薄層分析法(TLC)
TLC法(fa)是(shi)檢(jian)測(ce)黃(huang)曲(qu)黴(mei)素(su)最(zui)為(wei)經(jing)典(dian)的(de)方(fang)法(fa),也(ye)是(shi)以(yi)前(qian)最(zui)為(wei)常(chang)用(yong)的(de)方(fang)法(fa),至(zhi)今(jin)仍(reng)為(wei)一(yi)些(xie)檢(jian)測(ce)機(ji)構(gou)所(suo)用(yong),也(ye)是(shi)一(yi)種(zhong)國(guo)標(biao)方(fang)法(fa)。其(qi)原(yuan)理(li)是(shi)針(zhen)對(dui)不(bu)同(tong)的(de)試(shi)樣(yang),用(yong)適(shi)宜(yi)的(de)萃(cui)取(qu)溶(rong)劑(ji)將(jiang)黃(huang)曲(qu)黴(mei)素(su)從(cong)試(shi)樣(yang)中(zhong)萃(cui)取(qu)出(chu)來(lai),經(jing)柱(zhu)層(ceng)析(xi)淨(jing)化(hua)後(hou),再(zai)在(zai)薄(bo)板(ban)上(shang)展(zhan)開(kai)後(hou)分(fen)離(li)。
liyonghuangqumeisudeyingguangtexing,genjuyingguangbandiandeqiangruoyubiaozhunbijiaoquedingqihanliang,duiyuyixiezufenhenfuzadeshiyangyaoshuangxiangzhankai,cainenghuodejiaogaodelingmindu。
TLC法設備簡單,檢測費用低,但操作繁瑣、費時,萃取和淨化效果不理想,靈敏度差,對操作人員的身體健康存在較大程度的危害。
液相色譜法(HPLC)
HPLC法(fa)是(shi)近(jin)年(nian)來(lai)發(fa)展(zhan)起(qi)來(lai)的(de)一(yi)種(zhong)檢(jian)測(ce)方(fang)法(fa)。其(qi)原(yuan)理(li)是(shi)在(zai)高(gao)效(xiao)液(ye)相(xiang)色(se)譜(pu)儀(yi)上(shang)添(tian)加(jia)柱(zhu)後(hou)衍(yan)生(sheng)係(xi)統(tong)分(fen)離(li),再(zai)用(yong)熒(ying)光(guang)檢(jian)測(ce)器(qi)測(ce)定(ding)。與(yu)其(qi)配(pei)套(tao)的(de)柱(zhu)後(hou)衍(yan)生(sheng)係(xi)統(tong)有(you)碘(dian)衍(yan)生(sheng)化(hua)法(fa)、溴衍生化法及較為先進的電化學衍生化法和光化學衍生化法。當前,該方法大多用免疫親和柱來淨化、分離,其淨化效果優異。
該法能準確地分離不同種類的黃曲黴素(例如:AFB1、AFB2、AFG1和AFM1等),jiancesudukuaiqiedingxingyudingliangzhunque,jiancexiandi,kezuoweizhongcaifashiyong,danyiqishebeijiageanggui,qianchulifangfaxiangduifansuo,ruoyongdaomianyiqinhezhuzehuishishiyangjiancefeiyongzengjia,duicaozuorenyuandeshentijiankangrengcunzaiyidingdeweihai。
酶聯免疫法(ELISA)
ELISA法fa也ye是shi近jin年nian來lai研yan究jiu開kai發fa出chu來lai的de一yi種zhong較jiao為wei新xin穎ying的de方fang法fa。其qi原yuan理li是shi根gen據ju抗kang體ti和he抗kang原yuan之zhi間jian特te異yi性xing的de免mian疫yi學xue反fan應ying,最zui後hou用yong測ce定ding酶mei活huo力li的de方fang法fa來lai增zeng加jia測ce定ding的de靈ling敏min度du。
該方法檢測速度快、對人體危害小、但重複性差、試劑壽命短、需低溫保存、假陽性概率較高、需要配置專門的酶標儀,且對一些富含鹽和脂肪的試樣需進行額外的處理。
毛細管電泳法(CE)
毛細管電泳(CE)也是一種新發展起來的分析黃曲黴素的方法。該方法與激光減弱熒光檢測器(LIF)連用可很好地提高靈敏度。
Wei等用毛細管電泳一激光減弱熒光檢測器測定AFB1、AFB2、AFG1和AFG1,取得了較為理想的分離效果,其中對AFB2的測定最為靈敏。但CE法的成本較高,操作複雜,不適宜在試樣檢測中廣泛應用。
熒光光度法(IAC/SFB)
IA C/SFB法也是一種常用的國標方法。該方法的原理是利用各種黃曲黴素的熒光特性差異用熒光光度計測定試樣中黃曲黴素的含量。
該gai方fang法fa對dui檢jian測ce人ren員yuan身shen體ti健jian康kang無wu危wei害hai,檢jian測ce速su度du迅xun速su,靈ling敏min度du高gao,適shi用yong於yu大da量liang試shi樣yang檢jian測ce,且qie定ding量liang準zhun確que,但dan檢jian測ce費fei用yong較jiao高gao,需xu要yao配pei置zhi專zhuan用yong設she備bei,且qie不bu能neng對dui單dan一yi的de毒du素su進jin行xing檢jian測ce。
金標試紙法
金標試紙法,實際就是一種固相免疫分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結合反應,可一步檢測黃曲黴素。
該法可在5~10 min內完成對試樣中黃曲黴素的定性測定,具有簡單、快速的特點,且無須其他儀器設備的配合,既可在實驗室中進行檢測,也可在現場進行實地測定,但是其檢測的準確度、精度有待進一步的研究。
生物傳感器法
生(sheng)物(wu)傳(chuan)感(gan)器(qi)是(shi)使(shi)用(yong)固(gu)定(ding)化(hua)技(ji)術(shu)將(jiang)具(ju)有(you)分(fen)子(zi)識(shi)別(bie)能(neng)力(li)的(de)生(sheng)物(wu)活(huo)性(xing)物(wu)質(zhi)與(yu)物(wu)理(li)化(hua)學(xue)換(huan)能(neng)器(qi)結(jie)合(he),可(ke)以(yi)用(yong)來(lai)探(tan)測(ce)生(sheng)物(wu)體(ti)內(nei)外(wai)的(de)環(huan)境(jing)化(hua)學(xue)物(wu)質(zhi)或(huo)與(yu)之(zhi)起(qi)特(te)異(yi)性(xing)交(jiao)互(hu)作(zuo)用(yong)後(hou)產(chan)生(sheng)響(xiang)應(ying)的(de)一(yi)種(zhong)裝(zhuang)置(zhi)。其(qi)中(zhong)利(li)用(yong)分(fen)子(zi)間(jian)特(te)異(yi)親(qin)和(he)性(xing)製(zhi)備(bei)的(de)親(qin)和(he)型(xing)生(sheng)物(wu)傳(chuan)感(gan)器(qi)為(wei)免(mian)疫(yi)傳(chuan)感(gan)器(qi)口(kou)。
根據能量轉換器所傳導的物理或化學信號的不同,免疫傳感器可分為電化學免疫傳感器、光學免疫傳感器、壓電晶體免疫傳感器等。由於生物傳感器具有選擇性高、響應快、操作簡單、攜帶方便和適合於現場檢測等優點,因此各國科研工作者正積極探索研製新型生物傳感器用於檢測黃曲黴素。
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