1.營養成分
1)通常在培養基中加入磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀和硫酸鎂,以補充磷、鉀、硫、鎂元素,如果同時加入鈣鹽和(亞)鐵鹽,它們用量要適當加大,主要是考慮它們之間會發生反應形成不溶性的磷酸鹽或氫氧化物,影響微生物的利用。蛋白腖、酵母膏和其他生物製品中都含有磷酸鹽,若培養基中有Mg2+和Ca2+等離子,就會出現沉澱、渾濁。為避免生成沉澱,可將鹽配成溶液,分開滅菌後再加入培養基。
2)有些糖類或營養物質如葡萄糖、維生素等在高溫高壓下會被破壞,故應降低壓力、溫度或縮短滅菌時間,或用過濾或其他方法除菌。
3)除培養固氮菌外,在培養基中需加入無機氮源或有機氮源。許多細菌不能利用硝酸鹽、宜用銨鹽作為無機氮源;真菌大多可利用銨鹽,也可利用硝酸鹽。細菌雖能利用無機氮,但不如利用有機氮普遍,常用的有機氮源有蛋白腖、牛肉膏和水解酪蛋白等。
4)配pei製zhi培pei養yang基ji時shi,營ying養yang物wu質zhi的de濃nong度du應ying適shi當dang,太tai低di不bu能neng滿man足zu生sheng長chang需xu求qiu,偏pian高gao會hui使shi菌jun體ti瘋feng長chang,過guo高gao還hai會hui抑yi製zhi微wei生sheng物wu生sheng長chang。所suo以yi配pei製zhi培pei養yang基ji應ying按an規gui定ding的de濃nong度du配pei製zhi。
2.pH值
微生物要求培養基有適宜的pH值,但它們的代謝作用又會改變培養基pH。所以在配製培養基時,不僅培養基的起始pH值應符合微生物的要求,還要考慮采用何種緩衝作用保持其pH。一yi般ban在zai培pei養yang產chan酸suan的de微wei生sheng物wu時shi可ke在zai培pei養yang基ji中zhong加jia入ru適shi量liang碳tan酸suan鈣gai,以yi中zhong和he不bu斷duan產chan生sheng的de酸suan。在zai合he成cheng培pei養yang基ji中zhong,組zu成cheng成cheng分fen中zhong含han有you磷lin酸suan鹽yan者zhe一yi般ban都dou已yi設she計ji好haopH值,故不需要再專門調pH值。若pH值降到4.5以下,瓊脂固體培養基滅菌後將不再凝固,或凝固不堅,可將相關成分分別滅菌後再混合較好。
3.滅菌
yibanpeiyangjijuncaiyongshiregaowengaoyamiejun,miejunhoupeiyangjiyanseruobianhesehuohesejiashen,zhuyaoyuanyinshihaiyuantangleiyudanbaizhiheanjisuanzaigaowengaoyaxiafashenglemeiladefanying。zhezhonghesewuzhihuiyizhiweishengwudeshengchang,yingjinliangfangzhi。suoduangaowenmiejunshijian,huojiangtangyuhandanhuahewufenkaimiejun,kefangzhizhezhongfanying。
4. 培養基的物理狀態
含瓊脂培養基,若滅菌前未進行加熱溶解,滅菌後需充分搖勻使用。瓊脂培養基不可反複熔化使用;待用的瓊脂培養基可置47-50℃水浴保溫或50-60℃烘箱保溫,一般不可超過4xiaoshi。ruopeiyangjizhonghanyoujiaoduoburongxingwuzhi,ruhuangdoubingfen,yaojinliangfenzhuangjunyun,zaimiejunshiyaojinliangfangzhipeiyangjipenchulai,kezaimiejunjieshuhoudenghuizaikaiyaliguohuojianshaomeipingzhuangliang。
總之,在配製培養基時我們既要考慮培養基組成成分,也要考慮培養基物理狀態、pHzhihemiejunxiaoguodeng。lingwaishuidechunduyehenzhongyao,yibantianranshuizhonghanyoujiaoduodekuangwuyanlizi,huiyingxiangpeiyangjizhongchangliangheweiliangyuansu,jineryingxiangweishengwudeshengchangfanzhi。
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