平板劃線
板劃線的操作是為了將菌稀釋從而獲得純培養的單菌落。劃線有多種方式。 

1.三區平板劃線。

三區劃線中第一區所占的區域大約是平板麵積的五分之一到四分之一。第二區搭過第一區的麵積使微生物數量得到“稀釋”
，第三區搭過第二區的麵積使微生物數量進一步“稀釋”，第(di)三(san)區(qu)不(bu)可(ke)與(yu)第(di)一(yi)區(qu)有(you)重(zhong)疊(die)的(de)劃(hua)線(xian)。一(yi)般(ban)適(shi)用(yong)於(yu)可(ke)疑(yi)菌(jun)落(luo)的(de)分(fen)離(li)
，或(huo)可(ke)疑(yi)菌(jun)落(luo)的(de)二(er)次(ci)平(ping)板(ban)分(fen)離(li)。通(tong)常(chang)劃(hua)完(wan)三(san)區(qu)後(hou)就(jiu)可(ke)以(yi)出(chu)現(xian)單(dan)菌(jun)落(luo)。三(san)區(qu)劃(hua)線(xian)如(ru)下(xia)圖(tu)。

2.四區平板劃線。

siqupingbanhuaxianyushangmiandesanquhuaxianleisi，zhishimeiyiqudehuaxianmianjixiangyingjianxiao，tongyangdisanqubukeyudiyiquxiangzhongdie
，disiqubukeyudierquhediyiquxiangzhongdie

，siquhuaxianbisanquhuaxianduoxishiyici，zheyangtongguozengjiahuaxianquyu
，youkenenghuifenlidaogengduogengchundedanjunluo。

3.單次連續“之”字平板劃線

其實在微生物劃線接種中，無論是試管斜麵劃線接種還是平板劃線接種
，都會用到“之”字劃線。“之”字劃線的要領是：往複不間斷劃線，但是又不與劃過的路線重複或重疊。如果菌量比較大，就可以劃得更為密集或者增加一塊平板繼續“之”字劃線（即連續劃兩塊板）。“之”字劃線一般適用於分離本身在此培養基上單一且黏性較大的菌類或可疑菌落的純培養。操作如下圖所示。

4.網狀平板劃線

網狀平板花線，其實就是兩次方向垂直的“之”zihuaxianzhongdiezaiyiqi，yibanyongyuchunpeiyang，mudeshitongguozengjiagengduodehuaxianlujinglaihuodegengduodechunpeiyangwu，tebieshizhenduiyixieshengchangjiaomanhuojunluofeichangxixiaodejunlei。

在以上的這些平板劃線的方式中，三區平板劃線最常用的是分區劃線法，詳細操作步驟見下圖。

①將接種環放在火焰上灼燒
，直到接種還環燒紅。

②在火焰旁冷卻接種換環，打開試管塞。

③將試管口通過火焰
，旋轉試管口並小幅度來回移動試管
，切不可長時間讓試管口停滯於火焰上加熱。

④將已冷卻的接種環伸入菌液中，挑取一環菌液。

⑤將試管口通過火焰幾次後，塞上試管塞。將試管放回試管架。

⑥左手拿起培養皿
，將培養皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌液的接種環迅速深入平皿內。從平皿邊緣開始“之”字劃線（基準線也稱第一區域）
，大約劃過平皿的五分之一到四分之一左右的麵積。關閉培養皿蓋，將培養皿調轉大約120°。再次灼燒接種環，將接種環在空氣中或靠在培養皿蓋內側冷卻後從第一區域末端開始往第二區內劃線。兩個區域劃線的交角大約是120°。重複以上動作，完成第三區（甚至第四區）劃線操作。注意：當前操作的劃線隻能與相鄰前一區域相交，絕不能與其他區域的劃線有重疊。

一般三區劃線就能分離出單菌落，理想的三區分區劃線平板培養後的結果見下圖。第一區和第二區前部的細菌生長成“直線”
，第二區後部的細菌生長呈“虛線”。第三區呈“虛線”和離散的“小點”（即單菌落）。

平板傾注接種的步驟具體操作如圖。

1.先在酒精燈火焰旁打開無菌空平皿
，注意開啟幅度不宜過大，加入一定量的樣液。

2.按“倒平板”的步驟加入培養基（注意培養基要水浴保溫在46°左右，溫度太低
，培養基容易凝固
，溫度太高容易燙傷細菌）。

3.將jiang平ping皿min蓋gai上shang蓋gai。在zai桌zhuo麵mian劃hua圓yuan圈quan滑hua動dong，幅fu度du不bu要yao太tai大da以yi免mian培pei養yang基ji灑sa漏lou或huo濺jian到dao平ping皿min皿min蓋gai。混hun合he均jun勻yun後hou，將jiang平ping皿min置zhi於yu桌zhuo麵mian，待dai平ping皿min凝ning固gu後hou，翻fan轉zhuan平ping皿min堆dui疊die放fang於yu培pei養yang箱xiang中zhong培pei養yang。有you時shi還hai會hui在zai凝ning固gu的de培pei養yang基ji表biao麵mian再zai倒dao一yi層ceng培pei養yang基ji，防fang止zhi蔓man延yan菌jun落luo的de出chu現xian。

平板塗布是將少量（通常0.2mL~0.5mL）係(xi)列(lie)稀(xi)釋(shi)的(de)菌(jun)液(ye)塗(tu)布(bu)在(zai)預(yu)先(xian)傾(qing)注(zhu)好(hao)的(de)固(gu)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)上(shang)
，靠(kao)塗(tu)布(bu)棒(bang)在(zai)瓊(qiong)脂(zhi)表(biao)麵(mian)均(jun)勻(yun)鋪(pu)開(kai)，培(pei)養(yang)後(hou)獲(huo)得(de)菌(jun)落(luo)個(ge)數(shu)的(de)一(yi)種(zhong)計(ji)數(shu)技(ji)術(shu)。平(ping)板(ban)塗(tu)布(bu)的(de)操(cao)作(zuo)如(ru)圖(tu)。

1.無菌移取一定量樣液於平皿固體培養基中央。

2.玻璃塗布棒蘸取酒精。注意始終保持塗布棒的塗布一端向下
，並且塗布棒上的酒精既要覆蓋全部即將深入平皿的部位又不能滴淌。

3.通過酒精燈火焰點燃。一定注意防止酒精倒流或濺溢引燃物品或燒到手。

4.zuoshoujiangmingaizaijiujingdenghuoyanpangbiandakaiyigefengxi，youshoujiangzhuoshaoguodetububangtubuyiduankaozaimingaishanglengque。lengquehoujiangpingmingaikaidayixie
，yongtububangguayangyezaipeiyangjibiaomianjunyuntubukai。tubudeshihou，tububangbunengchupengpingminneicebianyuan。ruguoyoutiaojian，tubuguochengyingjiangpingminzhiyuxuanzhuandetubutaishang。

5.塗布棒再次蘸取酒精，通過火焰點燃滅菌。

6.待平皿表麵液體晾幹後
，翻轉平皿

，置於培養箱培養。