meibiaoyizuijiandandeshiyonglvguangfangshilaihuafen。yibanlaishuo
，keyifenweilvguangpianxingheguangzhaxingliangdalei。yeyouyixiemeibiaoyilimiantongshizhuangshanglelvguangpianheguangzha。danshilvpianheguangzhabingbunengtongshiwanchengtongyigejiance，benzhishanghaizhishibalvpianheguangzhafangzaileyiqi，bingmeiyoushiliangzherouheerchanshengxindejishutupo。

光guang柵zha型xing濾lv光guang係xi統tong具ju有you使shi用yong方fang便bian，可ke以yi進jin行xing光guang譜pu掃sao描miao
，靈ling活huo性xing等deng優you點dian。當dang然ran，濾lv光guang片pian係xi統tong也ye有you其qi顯xian著zhu的de優you勢shi
，例li如ru價jia格ge較jiao為wei便bian宜yi，檢jian測ce靈ling敏min度du高gao，帶dai寬kuan的de可ke選xuan擇ze性xing，可ke以yi進jin行xing快kuai速su的de濾lv光guang片pian切qie換huan，可ke配pei備bei有you自zi動dong加jia樣yang係xi統tong，在zai化hua學xue發fa光guang檢jian測ce中zhong光guang線xian的de透tou過guo率lv高gao。

目前，濾光片係統應用更廣，因為它可以讓實驗者完成更多的試驗。

一般酶標儀的測定波長在400～750nm或800nm之間，完全可以滿足ELISA的顯色測定。目前國內常見的ELISA試劑盒所使用的標記用酶均為辣根過氧化物酶(HRP)

，底物通常為四甲基聯苯胺(TMB)和鄰苯二胺(OPD)，其在過氧化氫溶液的存在下
，經HRP作用，分別氧化為2，2，—二氨基偶氮苯(DAB)和聯苯醌。當pH值為5．0左右時，DAB在450nm波長處有最大吸收
，當pH值降為L 0時
，最大吸收波長移至492 nm，同時摩爾消光係數變大，顯色加深，因而常用強酸如硫酸或鹽酸終止反應。TMB的氧化產物聯苯醌在波長450nm處有最大消光係數，如果HRP量少，H：O：和TMB過量時
，則形成藍色的陽離子根。降低pH
，即可使藍色的陽離子根轉變為黃色的聯苯醌，使用硫酸作為終止劑可使產物穩定90min。因此
，450nm和492 nm兩個波長是目前ELISA測定最常用的。各種酶標儀都配有放置濾光片的可自動轉換的部件，可以同時安裝6～8片濾光片，所配備的濾光片均應包括上述兩個波長，有的酶標儀以490nm濾光片替代492nm濾光片
，影響不大。除了這兩個基本濾光片外
，考慮到雙波長比色的需要，還應有620nm或630nm或650nm和405nm波(bo)長(chang)的(de)濾(lv)光(guang)片(pian)，其(qi)他(ta)濾(lv)光(guang)片(pian)可(ke)根(gen)據(ju)自(zi)己(ji)的(de)需(xu)要(yao)選(xuan)擇(ze)。有(you)時(shi)

，有(you)的(de)實(shi)驗(yan)室(shi)希(xi)望(wang)用(yong)酶(mei)標(biao)儀(yi)作(zuo)微(wei)量(liang)生(sheng)化(hua)測(ce)定(ding)
，故(gu)酶(mei)標(biao)儀(yi)生(sheng)產(chan)廠(chang)家(jia)對(dui)其(qi)生(sheng)產(chan)的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)擴(kuo)展(zhan)了(le)紫(zi)外(wai)檢(jian)測(ce)功(gong)能(neng)
，此(ci)時(shi)需(xu)要(yao)一(yi)個(ge)340 nm波長濾光片。此時，酶標儀的測定波長範圍就成為340—750nm或800nm。

 

酶標儀有單波長和雙波長檢測功能。有時使用者不知在什麼情況下使用單或雙波長檢測。所謂的“單波長”就是使用一種對顯色具最大吸收的波長即450 nm或492 nm進行比色測定；而“雙波長”則除了用對顯色具最大吸收的波長即450 nm或492 nm進行比色測定外，同時用對特異顯色不敏感的波長如630 nm進行測定
，酶標儀最後打印出來的吸光度則為二者之差。630 nm波長下得到的吸光度是非特異的，來自於板孔上諸如指紋
、灰塵
、髒物等所致的吸收。因此
，在ELISA比色測定中，最好使用雙波長，且不必設空白孔。

測定的吸光度範圍

通常
，酶標儀的吸光度測定範圍在0～2.5之間即可以滿足ELISA的測定要求。早期的酶標儀可測定的吸光度一般在0～2.5之間
，但現在基本上都做了拓寬
，可達到3.5以(yi)上(shang)，並(bing)且(qie)能(neng)保(bao)持(chi)很(hen)好(hao)的(de)精(jing)密(mi)度(du)與(yu)線(xian)性(xing)。因(yin)此(ci)
，對(dui)於(yu)酶(mei)標(biao)儀(yi)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)範(fan)圍(wei)不(bu)必(bi)去(qu)刻(ke)意(yi)追(zhui)求(qiu)大(da)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)範(fan)圍(wei)，主(zhu)要(yao)要(yao)看(kan)在(zai)一(yi)定(ding)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)範(fan)圍(wei)內(nei)的(de)線(xian)性(xing)和(he)精(jing)密(mi)度(du)如(ru)何(he)。

酶標儀的光學係統采用的是垂直光路多通道(通常為8或12通道，亦有單通道)檢(jian)測(ce)，一(yi)般(ban)為(wei)矽(gui)光(guang)管(guan)或(huo)光(guang)導(dao)纖(xian)維(wei)

，除(chu)測(ce)定(ding)通(tong)道(dao)外(wai)，有(you)的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)還(hai)有(you)一(yi)個(ge)參(can)比(bi)通(tong)道(dao)，每(mei)次(ci)測(ce)定(ding)可(ke)進(jin)行(xing)自(zi)我(wo)校(xiao)準(zhun)。酶(mei)標(biao)儀(yi)的(de)光(guang)學(xue)係(xi)統(tong)功(gong)能(neng)如(ru)何(he)，均(jun)可(ke)通(tong)過(guo)酶(mei)標(biao)儀(yi)測(ce)定(ding)的(de)吸(xi)光(guang)度(du)範(fan)圍(wei)、線性度、精(jing)密(mi)度(du)和(he)準(zhun)確(que)度(du)等(deng)體(ti)現(xian)出(chu)來(lai)。光(guang)學(xue)係(xi)統(tong)好(hao)的(de)話(hua)
，則(ze)上(shang)述(shu)指(zhi)標(biao)也(ye)應(ying)較(jiao)佳(jia)。測(ce)定(ding)的(de)精(jing)密(mi)度(du)與(yu)測(ce)定(ding)通(tong)道(dao)之(zhi)間(jian)的(de)均(jun)一(yi)性(xing)有(you)直(zhi)接(jie)關(guan)係(xi)。單(dan)通(tong)道(dao)可(ke)避(bi)免(mian)因(yin)通(tong)道(dao)不(bu)同(tong)所(suo)致(zhi)的(de)差(cha)異(yi)。

檢測速度

酶(mei)標(biao)儀(yi)的(de)檢(jian)測(ce)速(su)度(du)是(shi)指(zhi)其(qi)完(wan)成(cheng)比(bi)色(se)測(ce)定(ding)所(suo)需(xu)要(yao)的(de)時(shi)間(jian)。檢(jian)測(ce)速(su)度(du)快(kuai)
，有(you)利(li)於(yu)提(ti)高(gao)檢(jian)測(ce)的(de)精(jing)密(mi)度(du)，即(ji)避(bi)免(mian)由(you)於(yu)測(ce)定(ding)過(guo)程(cheng)中(zhong)，因(yin)測(ce)定(ding)時(shi)間(jian)不(bu)同(tong)所(suo)致(zhi)的(de)各(ge)微(wei)孔(kong)間(jian)吸(xi)光(guang)度(du)間(jian)的(de)差(cha)異(yi)。目(mu)前(qian)市(shi)場(chang)上(shang)常(chang)見(jian)的(de)酶(mei)標(biao)儀(yi)檢(jian)測(ce)速(su)度(du)都(dou)非(fei)常(chang)快(kuai)
，通(tong)常(chang)在(zai)數(shu)秒(miao)鍾(zhong)內(nei)。

酶標儀的震板功能是指酶標儀在對ELISAbankongjinxingbisecedingqianduiqijinxingzhendanghunyun，shibankongneiyansejunyi。muqianshichangshangchangjiandemeibiaoyijunyouzhenbangongneng
，suobutongdeshizhenbanfangshi，youdekeanshangxia
、左右或旋轉等方式及振蕩幅度等任意調節；有的則較為固定。使用有震板功能的酶標儀
，在進行ELISA測定顯色反應完成加入終止劑後，可不必振蕩混勻
，直接放人酶標儀上測定即可。

溫育功能是指酶標儀本身能按要求自動精確地控製儀器內部的溫度
，使得ELISAcedingzhongweikongbantiaodewenyuguochengkezaiyiqineibuwancheng，erwuxuzaiwaipeiwenxiang。muqian，zhiyoushaobufenmeibiaoyijuyoucizhonggongneng，wenyugongnengzhishimeibiaoyideyigefujiagongneng，shifoujuyoubingbunengshuomingmeibiaoyidangcidegaodijiyiqideyoulie。zuoweishiyanshishifouxuanze
，zekegenjuzijishiyanshidetiaojianjixuyaolaijueding。

軟件功能是指酶標儀所具有的對ELISA定性和定量測定及其他測定方式如酶標動力學、紫zi外wai和he凝ning集ji等deng數shu據ju的de統tong計ji分fen析xi並bing報bao告gao結jie果guo的de功gong能neng。軟ruan件jian功gong能neng是shi中zhong高gao檔dang酶mei標biao儀yi的de一yi個ge非fei常chang重zhong要yao的de功gong能neng。如ru果guo硬ying件jian方fang麵mian區qu別bie不bu大da，則ze軟ruan件jian就jiu成cheng為wei判pan定ding酶mei標biao儀yi優you劣lie的de惟wei一yi指zhi標biao。對dui於yu用yong戶hu來lai說shuo
，好hao的de軟ruan件jian功gong能neng，對dui實shi際ji工gong作zuo會hui有you較jiao大da的de幫bang助zhu。ELISA定性測定，酶標儀如具有陽性判斷值(cut-off)及其測定“灰區”(即指測定吸光度處於cut—off周圍的一定區域
，此區域內結果應為“可疑”)的(de)統(tong)計(ji)計(ji)算(suan)功(gong)能(neng)，不(bu)但(dan)方(fang)便(bian)了(le)實(shi)驗(yan)室(shi)工(gong)作(zuo)人(ren)員(yuan)，而(er)且(qie)在(zai)某(mou)些(xie)特(te)定(ding)的(de)情(qing)況(kuang)下(xia)，有(you)很(hen)高(gao)的(de)實(shi)用(yong)價(jia)值(zhi)。因(yin)此(ci)，如(ru)目(mu)的(de)是(shi)定(ding)量(liang)測(ce)定(ding)，則(ze)在(zai)酶(mei)標(biao)儀(yi)的(de)軟(ruan)件(jian)功(gong)能(neng)中(zhong)
，最(zui)好(hao)要(yao)有(you)這(zhe)種(zhong)曲(qu)線(xian)回(hui)歸(gui)方(fang)程(cheng)計(ji)算(suan)分(fen)析(xi)功(gong)能(neng)。其(qi)他(ta)諸(zhu)如(ru)連(lian)點(dian)、直線等回歸計算

，則可根據酶標儀的應用目的而定
，如兼用於微量生化測定
，則此類回歸計算就很有必要。

此外，酶標儀兼做酶標動力學
、ningjifanyingcedingsuoxuderuanjianshifouyingjubei，dangranyeyinggenjushiyongmudeerding。youyucileiruanjianyibandoujiaoweianggui，meibiaoyichanglingwaidanduanxupeibei

，ruguobushishiyanshiteshuxuyao

，jiububiqiangqiuzhezhongruanjiangongneng。 

通tong常chang進jin口kou的de中zhong高gao檔dang酶mei標biao儀yi人ren機ji對dui話hua多duo采cai用yong英ying文wen。這zhe對dui於yu某mou些xie基ji層ceng實shi驗yan室shi可ke能neng會hui存cun在zai語yu言yan方fang麵mian的de困kun難nan，從cong而er難nan以yi最zui大da限xian度du地di發fa揮hui酶mei標biao儀yi的de作zuo用yong。為wei解jie決jue這zhe方fang麵mian的de問wen題ti，已yi有you一yi些xie酶mei標biao儀yi采cai用yong了le中zhong文wen界jie麵mian。這zhe樣yang就jiu大da大da方fang便bian了le廣guang大da基ji層ceng實shi驗yan室shi技ji術shu人ren員yuan的de使shi用yong。

綜(zong)上(shang)所(suo)述(shu)
，盡(jin)管(guan)酶(mei)標(biao)儀(yi)的(de)發(fa)展(zhan)極(ji)為(wei)快(kuai)速(su)，種(zhong)類(lei)繁(fan)多(duo)，功(gong)能(neng)也(ye)不(bu)斷(duan)加(jia)強(qiang)
，但(dan)其(qi)最(zui)根(gen)本(ben)的(de)功(gong)用(yong)是(shi)不(bu)變(bian)的(de)，即(ji)比(bi)色(se)測(ce)定(ding)。大(da)凡(fan)比(bi)色(se)測(ce)定(ding)，其(qi)基(ji)本(ben)要(yao)求(qiu)就(jiu)是(shi)在(zai)一(yi)定(ding)吸(xi)光(guang)度(du)範(fan)圍(wei)內(nei)要(yao)有(you)好(hao)的(de)測(ce)定(ding)準(zhun)確(que)性(xing)、線性和精密性。同樣的吸光度範圍，測定的準確性

、線性和精密性越好則酶標儀亦越佳。

而且，由於用於酶標儀比色測定的為多孔(通常為96孔)微孔板條，為保證測定的孔間重複性

，則測定速度也是一個較重要的性能指標。至於其他如震板
、溫育及有關的軟件功能，則是選配功能
，不影響酶標儀其他的使用性能。