進(jin)行(xing)預(yu)處(chu)理(li)，確(que)保(bao)樣(yang)品(pin)中(zhong)不(bu)含(han)微(wei)粒(li)雜(za)質(zhi)。若(ruo)樣(yang)品(pin)不(bu)便(bian)處(chu)理(li)，要(yao)使(shi)用(yong)保(bao)護(hu)柱(zhu)。柱(zhu)內(nei)填(tian)料(liao)汙(wu)染(ran)時(shi)，可(ke)將(jiang)柱(zhu)頭(tou)螺(luo)絲(si)卸(xie)下(xia)，用(yong)專(zhuan)用(yong)工(gong)具(ju)挖(wa)出(chu)柱(zhu)內(nei)前(qian)段(duan)被(bei)汙(wu)染(ran)填(tian)料(liao)，再(zai)以(yi)相(xiang)同(tong)的(de)填(tian)料(liao)重(zhong)新(xin)填(tian)入(ru)，修(xiu)複(fu)，或(huo)以(yi)能(neng)溶(rong)解(jie)汙(wu)染(ran)物(wu)的(de)流(liu)動(dong)相(xiang)按(an)色(se)譜(pu)柱(zhu)使(shi)用(yong)的(de)相(xiang)反(fan)方(fang)向(xiang)，衝(chong)洗(xi)色(se)譜(pu)柱(zhu)（約20至30倍柱體積，或視具體情況而定；另外，此時不能接檢測器），將汙染物衝出色譜柱，再按色譜柱標明的使用方向使用。
[柱進口處有異物]
當斷定是柱進口處有異物時，可將柱頭螺絲卸下，取出濾帽並將其置於20%硝酸溶液中，用超聲波清洗約20分鍾，再置於超純水中，並用超聲波清洗約10分鍾，重新裝入色譜柱內即可。
[樣品濃度過高致使柱超載]
樣品在柱上超載能引起峰展寬，拖尾（或伸舌）。
適當減小進樣量或樣品濃度（需要時，可提高檢測器靈敏度）直至峰形和保留時間不再改變，便可消除這種不良影響。減小進樣量還能改善其分離度。正常情況下，樣品中每種化合物在150×4.6mm柱中進樣量保持在3～50μg範圍內，不會引起明顯超載。
[樣品溶劑不對]
選擇合適的樣品溶劑，以排除不必要的幹擾，最好選用流動相溶解樣品。
[柱外效應]
柱外效應（即，進樣閥、色譜柱及檢測器間的管路過長、直徑過粗、管路接頭不匹配、有死體積）是shi影ying響xiang色se譜pu柱zhu柱zhu效xiao的de主zhu要yao因yin素su之zhi一yi，所suo以yi，在zai可ke能neng的de條tiao件jian下xia，色se譜pu柱zhu的de兩liang端duan連lian接jie管guan路lu要yao盡jin可ke能neng短duan，連lian接jie管guan內nei徑jing盡jin可ke能neng細xi小xiao，切qie口kou務wu必bi平ping整zheng光guang滑hua，盡jin可ke能neng的de減jian小xiao死si體ti積ji，以yi防fang止zhi因yin樣yang品pin擴kuo散san造zao成cheng不bu能neng反fan映ying色se譜pu柱zhu真zhen實shi柱zhu效xiao等deng情qing況kuang發fa生sheng。
[緩衝不足或不合適]
在緩衝不好或離子強度過低的分離中，也會出現保留時間重現性差和峰形拖尾。增加緩衝濃度（與樣品大小相匹配）能改善此情況。
[矽醇基團作用]
仔細分析色譜柱內填料表麵性質可知：fanxiangsepuzhutianliaodebiaomiandayuebeijianhexiangfugaileyiban，qiyudejiushiweibeijianhedeguichunjituan。suoweidebaoliushizhiyangpinfenziyujianhexiangxianghuzuoyongdejieguo。danshi，suanxinghuojianxinghuahewuyuguijiaobiaomiancancundeguichunjituanhuojinshuzazhizhijianxianghuzuoyongeryinqishuangzhongbaoliujili，yinci，fashenglefengxingtuowei。
為了減小峰形拖尾，通常可在流動相加入25mM三乙胺（抑製劑）。sanyiannengyuguichunjituanfashengqiangliedexianghuzuoyong，congerjiangdihuozuduanyangpinfenziyuguichunjituandezuoyong，yibaozhengbaoliujilizhengchangjinxing，bingdadahuanjielefengxingtuowei。shiyongchangliandeguichunjiyizhiji，suiqixiaojiaoman，dan，chixulijiaosanyianchang。yinweiyizhijifenzizhongchuleanjiyuguichunjituanfashengjixingzuoyongwai，dafenzizhongfeijixingbufenyugudingxiangyehuifashengfanxiangzuoyongerchanshengbaoliuxianxiang。ruguo，jiangyizhijijiazhiyangpinzhong，xiaoguohuixianzhu。
[柱內金屬汙染]
柱內金屬汙染（Fe，Ni等）可ke引yin起qi某mou引yin些xie化hua合he物wu峰feng形xing拖tuo尾wei。金jin屬shu可ke由you填tian料liao本ben身shen帶dai進jin，也ye可ke由you腐fu蝕shi性xing流liu動dong相xiang緩huan慢man溶rong解jie柱zhu進jin口kou的de金jin屬shu濾lv片pian，隨sui流liu動dong相xiang沉chen積ji到dao柱zhu填tian料liao中zhong，例li如ru，C18柱填料被金屬汙染後，造成酸性/堿性樣品拖尾，可用堿洗/酸洗後再鍵合的填料，得到的峰是尖銳且對稱的。
88.流動相與柱子如何才能做到匹配，達到最好的分離效果。目前我們實驗室有購買好的色譜柱，可是對樣品的分離效果不是很好。
答：不bu同tong填tian料liao的de色se譜pu柱zhu都dou有you自zi己ji的de選xuan擇ze性xing，相xiang同tong填tian料liao不bu同tong廠chang家jia以yi及ji相xiang同tong廠chang家jia不bu同tong品pin牌pai之zhi間jian的de選xuan擇ze性xing都dou是shi不bu一yi樣yang的de，一yi般ban情qing況kuang下xia根gen據ju物wu質zhi的de性xing質zhi將jiang分fen離li的de大da方fang向xiang如ru：正zheng相xiang分fen析xi或huo者zhe反fan相xiang分fen析xi，確que定ding後hou，一yi般ban可ke以yi根gen據ju調tiao節jie色se譜pu條tiao件jian能neng得de到dao好hao的de色se譜pu峰feng形xing，這zhe方fang麵mian的de資zi料liao論lun壇tan當dang中zhong很hen多duo，但dan是shi也ye有you些xie色se譜pu柱zhu不bu管guan怎zen麼me調tiao整zheng色se譜pu條tiao件jian都dou不bu行xing，表biao麵mian這zhe款kuan色se譜pu柱zhu的de選xuan擇ze性xing不bu適shi合he該gai樣yang品pin的de選xuan擇ze。
89.我用的是C18柱，後麵黑色的是我以前跑的圖，前麵是我現在跑的圖形，完全一樣的東西，隻是流動相不是一批配的（流動相的成分沒變），中間柱子別人用過了，峰型怎麼發生了這麼大的變化啊？可能的原因是什麼啊？是不是柱子出了問題啊？
答：從兩個圖對比很明顯可以看出是柱效嚴重下降，且伴有肩峰。不同時間配的流動相，如果成分和pH沒變的話，肯定不會造成這個結果。估計是別人用柱子過程中，造成了柱頭塌陷、柱頭汙染以及固定相流失等嚴重問題，如樣品太髒，流動相或樣品pH太高或太低，都會造成這個結果。
nikeyishizheyongsepuzhuqingxihezaishengdefangfafanchongweihuyixia，danbunengbaozhengyidingnenghuidaoyuanlaidexiaoguo。zaishengruguobuxing，kaolvwabuzhutoutianliao，shizaibuxing，zhuziyezhinengbaofei。jianyizhuzizuihaohaishizhuanmenyongyuyizhongfangfabijiaohao，xiangnizhezhongqingkuang，dougaobuqingbierenzenmeyongzhuzide，fenxijiejuewentijiuxiangdangnan。
90.柱子的柱效影響大嗎？一般柱子的柱效規定是多少的呀！理論塔板數一般要達到多少呢？主要有那些因素影響它。
答：zhuxiaoshizhuzixingnenghaohuaideyigezhongyaotixianzhibiao。zhuxiaohuiyingxiangfenlidu，dangranshifengxingyuejianrui，zhuxiaoyuegao，heqitafengyuerongyifenkai。lingwaizhuxiaogaofengxingjianrui，duifengmianjidejifenwuchajiuxiao，shenzhikeyiyongfenggaolaidingliang。
一般C18柱，在測定甲苯等不易拖尾的小分子中性不電離物質時，5μm的填料，每米的柱效能達到80000以上的塔板數，就算合格吧。在實際分析物的測定時，一般藥典有規定最低柱效是2000～3000，一yi般ban新xin柱zhu子zi的de柱zhu效xiao都dou高gao於yu這zhe個ge數shu。但dan柱zhu子zi在zai使shi用yong後hou，由you於yu固gu定ding相xiang流liu失shi等deng原yuan因yin，柱zhu效xiao會hui逐zhu步bu下xia降jiang，當dang下xia降jiang到dao不bu符fu合he藥yao典dian最zui低di柱zhu效xiao要yao求qiu，或huo者zhe導dao致zhi分fen離li度du不bu夠gou時shi，色se譜pu柱zhu就jiu算suan壽shou命ming到dao了le。單dan從cong柱zhu效xiao逐zhu步bu下xia降jiang這zhe個ge角jiao度du看kan，柱zhu效xiao高gao的de色se譜pu柱zhu相xiang對dui使shi用yong壽shou命ming更geng長chang。
影響柱效的因素有粒徑、粒徑和孔徑分布、固定相鍵合密度、柱外體積和溫度等，柱子裝填緊密、柱床均勻一致也對提高柱效有好處。這些影響因素中，很多是和生產廠商有關，你這邊能做的是盡量減少柱外連接體積。
91.流動相中加入四氫呋喃對柱子有損害嗎?我現在分析一樣品流動相中用到20%的四氫呋喃才能把峰分到基線.但柱子隻能用一個星期分離效果就不好了.請問是四氫呋喃損壞了柱子嗎?
答：四氫呋喃（THF）是反相色譜中洗脫能力極強的溶劑，比甲醇和乙腈都強很多。在流動相中加入THF能改善某些難分離的物質對的分離度，但，THF不穩定，容易降解生成具有很強反應活性的過氧化物，能與分析物反應生成新化合物，導致拖尾、峰分裂和鬼峰產生。高反應活性的過氧化物還可以和填料固定相發生化學作用，THF對柱子有損傷這點是無疑的，而且這種損傷是隨時間累積的。THF保質期一般規定是6個月，放得越久，裏麵產生的過氧化物含量越大，你應該避免使用生產日期已很久的THF溶劑，而且最好將THF冷藏、幹燥和避光保存，使用前最好能檢測一下過氧化物的含量。
92.在用液相色譜同時分離多種組分時，怎麼通過條件色譜條件使各個峰達到比較理想的分離效果！
答：這是方法開發的大問題。方法開發建立，要做的就是：針對分析物和基體的情況不同，選擇色譜柱類型和分析條件，包括流動相溶劑類型、組成比例、pH值、溫度和流速等參數的確定。這方麵的問題，要講起來內容非常多。
93.是樣品過載問題,按藥典檢測方法檢驗一些藥品有關物質時,都要注入高濃度的供試液,這樣往往使得柱過載而峰變形,按老師的方法減小濃度和注入量均是不允許的,怎麼處理這問題?
答：yaodianfangfazhongzhurugaonongdugongshiyecedingyouguanwuzhi，tigaozhurunongdushiweilebazazhifengdexinhaozengqiang。youshihouweilebazazhifengxianxianchulai，zhufengyinguozaiyousuobianxing，ruzaiyunxufanweinei，yenengjieshou。danqiantishizazhifengheyangpinzhufengfenkai，ruguoyinguozaiershiliangfengmeiyoudedaoxuyaodefenlidu，zazhifengxinhaozaiqiangyeshiquleyiyi。worenweiyaodianguidingdetiaojianshiyunxuzaiyidingfanweineijinxingtiaojiede，yinweiyaodianmeiyouguidingjutishiyongsepuzhudepinpai，erbutongpinpaidezhuzi，shangyangliangshiyouchayide。duiseputiaojianweitiao，bingqudedaolehenhaodefenxijieguo，ruguoguidingbuyunxu，nanishouxianyaohuaiyizhegeguidingshifouheli，huozheshifouduiguidingdelijieyouwenti。
94.哪些原因會造成色譜峰變寬、峰高變低，有哪些解決辦法？
答：確實是這樣，如果其它色譜條件沒有改變，柱效下降是導致峰變寬的主要原因。對於易電離的極性物質，如果流動相pH選擇不合適，分析物既有中性分子態存在，又有離子態存在，峰也會變寬變矮。
sepuzhushiyonghouzhuxiaozhubuxiajiangshizhengchangxianxiang，ruturanjiangdizeshuyichang。zhuxiaoxiajiangyuanyinyouhenduo，danzhuxiaokuaisuxiajiangzeduobanshishiyongbudang，zaochengtianliaotexinghuozhuchuangjiegougaibiansuozhi。ruchaoguoshiyongpH範圍造成的固定相和矽膠基體的流失、柱床塌陷等；還有強保留物質吸附在填料表麵，形成非特異性吸附層，完全改變了原有固定相的表麵活性和分離性能，使柱效下降；另外進樣時的壓力脈衝，也會破壞柱床結構影響柱效。
95.我以前做蘇丹紅用的是安捷倫的SB-C18柱，峰形什麼都很好，最近發現4個標樣峰後都帶有一個小峰，一開始以為是標樣問題，後來換XDB-C18後標樣又正常了。可是用SB-C18柱做其他用正常，不知怎麼回事？還有，像這種C18柱如果壓力過高能不能反衝，該如何衝洗？一般做獸殘、農殘什麼的，而且感覺三聚氰胺做後壓力更易增高，且容易引發進樣器漏等問題，請問做完三聚氰胺需對係統做特殊清洗嗎？
答：用SBzhu，biaoyanghoudaiyixiaofeng，erqieshizhiduisudanhongbiaoyangcedingshiyou，gujihesudanhongbiaoyangdecedingfangfaheqitayangpincedingfangfabutongyouguan。zuihaonengbapututieshanglaikankan，shishenmeyangdexiaofeng？cainengpanduanshirongjifenghaishizazhifeng。XDB柱和SB柱是有區別的，XDB鍵合度高，封尾良好，反相保留能力強；而SB柱，未進行封尾，對極性物質選擇性好。有可能你的蘇丹紅標樣分解了，有極性雜質生成，SB柱能把雜質分開，而XDB柱不能。
這(zhe)兩(liang)款(kuan)柱(zhu)子(zi)壓(ya)力(li)大(da)了(le)，可(ke)以(yi)反(fan)衝(chong)。有(you)正(zheng)常(chang)維(wei)護(hu)時(shi)的(de)反(fan)衝(chong)衝(chong)洗(xi)和(he)再(zai)生(sheng)時(shi)的(de)強(qiang)溶(rong)劑(ji)衝(chong)洗(xi)兩(liang)種(zhong)，衝(chong)洗(xi)方(fang)法(fa)在(zai)在(zai)線(xian)講(jiang)座(zuo)裏(li)也(ye)寫(xie)了(le)，你(ni)再(zai)回(hui)到(dao)本(ben)貼(tie)的(de)前(qian)麵(mian)看(kan)看(kan)就(jiu)可(ke)以(yi)了(le)。
三(san)聚(ju)氰(qing)胺(an)和(he)三(san)乙(yi)胺(an)類(lei)似(si)，本(ben)身(shen)容(rong)易(yi)和(he)矽(gui)醇(chun)基(ji)作(zuo)用(yong)而(er)吸(xi)附(fu)在(zai)填(tian)料(liao)表(biao)麵(mian)，另(ling)外(wai)三(san)聚(ju)氰(qing)胺(an)測(ce)定(ding)的(de)樣(yang)品(pin)基(ji)體(ti)含(han)蛋(dan)白(bai)類(lei)的(de)強(qiang)保(bao)留(liu)物(wu)質(zhi)較(jiao)多(duo)，容(rong)易(yi)汙(wu)染(ran)色(se)譜(pu)柱(zhu)柱(zhu)頭(tou)引(yin)起(qi)填(tian)料(liao)間(jian)隙(xi)堵(du)塞(sai)柱(zhu)壓(ya)升(sheng)高(gao)，最(zui)好(hao)每(mei)次(ci)做(zuo)完(wan)樣(yang)後(hou)，都(dou)用(yong)甲(jia)醇(chun)或(huo)乙(yi)腈(jing)反(fan)向(xiang)清(qing)洗(xi)維(wei)護(hu)一(yi)下(xia)。如(ru)有(you)蛋(dan)白(bai)類(lei)的(de)汙(wu)染(ran)，也(ye)定(ding)時(shi)用(yong)本(ben)講(jiang)座(zuo)中(zhong)提(ti)到(dao)的(de)清(qing)洗(xi)方(fang)法(fa)做(zuo)一(yi)下(xia)維(wei)護(hu)。
96.我是做農藥殘留分析的，不同的基質雜質含海量是不同的，我用C18分析時有可能一次就汙染了，我用高流速，和反向衝洗都解決不了，是不是這根柱子就廢了，有沒有其他的辦法？
答：gaoliusufanxiangchongxishiduide，guanjianniyongleshenmerongjichongxine？yongyuanlaideliudongxiangchongxikendingbuguanyong，yaoburanjiubuhuileijizaizhuzishangle。niyinggaiyongliudongxiangzhongdeqiangrongjiB衝洗，如果不行，就需要啟用再生的程序，當然再生時用的溶劑更強。
100％甲醇——100％乙晴——75％乙晴/25％異丙醇——100％異丙醇——100％二氯甲烷——100％正己烷。
用每種溶劑衝洗至少10個柱體積，對於250mm×4.6mm的分析柱，合適的衝洗流速是1～2mL/min。最後，用10柱體積的異丙醇過渡，然後回到原來的流動相體係。
zaishenghaibujiejuewenti，zuihouyizhaojiushiwabuzhutoutianliao，bazhutouwurandetianliaowadiao，yongganjingtianliaotianbujinqu。wabutianliao，pohuaiyuanyouzhuchuangjiegou，wabuhouzhuxiaoyebukenengyouxinzhushuiping，huoxunengzaiweichiyiduanshijian，danbuhuichangjiu。
97.還有溶劑中的金屬過濾頭生鏽了，會有什麼影響？會不會影響到柱子的壽命，金屬離子和柱子有沒有什麼反應？
答：我覺得你就把鏽當成顆粒物汙染的一種，會導致拖尾、柱壓上升等。溶解的金屬離子一般在反相柱上沒有什麼保留能力，馬上就會被衝出柱子，不會和固定相或者和矽膠基質反應。
98.如果在溶劑過濾時把水膜當成有機膜了溶解了而且這樣的溶劑又做有機相用了，造成C18柱壓由1000升到3000，流動相是乙腈和水，問一下這樣的柱子還能用麼？有沒有什麼補救方法？
答：溶解的膜作為了顆粒物堵塞篩板，引起柱壓上升，也隻有反衝一下，如果能把堵在篩板上的膜殘渣衝走，柱壓下降了就OK了；如ru果guo，殘can渣zha進jin入ru了le柱zhu子zi內nei部bu的de填tian料liao間jian隙xi，會hui難nan衝chong一yi點dian，也ye隻zhi能neng多duo衝chong一yi會hui吧ba，實shi在zai不bu行xing，你ni又you舍she不bu得de把ba色se譜pu柱zhu報bao廢fei，就jiu隻zhi有you挖wa補bu柱zhu頭tou填tian料liao和he換huan篩shai板ban了le。
99.保護柱和預柱的作用是不是一樣的，如果不一樣有什麼區別麼？保留時間漂移多少為可以接受的範圍？
答：保護柱一般帶填料，相當於一根縮短了的色譜柱（一般是1～2cm長度），卡套裏可更換的柱芯，柱管、shaibanhetianliaodouyou。baohuzhulidezhuxinhaoxiangshizaiqianmiankailudesaoleibudui，liudongxiangheyangpinliruyoushenmesunhaizhuzidewuranwu，baohuzhujiuzijichengshoulexialai。
eryuzhu，xianzaiyibanzhidejiushijiezaijinyangqihesepuzhuzhiqiandezaixianguolvqi。zaixianguolvqihebaohuzhudezuidaqubieshibudaitianliao，zhiyoukegenghuandeshaiban。yuzhuzhinengbaohusepuzhumianshoukeliwuzhidewuran，erbunengzudangrongjiezailiudongxiangzhongdeqiangbaoliuwuzhi。
保留時間是液相色譜中一個很有用的診斷分離問題的工具。保留時間受流動相組成、溫度、pH、流速、固(gu)定(ding)相(xiang)流(liu)失(shi)和(he)柱(zhu)老(lao)化(hua)等(deng)很(hen)多(duo)因(yin)素(su)的(de)影(ying)響(xiang)，如(ru)果(guo)所(suo)有(you)這(zhe)些(xie)參(can)數(shu)保(bao)持(chi)不(bu)變(bian)，保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)也(ye)保(bao)持(chi)恒(heng)定(ding)。但(dan)在(zai)實(shi)際(ji)操(cao)作(zuo)中(zhong)，不(bu)可(ke)能(neng)對(dui)每(mei)個(ge)色(se)譜(pu)參(can)數(shu)進(jin)行(xing)很(hen)完(wan)美(mei)的(de)控(kong)製(zhi)，如(ru)即(ji)便(bian)加(jia)了(le)柱(zhu)溫(wen)箱(xiang)，溫(wen)度(du)還(hai)是(shi)會(hui)有(you)波(bo)動(dong)；流動相組成會因組分揮發性不同而改變。
所以，保留時間有上下0.02～0.05min的變動是非常正常的，對某些方法有0.1min上(shang)下(xia)變(bian)動(dong)也(ye)屬(shu)正(zheng)常(chang)。保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)有(you)大(da)的(de)變(bian)化(hua)，預(yu)示(shi)著(zhe)係(xi)統(tong)和(he)方(fang)法(fa)存(cun)在(zai)問(wen)題(ti)。流(liu)路(lu)裏(li)有(you)氣(qi)泡(pao)存(cun)在(zai)，泵(beng)閥(fa)有(you)泄(xie)漏(lou)，會(hui)因(yin)流(liu)量(liang)降(jiang)低(di)而(er)導(dao)致(zhi)保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)增(zeng)加(jia)。梯(ti)度(du)混(hun)合(he)比(bi)例(li)閥(fa)故(gu)障(zhang)也(ye)是(shi)保(bao)留(liu)時(shi)間(jian)變(bian)化(hua)原(yuan)因(yin)之(zhi)一(yi)。
100.液相色譜柱與氣相的柱子有何區別呢？
