下麵詳細介紹一下革蘭氏染色法
、乳酸酚棉藍染色法、芽孢染色法
、莢膜染色、法鞭毛染色法

一
、革蘭氏染色

1 操作步驟

塗片：將培養的不同菌分別作塗片（注意塗片切不可過於濃厚），幹燥、固定。固定時通過火焰1-2 次即可，不可過熱，以載玻片不燙手為宜。

初染：加結晶紫液蓋滿標本處
，染一分鍾後水洗，並將玻片上積水輕輕甩淨。

媒染：加碘液蓋滿標本處
，1分鍾後水洗，甩淨玻片上積水。

脫色：加95%酒精蓋滿標本，輕輕搖動玻片，約20秒鍾後水洗、甩幹。

複染：加稀釋石炭酸複紅液或沙黃溶液1-2滴蓋滿標本
，染30秒鍾後水洗，待標本自幹或用吸水紙印幹。

觀察：鏡jing檢jian幹gan燥zao後hou置zhi油you鏡jing觀guan察cha
，革ge蘭lan氏shi陰yin性xing菌jun呈cheng紅hong色se，革ge蘭lan氏shi陽yang性xing菌jun呈cheng紫zi色se。以yi分fen散san開kai的de細xi菌jun的de革ge蘭lan氏shi染ran色se反fan應ying為wei準zhun
，過guo於yu密mi集ji的de細xi菌jun，常chang常chang呈cheng假jia陽yang性xing。

二、乳酸酚棉藍染色法

1 操作步驟

  染色：於潔淨載玻片上，滴1-2滴乳酸酚棉藍染色液，用解剖針從黴菌菌落的邊緣外取少量帶有  孢bao子zi的de菌jun絲si置zhi於yu染ran色se液ye中zhong，再zai細xi心xin地di將jiang菌jun絲si挑tiao散san開kai，然ran後hou小xiao心xin地di蓋gai上shang蓋gai玻bo片pian
，注zhu意yi不bu要yao產chan生sheng氣qi泡pao。置zhi顯xian微wei鏡jing下xia先xian用yong低di倍bei鏡jing觀guan察cha，必bi要yao時shi再zai換huan高gao倍bei鏡jing。

  觀察：染好後的標本片用顯微鏡觀察結果，酵母菌細胞

、菌絲體和產孢結構等皆可被染成亮藍色
；背景為暗淡的藍色。

三芽孢染色法

1 操作步驟

一yi般ban革ge蘭lan氏shi染ran色se隻zhi能neng把ba芽ya孢bao周zhou圍wei的de細xi胞bao質zhi染ran色se
，不bu能neng直zhi接jie把ba芽ya孢bao染ran上shang，故gu芽ya孢bao會hui透tou亮liang
，能neng夠gou觀guan察cha到dao芽ya孢bao。若ruo不bu清qing晰xi可ke進jin一yi步bu采cai用yong芽ya孢bao染ran色se法fa。

染色：用接種環取菌樣塗布於玻片上，待自然幹燥。而後通過火焰加熱將菌固定於玻片上。將塗片放入平皿內，片上放兩層濾紙，滴加足量的5.0%孔雀綠水溶液。將平皿蓋好，54℃-56℃水浴加熱30min。取出，去濾紙，用純化水衝洗殘留孔雀綠溶液。加0.5% 沙黃水溶液
，染1min。水洗
，待幹後油鏡觀察。

觀察：染好後的標本片用顯微鏡觀察結果，芽孢呈綠色

，菌體呈紅色。

三
、莢膜染色法

莢膜(capsule)是shi某mou些xie細xi菌jun表biao麵mian的de特te殊shu結jie構gou，是shi位wei於yu細xi胞bao壁bi表biao麵mian的de一yi層ceng鬆song散san的de粘zhan液ye物wu質zhi，莢jia膜mo的de成cheng分fen因yin不bu同tong菌jun種zhong而er異yi
，主zhu要yao是shi由you葡pu萄tao糖tang與yu葡pu萄tao糖tang醛quan酸suan組zu成cheng的de聚ju合he物wu。

1 操作步驟

塗片：按常規法塗片，可多挑些菌體與水充分混合
，並將粘稠菌液盡量塗開
，塗布麵積不宜過大。

幹燥：在空氣中自然幹燥。

染色：用溶液A染5-7分鍾。

脫色：用溶液B洗去結晶紫
，脫色要適度（衝洗2遍）。用吸水紙吸幹，並立即加1-2滴香柏油於塗片處，以防止CuSO4結晶的形成。鏡檢。

觀察：背景藍紫色，菌體紫色，莢膜無色或淺紫色。

五、鞭毛染色法

長chang在zai某mou些xie細xi菌jun菌jun體ti上shang細xi長chang而er彎wan曲qu的de具ju有you運yun動dong功gong能neng的de蛋dan白bai質zhi附fu屬shu絲si狀zhuang物wu
，稱cheng為wei鞭bian毛mao。許xu多duo細xi菌jun都dou是shi運yun動dong的de，通tong常chang使shi用yong鞭bian毛mao移yi向xiang營ying養yang物wu質zhi。鞭bian毛mao很hen薄bo，不bu易yi染ran色se和he觀guan察cha。

1 操作步驟

塗片：取幼齡細菌培養物製成塗片。

幹燥：火焰幹燥及固定。

染色：鞭毛染色液2-3滴，在室溫中染色2-3分鍾。

脫色：水洗
，幹燥後鏡檢（油鏡）。

觀察：菌體和鞭毛呈紫色。