用yong懸xuan滴di法fa
，通tong過guo鏡jing檢jian觀guan察cha細xi菌jun細xi胞bao是shi否fou具ju有you運yun動dong性xing
，可ke以yi通tong過guo普pu通tong顯xian微wei鏡jing或huo相xiang差cha顯xian微wei鏡jing檢jian查zha。用yong普pu通tong顯xian微wei鏡jing時shi光guang線xian不bu宜yi太tai強qiang
，要yao適shi當dang減jian弱ruo。具ju體ti操cao作zuo步bu驟zhou方fang法fa如ru下xia。

待測菌株先在肉湯中培養18h~24h,也可以從生長了18h-24 h的營養瓊脂斜麵上挑取少量菌落用1滴肉湯或生理鹽水乳化
，注意菌株的濃度不要太大。通過以下方法可以將1滴菌懸液懸浮在凹槽載玻片的蓋玻片上。

1.具體操作步驟

(1)取一潔淨的蓋玻片，在蓋玻片四周點上凡士林(見圖5-16)。

(2)用接種環挑取一小環菌株置於操作好的幹淨蓋玻片上，不要讓液滴散開(見圖5-17)。

(3)將凹槽載玻片蓋在蓋玻片上
，保持菌滴在槽中間，緩慢用力壓下載玻片
，借助凡士林的黏性使載玻片和蓋玻片結合在一起(見圖5-18),快速平穩地將玻片反轉過來，菌滴應處於懸滴狀態(見圖5-19)。盡快觀察。

(4)觀察懸滴玻片時，將鏡下聚光鏡從其正常λ置略微下調
，並使光圈幾乎處於全關閉狀態。這是因為δ染色的菌體在太亮的環境下難於被觀察到，而且

，光造成的熱效應會使菌體喪失運動性。

(5)首shou先xian用yong低di倍bei物wu鏡jing聚ju焦jiao懸xuan液ye的de邊bian緣yuan，移yi動dong載zai玻bo片pian，讓rang懸xuan液ye在zai視shi野ye的de中zhong央yang。通tong過guo觀guan察cha液ye滴di邊bian緣yuan線xian外wai出chu現xian的de小xiao冷leng凝ning水shui滴di能neng夠gou很hen容rong易yi識shi別bie出chu懸xuan滴di的deλ置。換成高倍物鏡(40倍)對dui液ye滴di邊bian緣yuan重zhong新xin聚ju焦jiao。必bi要yao時shi，略lve微wei打da開kai光guang圈quan。這zhe時shi細xi菌jun應ying很hen容rong易yi觀guan察cha到dao，尤you其qi在zai液ye滴di的de邊bian緣yuan
，深shen度du較jiao淺qian，細xi菌jun停ting留liu在zai有you限xian的de空kong間jian領ling域yu。用yong油you鏡jing觀guan察cha玻bo片pian時shi，因yin為wei聚ju焦jiao時shi鏡jing頭tou的de移yi動dong可ke能neng造zao成cheng蓋gai玻bo片pian移yi動dong

，從cong而er造zao成cheng液ye滴di流liu動dong。這zhe會hui嚴yan重zhong影ying響xiang觀guan察cha效xiao果guo
，û有經驗的人員甚至還會誤認為是菌體在運動。

注意：必須正確區分布朗運動(一種液體中懸浮的微小粒子的連續運動，是由於液體周Χ的分子不對稱的撞擊造成的)
、玻片輕微傾斜造成的一個方向上的漂移和真正的菌體運動。

有you時shi可ke以yi根gen據ju運yun動dong方fang式shi的de不bu同tong來lai鑒jian定ding菌jun種zhong，如ru李li斯si特te氏shi菌jun是shi翻fan跟gen頭tou式shi的de運yun動dong，噬shi胞bao菌jun為wei滑hua行xing運yun動dong。要yao想xiang通tong過guo運yun動dong方fang式shi來lai鑒jian定ding菌jun種zhong，就jiu必bi須xu熟shu悉xi不bu同tong菌jun種zhong的de運yun動dong方fang式shi，觀guan察cha比bi較jiao已yi知zhi菌jun株zhu的de運yun動dong情qing況kuang可ke以yi不bu斷duan積ji累lei經jing驗yan。

2.注意事項

檢驗時應注意以下幾點：

(1)細菌細胞間有明顯λ移者，才能判定為運動性。由於細菌細胞太小，在懸液中有布朗運動，即ÿ個細胞均在原地顫動
，彼此的λ置關係卻ûgaibian
，qiebukejiangzhezhongxianxiangwupanweijuyundongxing。youyuzaibopianyugaibopianzhijianxuanyeguoduo，zaishiyongyoujinwujingtiaojiaoshi
，xuanyezaigaibopianxialiudong。zheshikekandaodapixijunxibaodouyitongyisuduxiangtongyifangxiangyundong，zheyebushizhenzhengdeyundongxing。zhenzhengdeyundongxingyingshixijunxibaobicideλ置關係明顯的改變。細菌的運動性因種或菌株而異。有的運動迅速，有的運動緩慢。能運動的菌株也不一定ÿ個細胞都同時運動
，常常是大多數細胞不運動
，少數細胞明顯運動。

(2)有些細胞不以鞭ë運動，而是滑動。鏡檢時應注意與遊動區分開。一般遊動速度高，滑動則遲緩。遊動隻能在懸液中運動
，滑動則須附在固體表麵進行。

(3)如ru室shi溫wen太tai低di，以yi致zhi載zai物wu台tai溫wen度du太tai低di。有you的de細xi菌jun會hui因yin溫wen度du太tai低di而er不bu能neng運yun動dong，應ying該gai設she法fa提ti高gao載zai物wu台tai或huo載zai玻bo片pian的de溫wen度du
，達da到dao試shi驗yan菌jun能neng運yun動dong的de溫wen度du(如在室溫較高的試驗室鏡檢
，或將載玻片放置保溫箱中一會兒再觀察)。

(4)鏡(jing)檢(jian)好(hao)氧(yang)菌(jun)時(shi)，則(ze)可(ke)能(neng)因(yin)蓋(gai)玻(bo)片(pian)下(xia)供(gong)氧(yang)不(bu)足(zu)而(er)使(shi)試(shi)驗(yan)菌(jun)不(bu)能(neng)表(biao)現(xian)出(chu)運(yun)動(dong)性(xing)，遇(yu)到(dao)這(zhe)種(zhong)情(qing)況(kuang)則(ze)應(ying)使(shi)蓋(gai)玻(bo)片(pian)下(xia)殘(can)留(liu)一(yi)兩(liang)個(ge)小(xiao)氣(qi)泡(pao)
，鏡(jing)檢(jian)氣(qi)泡(pao)四(si)周(zhou)或(huo)蓋(gai)玻(bo)片(pian)邊(bian)緣(yuan)的(de)細(xi)菌(jun)運(yun)動(dong)性(xing)。

(5)用油鏡觀察時，蓋玻片的厚度以不超過0.17mm為宜。用過厚的蓋玻片，調焦有困難。用相差油鏡觀察時載玻片的厚度以約為1.2mm為宜。

根據有鞭ë的de細xi菌jun可ke以yi在zai半ban固gu體ti培pei養yang基ji中zhong遊you動dong卻que又you不bu能neng任ren意yi遊you走zou的de現xian象xiang
，觀guan察cha細xi菌jun生sheng長chang情qing況kuang，判pan定ding試shi驗yan菌jun是shi否fou有you運yun動dong性xing，可ke使shi用yong試shi驗yan菌jun能neng良liang好hao生sheng長chang的de培pei養yang基ji，在zai其qi中zhong加jia入ru0.3%~0.6%的瓊脂(所用瓊脂的量可因品牌不同而異),yibanbangutipeiyangjiyingshifangdaoshiguanbuliudong，erzaishoushangqingqingqiaodashiqiongzhijipolieweiyi。duiyibanchangjianxijunkejieheputaotangyanghuafajiaoshiyanguanchayundongxing。

用直針穿刺接種試驗菌於半固體培養基內(見圖5-20),適溫培養。細菌的運動性可用透射光目測。如生長物隻生長在穿刺線上，邊緣十分清晰，則表示試驗菌無運動性；如生長物由穿刺線向四周呈雲霧狀擴散，其邊緣呈雲霧狀
，則表明試驗菌株有運動性。對生長快的細菌培養1d後觀察。如第一天不能判定可在第2d-3d再觀察。如2d-3d時仍不能判定是否有運動性，可延遲5d-6d再觀察一次。因為遊動力弱的細菌，在半固體培養基中第1d-2d中(zhong)尚(shang)不(bu)能(neng)從(cong)穿(chuan)刺(ci)線(xian)遊(you)開(kai)，故(gu)需(xu)多(duo)培(pei)養(yang)幾(ji)天(tian)再(zai)觀(guan)察(cha)。如(ru)試(shi)驗(yan)菌(jun)在(zai)半(ban)固(gu)體(ti)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)產(chan)氣(qi)泡(pao)會(hui)影(ying)響(xiang)穿(chuan)刺(ci)線(xian)上(shang)的(de)生(sheng)長(chang)物(wu)的(de)擴(kuo)散(san)情(qing)況(kuang)，不(bu)可(ke)誤(wu)將(jiang)不(bu)運(yun)動(dong)的(de)細(xi)菌(jun)判(pan)為(wei)有(you)運(yun)動(dong)性(xing)。如(ru)試(shi)驗(yan)菌(jun)是(shi)好(hao)氧(yang)細(xi)菌(jun)，穿(chuan)刺(ci)線(xian)上(shang)生(sheng)長(chang)物(wu)很(hen)少(shao)
，可(ke)檢(jian)查(zha)從(cong)培(pei)養(yang)基(ji)表(biao)麵(mian)向(xiang)下(xia)滲(shen)入(ru)的(de)生(sheng)長(chang)物(wu)的(de)情(qing)況(kuang)。